Zoonens及其同事首次描述了環(huán)辛基丙烯酰胺（COA）/丙烯酸（AA）共聚物用于穩(wěn)定膜蛋白（1），（2）。這些共聚物可以在缺乏表面活性劑的情況下，將膜蛋白從天然膜中提取到胞雙層的一個(gè)區(qū)域，并形成類似盤狀或納米盤的粒子。基于HEPES的Amphipol產(chǎn)品含有共聚物和50 mM HEPES緩沖液，調(diào)整至pH 7.5，因此只需加入雙蒸餾水即可直接應(yīng)用。所選的pH值非常有效地用于蛋白質(zhì)溶解。Cube Biotech的UltrasoluteTM Amphipol 18是環(huán)辛基丙烯酰胺和丙烯酸的高純度共聚物，分子量（Mw）約為7,300。溶解后，共聚物的濃度為1.0至5.0％，當(dāng)加入到膜蛋白中時(shí)，會(huì)導(dǎo)致高濃度。共聚物在與脂質(zhì)接觸的表面具有疏水性，外部表面具有親水性。這種結(jié)構(gòu)使得納米盤在水溶液中高度溶解，并允許在缺乏表面活性劑的情況下溶解膜蛋白。該產(chǎn)品可與磷脂一起使用，如二十二碳二酰基甘油磷酰膽堿（DMPC）或棕櫚酰亞油酰磷脂酰膽堿（POPC），結(jié)合十二烷基硫酸鈉。

作為Cube Biotech在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Ultrasolute Amphipol 18 HEPES。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

共聚物溶液再構(gòu)成

UltrasoluteTM Amphipol共聚物以凍干形式交付，原溶液含有50 mM HEPES，pH7.5。每個(gè)小分子含有50毫克或1克聚合物。每50毫克聚合物添加0.5毫升雙蒸餾水將恢復(fù)原始溶液，共聚物濃度為10%。根據(jù)不同的應(yīng)用方案需要，這種儲(chǔ)備溶液可以進(jìn)一步稀釋。

技術(shù)細(xì)節(jié)

名稱：環(huán)辛基/丙烯酸共聚物，鈉鹽，50 mM HEPES，pH 7.5

吸光度（280 nm，1%溶液）：大于0.1

填充量：環(huán)辛基/丙烯酸比例50:50

溶解度：大于10%（H2O）

顏色：白色至淺黃色

氣味：無(wú)味

pH值（溶解后）：7.5 ± 0.3

運(yùn)輸和儲(chǔ)存

運(yùn)輸溫度：室溫

凍干共聚物儲(chǔ)存：-20°C，可保存數(shù)年

溶解共聚物儲(chǔ)存：2-8°C，可保存數(shù)天

文獻(xiàn)參考：

1. Ana?s Marconnet, Baptiste Michon, Christel Le Bon, Fabrice Giusti, Christophe Tribet, and Manuela Zoonens*; Solubilization and stzabilization of membrane proteins by cycloalkane-modified amphiphilic polymers,Biomacromolecules 2020, 21, 8, 3459–3467

2. Anna J. Higgins, Alex J. Flynn, Ana?s Marconnet, Laura J. Musgrove , Vincent L. G. Postis, Jonathan D. Lippiat ,Chun-wa Chung, Tom Ceska, Manuela Zoonens, Frank Sobott, and Stephen P. Muench, Cycloalkane-modifiedamphiphilic polymers provide direct extraction of membrane proteins for CryoEM analysis, CommunicationsBiology, volume 4, Article number: 1337, 2021

Cube Biotech 是一家專注于蛋白純化產(chǎn)品的德國(guó)生產(chǎn)商，尤其擅長(zhǎng)蛋白純化及膜蛋白純化。Cube Biotech 研發(fā)團(tuán)隊(duì)擁有近50年經(jīng)驗(yàn)在膜蛋白的表達(dá)、純化和結(jié)晶等研究，為制藥和生物技術(shù)行業(yè)以及學(xué)術(shù)環(huán)境提供這些經(jīng)驗(yàn)。膜蛋白的結(jié)構(gòu)分析仍是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)，尤其是關(guān)于人源膜蛋白。德國(guó) Cube Biotech 為研究和進(jìn)步釋放膜蛋白的力量，以團(tuán)隊(duì)所有科學(xué)專業(yè)知識(shí)支持制藥和生物技術(shù)界。通過(guò)運(yùn)用前沿科學(xué)技術(shù)，德國(guó) Cube Biotech 提供的系列產(chǎn)品解決膜蛋白質(zhì)純化和穩(wěn)定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白質(zhì)親和層析填料和蛋白質(zhì)穩(wěn)定化的高品質(zhì)產(chǎn)品，產(chǎn)品的配套試劑包括去污劑、無(wú)細(xì)胞表達(dá)裂解物、納米盤支架蛋白和膜蛋白結(jié)晶板。

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