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CD40:CD40L TR-FRET檢測測定原理說明

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2024-08-13     
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CD40是一種主要表達(dá)在B細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和某些樹突細(xì)胞表面的共刺激分子。它通過與CD40配體(CD40L,也稱為CD154)結(jié)合,發(fā)揮其生物學(xué)功能,主要參與免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié),特別是在T細(xì)胞依賴的B細(xì)胞激活和抗體產(chǎn)生過程中。

CD40-CD40L的相互作用是免疫系統(tǒng)中一個關(guān)鍵的信號通路,它促進(jìn)B細(xì)胞的增殖、分化和存活,同時增強(qiáng)抗體的類別轉(zhuǎn)換。此外,CD40信號還參與樹突細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的成熟過程,從而影響T細(xì)胞的激活和整個適應(yīng)性免疫反應(yīng)。

CD40在多種疾病的發(fā)病機(jī)制中扮演著角色,包括自身免疫疾病、炎癥性疾病和某些類型的癌癥。例如,在某些自身免疫疾病中,CD40信號的異常激活可能導(dǎo)致B細(xì)胞功能失調(diào),進(jìn)而產(chǎn)生自身抗體。

鑒于CD40在免疫調(diào)節(jié)中的核心作用,它已成為治療某些疾病的潛在靶點(diǎn)。通過靶向CD40或其配體的生物制劑,可以調(diào)節(jié)免疫反應(yīng),治療如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫疾病。

 

CD40:CD40L TR-FRET檢測試劑盒旨在測量CD40(分化簇40)與CD40L(CD40配體)的結(jié)合活性,用于使用TR-FRET(時間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移)進(jìn)行篩選和分析應(yīng)用。它使用鋱標(biāo)記的供體和標(biāo)記的受體來完成TR-FRET配對。CD40:CD40L TR-FRET檢測試劑盒采用方便的384孔格式,含有足夠的重組生物素化CD40(氨基酸21-193)、重組CD40L(氨基酸116-261)、Tb標(biāo)記的供體、染料標(biāo)記的受體和用于384反應(yīng)的檢測緩沖液。

CD40:CD40L TR-FRET檢測試劑盒

圖1:CD40:CD40L TR-FRET檢測試劑盒示意圖

將含有鋱標(biāo)記供體、染料標(biāo)記受體、CD40、CD40L和抑制劑的樣品孵育90分鐘。然后使用熒光閱讀器測量熒光強(qiáng)度。在CD40與CD40L結(jié)合的情況下,由于供體和受體的接近,會發(fā)生能量轉(zhuǎn)移。結(jié)合的破壞導(dǎo)致能量傳遞的減少。λ=665 nm處的熒光強(qiáng)度直接對應(yīng)于CD40與CD40L的結(jié)合。

 

艾美捷CD40:CD40L TR-FRET檢測

貨號:BPS-79258

同義詞:T細(xì)胞抗原Gp39,腫瘤壞死因子相關(guān)激活蛋白,TRAP,腫瘤壞死因子配體超家族成員5,TNFSF5,CD154,CD40,CD40分子

試劑盒格式:TR-FRET(時間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移)

物種:人類

提供形式:該試劑盒以方便的384孔格式提供。

未提供的必需材料:

能夠測量時間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移(TR-FRET)的熒光微孔板閱讀器

可調(diào)節(jié)的微量移液器和無菌吸頭

UniProt #CD40: P25942; CD40L: P29965

存儲/穩(wěn)定性:如果按照指示存儲材料,該試劑盒在收到日期起的6個月內(nèi)將表現(xiàn)最佳。

使用說明:詳見試劑盒數(shù)據(jù)表的詳細(xì)協(xié)議

應(yīng)用:

研究酶動力學(xué)。

在高通量篩選(HTS)應(yīng)用中篩選小分子抑制劑。

運(yùn)輸溫度:-80°C

 

CD40:CD40L TR-FRET檢測文獻(xiàn)參考:

Annis A., et al., 2004 J. Amer. Chem. Soc. 126(4): 15495-15503.

Yan, T., et al., 2001 J. Cellular Biochem. 83(2): 320-325.

Tang T., et al., 2021 Pharmacol The 219:107709.

 

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