鐵檢測試劑盒（Nitroso-PSAP）采用比色法檢測鐵離子濃度。其原理是利用弱酸性緩沖液使鐵從轉(zhuǎn)鐵蛋白-鐵復(fù)合物中解離出來，再通過還原劑將三價(jià)鐵還原為二價(jià)鐵。二價(jià)鐵離子與Nitroso-PSAP（作為顯色劑）反應(yīng)生成藍(lán)色絡(luò)合物，該絡(luò)合物的吸光度與樣本中的鐵濃度成正比。通過在740-760 nm波長范圍內(nèi)測量吸光度，即可定量檢測樣本中的鐵含量

艾美捷JaICA鐵檢測試劑盒（Nitroso-PSAP）：#CFE-010組成：

R-1 緩沖液：1x16毫升 即用型

R-2 緩沖液：1x7毫升 即用型

R-3 螯合顯色劑：1x0.7毫升 即用型

STD 200微克/分升鐵標(biāo)準(zhǔn)液：1x1.5毫升 即用型

測定準(zhǔn)備：

1. 使用前將所有試劑平衡至室溫。

2. 準(zhǔn)備工作試劑：將70微升R-2與7微升R-3混合用于1次檢測。

（例如）50次檢測的準(zhǔn)備

R-2：70微升x50次檢測=3.5毫升

R-3：7微升x50次檢測=350微升

在容器中混合3.5毫升R-2和350微升R-3。

樣本準(zhǔn)備：

血清/血漿：應(yīng)通過過濾或離心去除血清和血漿樣本中的不溶性物質(zhì)。不能使用EDTA血漿。

尿液（24小時(shí)混合尿液）/生物液體：向樣本中加入6M鹽酸，調(diào)節(jié)pH至2.0-3.0（例如，向1毫升裂解液中加入5-10微升6M鹽酸）。以6000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘。收集上清液用于測定。

組織：加入5%TCA溶液，渦旋1分鐘，在4-8°C下孵育30分鐘。以6000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘。收集上清液用于測定。

注意：樣本pH應(yīng)在pH 2到pH 8之間。

操作步驟：

樣本處理：對于血清和血漿樣本，需去除不溶性物質(zhì)，可采用過濾或離心的方式。注意，EDTA-血漿不能使用。

試劑準(zhǔn)備：試劑盒通常包含緩沖液和顯色液（含Nitroso-PSAP）。

反應(yīng)與測量：將樣本與試劑混合后，二價(jià)鐵離子與Nitroso-PSAP反應(yīng)生成藍(lán)色絡(luò)合物，使用分光光度計(jì)在740-760 nm波長范圍內(nèi)測量吸光度。

結(jié)果計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中的鐵濃度。