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在細(xì)胞生物學(xué)研究中,對(duì)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的可視化是理解細(xì)胞形態(tài)、運(yùn)動(dòng)及功能的重要手段。其中,微絲(actin filaments)作為細(xì)胞骨架的核心成分,其動(dòng)態(tài)變化與細(xì)胞分裂、遷移、收縮等關(guān)鍵過(guò)程密切相關(guān)。為了更精確地觀察和分析這些結(jié)構(gòu),科學(xué)家們常使用熒光標(biāo)記試劑進(jìn)行染色。而Cytoskeleton推出的Rhodamine Phalloidin (14 uM in methanol)(貨號(hào):CSK-PHDR1),作為一種高效的微絲染色試劑,憑借其高靈敏度和穩(wěn)定的性能,成為眾多實(shí)驗(yàn)室的首選,該產(chǎn)品由艾美捷代理。
一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Rhodamine Phalloidin 是一種基于羅丹明(Rhodamine)的熒光標(biāo)記物,專門用于特異性結(jié)合細(xì)胞內(nèi)的微絲結(jié)構(gòu)。它通過(guò)與肌動(dòng)蛋白(actin)的高親和力結(jié)合,能夠在熒光顯微鏡下清晰地顯示細(xì)胞骨架的分布和形態(tài)。該產(chǎn)品以 14 uM 的濃度溶解于甲醇 中,便于直接應(yīng)用于細(xì)胞樣本的染色實(shí)驗(yàn)。
作為 Cytoskeleton 公司出品的高質(zhì)量試劑,Rhodamine Phalloidin 經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保了其在不同實(shí)驗(yàn)條件下的穩(wěn)定性和一致性。該產(chǎn)品不僅適用于常規(guī)的細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn),還可用于定量分析、共聚焦顯微鏡觀察以及自動(dòng)化圖像處理系統(tǒng)中。
二、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 高靈敏度與特異性
Rhodamine Phalloidin 對(duì)微絲具有高度的特異性,能夠精準(zhǔn)識(shí)別并標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的肌動(dòng)蛋白纖維。這種特性使其在多種細(xì)胞類型中均能獲得清晰、均勻的染色效果,尤其適用于需要高分辨率圖像的研究場(chǎng)景。
此外,該試劑的熒光強(qiáng)度適中,既不會(huì)因過(guò)強(qiáng)信號(hào)造成背景干擾,也避免了因信號(hào)過(guò)弱導(dǎo)致的圖像模糊問(wèn)題,為研究人員提供了理想的觀察條件。
2. 簡(jiǎn)便的操作流程
Rhodamine Phalloidin 以 14 uM 濃度溶于甲醇 的形式提供,無(wú)需額外稀釋即可直接使用。這大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作步驟,減少了人為誤差的可能性。同時(shí),該產(chǎn)品兼容多種固定方法,包括乙醇、甲醇和丙酮固定法,適應(yīng)性強(qiáng),適合不同實(shí)驗(yàn)需求。
3. 良好的穩(wěn)定性與重復(fù)性
由于其獨(dú)特的配方設(shè)計(jì),Rhodamine Phalloidin 在儲(chǔ)存和使用過(guò)程中表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性。即使在多次使用后,仍能保持較高的染色效果和一致的熒光強(qiáng)度,顯著提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性。
4. 廣泛的應(yīng)用前景
Rhodamine Phalloidin 不僅可用于細(xì)胞骨架的常規(guī)染色,還廣泛應(yīng)用于以下研究領(lǐng)域:
細(xì)胞遷移與運(yùn)動(dòng)機(jī)制研究
細(xì)胞極性與形態(tài)變化分析
藥物對(duì)細(xì)胞骨架影響的評(píng)估
腫瘤細(xì)胞侵襲性檢測(cè)
發(fā)育生物學(xué)中的細(xì)胞結(jié)構(gòu)研究
在這些應(yīng)用中,Rhodamine Phalloidin 以其出色的成像質(zhì)量和可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),為科研人員提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。
三、使用建議
在使用 Rhodamine Phalloidin 進(jìn)行細(xì)胞染色時(shí),建議遵循以下基本步驟:
1. 細(xì)胞固定:采用適當(dāng)?shù)墓潭▌ㄈ缂状蓟蛞掖迹?duì)細(xì)胞進(jìn)行固定,以保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性。
2. 通透處理:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,使用 Triton X-100 或其他通透劑增加細(xì)胞膜通透性,使染色試劑能夠有效進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。
3. 染色:將 Rhodamine Phalloidin 按照推薦比例加入反應(yīng)體系中,孵育適當(dāng)時(shí)間(通常為30分鐘至1小時(shí))。
4. 清洗與封片:用 PBS 或其他緩沖液清洗細(xì)胞,去除未結(jié)合的染料,并使用含 DAPI 的封片劑進(jìn)行封片,以便于熒光顯微鏡觀察。
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