Calbryte 520 AM是一種綠色熒光鈣離子指示劑，具有卓越的亮度和光穩(wěn)定性，能夠靈敏檢測(cè)活細(xì)胞中的鈣流信號(hào)，適用于GPCR篩選及鈣信號(hào)傳導(dǎo)研究。艾美捷作為AAT Bioquest中國(guó)區(qū)代理商，分析一下其優(yōu)勢(shì)和技術(shù)突破：

-高品質(zhì)試劑：嚴(yán)格遵循最高生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)，確保結(jié)果一致性

-可靠性能：經(jīng)多種實(shí)驗(yàn)條件驗(yàn)證，表現(xiàn)穩(wěn)定

-廣泛應(yīng)用：適用于科研與診斷等多個(gè)領(lǐng)域

技術(shù)背景

細(xì)胞內(nèi)鈣流檢測(cè)是監(jiān)測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、開(kāi)展GPCR和鈣通道靶點(diǎn)高通量篩選的核心技術(shù)。自1989年Fluo-3問(wèn)世以來(lái)，F(xiàn)luo-4、Fluo-8、Cal-520等迭代產(chǎn)品不斷優(yōu)化信噪比，已成為共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)和高通量篩選的標(biāo)準(zhǔn)工具。然而，F(xiàn)luo-4及其前代產(chǎn)品均需使用丙磺舒防止染料外泄，這種依賴性會(huì)引入已知的復(fù)雜細(xì)胞效應(yīng)，影響實(shí)驗(yàn)可靠性。

技術(shù)突破

Calbryte 520AM通過(guò)創(chuàng)新設(shè)計(jì)徹底解決了上述問(wèn)題：

1.自主滯留機(jī)制：細(xì)胞穿透性染料進(jìn)入細(xì)胞后，經(jīng)酯酶水解生成極性分子，自然滯留于胞內(nèi)，無(wú)需丙磺舒輔助

2.卓越信號(hào)性能：與鈣離子結(jié)合后產(chǎn)生超高亮度熒光，信噪比顯著提升

3.無(wú)縫方法轉(zhuǎn)移：激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)與Fluo-4完全一致，可直接適配現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)方案

該技術(shù)組合使其成為評(píng)估GPCR/鈣通道靶點(diǎn)、篩選激動(dòng)劑/拮抗劑的最穩(wěn)健解決方案。

AAT Bioquest-Calbryte 520 AM：新一代綠色熒光鈣離子指示劑物理特性

參數(shù)|數(shù)值|

解離常數(shù)(Kd)|1200nM|

分子量|1090.90|

溶劑|DMSO|

光譜特性

-激發(fā)波長(zhǎng)：493nm

-發(fā)射波長(zhǎng)：515nm

-量子產(chǎn)率：0.75

存儲(chǔ)與安全

-存儲(chǔ)條件：冷凍（<-15℃），避光保存

-危險(xiǎn)代碼：XN

-使用限制：僅限科研使用（RUO）

儀器參數(shù)設(shè)置

流式細(xì)胞儀

-激發(fā)：488nm激光器

-發(fā)射：530/30nm濾光片

-檢測(cè)通道：FITC

熒光顯微鏡

-濾光片：FITC

-推薦板型：黑壁透明底板

熒光酶標(biāo)儀

-激發(fā)：490nm

-發(fā)射：525nm

-截?cái)嘀担?15nm

-讀取模式：底讀模式/可編程液體處理

此新一代鈣離子指示劑通過(guò)消除丙磺舒依賴、提升信號(hào)質(zhì)量，為活細(xì)胞鈣信號(hào)研究建立了新的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。

部分文獻(xiàn)參考：

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Calreticulin regulates TGF-β1-induced epithelial mesenchymal transition through modulating Smad signaling and calcium signaling

Authors: Wu, Yanjiao and Xu, Xiaoli and Ma, Lunkun and Yi, Qian and Sun, Weichao and Tang, Liling

Journal: The International Journal of Biochemistry & Cell Biology (2017)

Monosialoganglioside 1 may alleviate neurotoxicity induced by propofol combined with remifentanil in neural stem cells

Authors: Lu, Jiang and Yao, Xue-qin and Luo, Xin and Wang, Yu and Chung, Sookja Kim and Tang, He-xin and Cheung, Chi Wai and Wang, Xian-yu and Meng, Chen and Li, Qing and others, undefined

Journal: Neural Regeneration Research (2017): 945

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