雌二醇（E2）是一種屬于雌激素類固醇激素，也是主要的女性性激素之一。它在調(diào)節(jié)女性生殖周期、發(fā)情和月經(jīng)方面發(fā)揮著重要作用。雌二醇對于女性生殖組織（如乳房、子宮和陰道）的發(fā)育和維持至關(guān)重要，不僅在青春期、成年期和妊娠期間起作用，還對骨骼、脂肪、皮膚、肝臟和大腦等許多其他組織產(chǎn)生重要影響。盡管男性的雌激素水平較低，但雌激素在男性中也具有重要功能。此外，雌二醇存在于大多數(shù)脊椎動物、甲殼動物、昆蟲、魚類和其他動物物種中。

為了檢測雌二醇含量，可以使用競爭性抑制酶免疫測定技術(shù)。該試劑盒提供了預(yù)包被特異性抗雌二醇抗體的微孔板。標準品或樣品與與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的雌二醇一起加入到微孔板的孔中。競爭性抑制反應(yīng)發(fā)生在HRP標記的雌二醇與未標記的雌二醇與抗體之間。然后將底物溶液加入孔中，顏色的發(fā)展與樣品中雌二醇的含量成反比。最后停止顏色的發(fā)展并測量顏色的強度。

以上是對雌二醇的描述以及用于檢測雌二醇含量的競爭性抑制酶免疫測定技術(shù)的步驟。

艾美捷EZElisa雌二醇ELISA試劑盒基本參數(shù)：

目錄號：D-AEK0003

規(guī)格：48T/96T

儲存：在4°C下儲存12個月，避光。

檢測范圍：40 pg/mL-1,000 pg/mL

靈敏度：40 pg/mL

精密度：內(nèi)部試驗精密度：變異系數(shù)（CV）＜15%。間接試驗精密度：變異系數(shù)（CV）＜15%

恢復(fù)率：恢復(fù)率范圍為85%至115%，總體平均恢復(fù)率為100%

特異性：EZElisa?雌二醇（E2）ELISA試劑盒對雌二醇的檢測具有高靈敏度和優(yōu)異的特異性。未觀察到雌二醇與類似物之間的顯著交叉反應(yīng)或干擾。

適用樣品：血清、血漿

供應(yīng)材料和儲存條件：

Note: Std1: 0 pg/mL; Std2: 40 pg/mL; Std3: 100 pg/mL; Std4: 200 pg/mL; Std5: 400 pg/mL; Std6；1,000 pg/mL.

EZElisa雌二醇ELISA試劑盒試劑準備：

注意：使用前將所有試劑平衡至室溫。按照微孔板讀數(shù)儀的說明進行設(shè)置，并在測量光密度之前預(yù)熱15分鐘。

1×洗滌緩沖液：將洗滌緩沖液（20×）用去離子水稀釋1:20，得到1×洗滌緩沖液。儲存在4°C。如果洗滌緩沖液濃縮物中形成了結(jié)晶，請輕輕加熱至完全溶解。儲存在室溫下。請注意，1×洗滌緩沖液穩(wěn)定期為30天。

工作溶液：根據(jù)辣根過氧化物酶偶聯(lián)的雌二醇的體積取相應(yīng)的檢測緩沖液1/10，并與辣根過氧化物酶偶聯(lián)的雌二醇混合，得到工作溶液，使用前進行混合。例如：取3 mL辣根過氧化物酶偶聯(lián)的雌二醇，加入0.3 mL檢測緩沖液，混合得到工作溶液。

EZElisa雌二醇ELISA試劑盒樣品制備：

1.血清：使用血清分離管，在室溫下凝固樣品30分鐘后，以1,000 g的速度離心15分鐘。立即使用血清進行檢測，或?qū)悠贩盅b并儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

2.血漿：使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿。在采集后30分鐘內(nèi)以1,000 g的速度離心15分鐘。立即進行檢測，或?qū)悠贩盅b并儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

注意：不要使用明顯溶血或脂肪乳化的樣本。如果樣品將在24小時內(nèi)使用，可以儲存在2到8°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。在進行檢測前，應(yīng)將冷凍樣品緩慢恢復(fù)至室溫，并輕輕混勻。

程序分析：

1. 從微孔板架上取下多余的微孔板條，將它們放回包含干燥劑包的鋁箔袋中，并重新密封。

2. 每個孔中加入50 μL標準品或樣品。建議將所有標準品和樣品都復(fù)制加入微孔板中。設(shè)置一個空白孔，不加入任何溶液。

3. 向每個孔中加入50 μL工作溶液（空白孔除外），充分混勻，用提供的孔蓋蓋好，然后在37°C下孵育1小時。

4. 倒掉每個孔中的液體并進行洗滌，總共洗滌三次。使用多通道移液器或自動微孔板洗滌器，將每個孔填滿1×洗滌緩沖液（250 μL），靜置10秒鐘，每個步驟中完全去除液體對良好的性能至關(guān)重要。在最后一次洗滌后，倒轉(zhuǎn)孔板并用干凈的紙巾輕輕拍干任何剩余的1×洗滌緩沖液。

5. 向每個孔中加入50 μL HRP底物A和50 μL HRP底物B，充分混勻，并用提供的孔蓋蓋好。在37°C下孵育15分鐘。將孔板放在黑暗中，遠離氣流和其他溫度波動。

6. 向每個孔中加入50 μL停止溶液。停止溶液應(yīng)按照HRP底物的加入順序加入到孔板中。孔中的顏色應(yīng)從藍色變?yōu)辄S色。如果孔中的顏色是綠色，或者顏色變化不均勻，請輕輕敲擊孔板以確保充分混合。

7. 在30分鐘內(nèi)使用設(shè)置為450 nm的微孔板讀數(shù)儀測定每個孔的光密度。

該試劑僅用于科學研究領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

Biogradetech生命科學和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的供應(yīng)商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質(zhì)組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經(jīng)科學、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。