三碘甲狀腺原氨酸（T3）是診斷甲狀腺功能減退和甲狀腺功能亢進(jìn)的有用標(biāo)志物。T3水平在甲狀腺功能減退患者中降低，在甲狀腺功能亢進(jìn)患者中增加。T3的產(chǎn)生受到來(lái)自垂體前葉釋放的甲狀腺刺激素（TSH）的激活。這條途徑是閉環(huán)反饋過(guò)程的一部分：血漿中T3濃度升高會(huì)抑制垂體前葉的TSH產(chǎn)生。隨著這些激素濃度的降低，垂體前葉增加TSH的產(chǎn)生，通過(guò)這些過(guò)程，反饋控制系統(tǒng)穩(wěn)定了血液中的甲狀腺激素水平。EZElisa?游離三碘甲狀腺原氨酸（T3）ELISA試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)性抑制酶免疫測(cè)定技術(shù)。試劑盒中的微孔板已經(jīng)預(yù)包被了特異性抗T3抗體。將標(biāo)準(zhǔn)品或樣品加入到適當(dāng)?shù)奈⒖装蹇字校尤肱c生物素偶聯(lián)的T3。T3（標(biāo)準(zhǔn)品或樣品）與預(yù)包被的特異性抗T3抗體結(jié)合的生物素偶聯(lián)的T3之間發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng)。樣品中T3的含量越高，與生物素偶聯(lián)的T3結(jié)合的抗體越少。洗滌后，加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素（Avidin-HRP）到孔中。加入底物溶液，顏色的發(fā)展與樣品中T3的含量相反。停止顏色的發(fā)展，并測(cè)量顏色的強(qiáng)度。

艾美捷EZElisa三碘甲狀腺原氨酸(T3) ELISA試劑盒基本參數(shù)：

目錄號(hào)：D-AEK0006

規(guī)格：48T/96T

儲(chǔ)存：未開(kāi)封的試劑盒應(yīng)在4°C下保存12個(gè)月，并避光

檢測(cè)范圍：0.5 ng/mL-8 ng/mL

靈敏度：0.4 ng/mL

特異性：EZElisa?游離三碘甲狀腺原氨酸（T3）ELISA試劑盒具有高靈敏度和優(yōu)異的特異性，可用于T3的檢測(cè)。未觀察到T3與類似物之間的顯著交叉反應(yīng)或干擾。

適用樣本：血清、血漿

供應(yīng)材料和儲(chǔ)存條件：

Note: Std1: 0.5 ng/mL; Std2: 1 ng/mL; Std3: 2 ng/mL; Std4: 4 ng/mL; Std5: 8 ng/mL.

EZElisa三碘甲狀腺原氨酸(T3) ELISA試劑盒試劑準(zhǔn)備：

注意：使用前將所有試劑平衡至室溫。如果緩沖濃縮液中形成了晶體，請(qǐng)輕輕加熱，直到它們完全溶解。

1×洗滌緩沖液：洗滌緩沖液（20×）用去離子水1:20稀釋，得到1×洗滌緩沖器。在4°C下儲(chǔ)存。

樣本制備：

1. 血清：使用血清分離管，在室溫下使樣本凝結(jié)30分鐘，然后以1,000 g的速度離心15分鐘。立即取出血清進(jìn)行檢測(cè)，或?qū)颖痉盅b并儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

2. 血漿：使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿。在采集后30分鐘內(nèi)以1,000 g的速度離心15分鐘。立即進(jìn)行檢測(cè)，或?qū)颖痉盅b并儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。注意：不要使用明顯溶血或脂質(zhì)血癥的標(biāo)本。如果樣本在24小時(shí)內(nèi)使用，可以儲(chǔ)存在2到8°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。在檢測(cè)前，應(yīng)緩慢將冷凍樣本回溫至室溫，并輕輕混勻。

程序分析：

1. 從微孔板架上取下多余的微孔板條，放回包含干燥劑包裝袋中，并重新密封。

2. 每個(gè)孔加入50 μL的T3標(biāo)準(zhǔn)品或樣品。建議將所有標(biāo)準(zhǔn)品和樣品都以兩個(gè)孔的形式加入微孔板中。設(shè)置一個(gè)空白孔，不加入任何溶液。

3. 每個(gè)孔加入50 μL的生物素偶聯(lián)的T3（不加入空白孔）。充分混勻，用提供的孔蓋蓋上，然后在37°C下孵育1小時(shí)。

4. 倒出每個(gè)孔中的液體，并進(jìn)行洗滌，總共洗滌三次。使用多通道移液器或自動(dòng)微孔板洗滌器，將每個(gè)孔填滿1×洗滌緩沖液（250 μL），靜置10秒鐘，每個(gè)步驟完全去除液體對(duì)于良好的性能至關(guān)重要。最后一次洗滌后，倒轉(zhuǎn)孔板并用干凈的紙巾輕輕拍干任何剩余的1×洗滌緩沖液。

5. 每個(gè)孔加入50 μL的過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素（Avidin-HRP），充分混勻，用提供的孔蓋蓋上。在37°C下孵育30分鐘。

6. 重復(fù)第4步中的洗滌過(guò)程。

7. 每個(gè)孔加入50 μL的底物A和50 μL的底物B，充分混勻，用提供的孔蓋蓋上。在37°C下孵育15分鐘。將孔板放置在無(wú)風(fēng)和其他溫度波動(dòng)的暗處。

8. 每個(gè)孔加入50 μL的停止溶液。停止溶液應(yīng)按照過(guò)氧化物酶底物的順序加入孔板中。孔中的顏色應(yīng)從藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果孔中的顏色是綠色，或者顏色變化不均勻，請(qǐng)輕輕拍打孔板以確保充分混勻。

9. 在30分鐘內(nèi)使用設(shè)置為450 nm的微孔板讀數(shù)儀測(cè)定每個(gè)孔的光密度。

該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

Biogradetech生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的供應(yīng)商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國(guó)加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。