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生物素偶聯(lián)試劑盒背景:
生物素是一種水溶性B族維生素,分子量為244Da,由一個脲環(huán)與四氫噻吩環(huán)稠合而成。戊酸取代基連接到四氫噻吩環(huán)的一個碳原子上。生物素與阿維丁或鏈親和素具有很高的親和力,因此生物素-阿維丁系統(tǒng)作為一種多級信號放大系統(tǒng),廣泛應用于免疫檢測,具有高靈敏度和強特異性。
FlyLink? 生物素標記試劑盒設計用于直接從含有活性氨基的蛋白質(zhì)、肽和其他配體制備生物素偶聯(lián)物。我們試劑盒中提供的生物素已被預激活,可直接用于偶聯(lián)。FlyLink? 生物素標記試劑盒包含用于制備生物素標記分子的現(xiàn)成組件。
艾美捷生物素偶聯(lián)試劑盒:
Cat #: D-AKE120
Size: 100 μg x 3
Storage: Stored at 4°C for 6 months, protected from light
AP偶聯(lián)試劑盒應用示例:
直接標記的一級抗體是有利的,因為它們消除了免疫測定程序中對二級試劑的需求,從而消除了ELISA和Western印跡等應用中繁瑣的額外培養(yǎng)和洗滌步驟。

圖:原理圖FlyLink? 生物素標記試劑盒示意圖
適用樣品:
標記生物分子,特別是蛋白質(zhì)、肽和其他含有游離氨基的配體
生物素偶聯(lián)試劑盒FAQ:
Q1:濃縮后,樣品濃度仍低于2 mg/mL?
A1:如果濃縮后樣品濃度仍低于2 mg/mL,則可以適當調(diào)整標記系統(tǒng)的體積,但最終濃度應大于1 mg/mL。步驟(1)中生物素標記溶液的體積應為標記系統(tǒng)體積的10%。在步驟(2)中,可以不加入去離子水,并且活性生物素溶液的體積保持不變。你也可以根據(jù)自己的實驗做出適當?shù)恼{(diào)整。
Q2:如何針對待標記樣品的不同分子量選擇合適的純化柱?
A2:純化的柱適用于分子量為100KD至200KD的樣品。如果樣品的分子量大于200KD或小于100KD,則最好配備更合適的純化柱尺寸。
Q3:待標記樣品的分子量是否與生物素相似?
A3:如果樣品的分子量與生物素相似,在完成本說明書對應的標記步驟后,加入30μL 0.5μM NH4Cl,在37°C下孵育10分鐘,以猝滅游離的生物素,而無需純化步驟。
Q4:不同分子量的分子有不同的耦合效應嗎?
A4:對于分子量小于5KD的分子,偶聯(lián)效果較差。你可以適當?shù)卦黾臃肿拥臄?shù)量。
*該試劑僅用于科學研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
Biogradetech全球生命科學和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應商:Biogradetech成立于2015年,總部位于美國加利福尼亞州,早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務起家,逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線,并將其商業(yè)化銷售,包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質(zhì)組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經(jīng)科學、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。
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