硫酸脫氫表雄酮（DHEA-S）ELISA Kit測定程序&結果計算方案

硫酸脫氫表雄酮（DHEA-S）是腎上腺的一種更具體的產品，這種類固醇的測量在臨床實踐中具有廣泛的意義。DHEA-S血漿檢測的臨床重要性與腎上腺增生的診斷和多毛癥的鑒別診斷有關。

艾美捷Calbiotech-硫酸脫氫表雄酮（DHEA-S）ELISA Kit：

目錄編號：DH291S

產品類型：酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

數量：96次測試（12x8可拆卸條狀孔板）

標準范圍：0.1-10 微克/毫升

分析靈敏度：0.1 微克/毫升

樣本體積：每孔10 微升

物種：人類

儲存與穩定性：產品應儲存在2-8攝氏度。

注意事項：僅供研究使用。不用于診斷程序。

Calbiotech-硫酸脫氫表雄酮（DHEA-S）ELISA Kit檢測原理：

CBI DHEA-S試劑盒基于測試樣本中的DHAEA-S與HRP偶聯的DHEA-S之間競爭性結合的原理，以獲得恒定量的抗DHEA-S抗體。在第一次孵育中，山羊抗兔IgG涂層孔與10μl DHEA標準品、患者樣本、50μl DHEA-S酶（HRP）試劑和50μl抗DHEA抗體試劑在室溫下孵育60分鐘。在孵育過程中，HRP標記的DHEA-S與標準品和樣品中的內源性DHEA-S競爭固定數量的DHEA-S抗體結合位點，同時抗DHEA Santibody與固定的二抗結合。因此，隨著樣本中DHEA-S濃度的增加，與孔免疫結合的DHEA-S HRP偶聯物的量逐漸減少。然后去除未結合的DHEA-S-HRP綴合物并洗滌細胞。接下來，加入TMB試劑并在室溫下孵育30分鐘，從而產生藍色。加入停止溶液停止顯色，在450nm處用分光光度法測量吸光度。繪制顏色強度與DHEA-S濃度的標準曲線。

測定程序：

使用前，所有試劑和樣本必須放置至室溫。

1. 將所需數量的包被條固定在支架中。

2. 使用新的一次性吸頭，向相應的孔中分配10微升的標準品、對照品和樣品。

3. 向每個孔中分配50微升的DHEA-S酶試劑。

4. 向每個孔中分配50微升的抗DHEA-S抗體試劑。

5. 徹底混合板子10秒鐘。這一步的完全混合非常重要。

6. 在室溫下孵育60分鐘。

7. 迅速搖出孔中的內容物。

8. 用稀釋的洗滌溶液（每個孔350微升）沖洗孔三次。在吸水紙上用力敲擊孔以去除殘留液滴。

9. 向每個孔中添加100微升的TMB底物。

10. 在室溫下孵育30分鐘。

11. 通過向每個孔中添加50微升的終止液來停止酶反應。

12. 在加入終止液后10分鐘內，使用ELISA讀板儀在450納米處讀取吸光度。

結果計算：

標準曲線的構建如下：

1. 檢查每個標準品瓶上的DHEA-S標準值。這個值可能會因批號而異。確保檢查每個試劑盒上的值。參見附帶的標準品示例。

2. 為了構建標準曲線，在線性坐標紙上，將DHEA-S標準品的吸光度（垂直軸）與標準濃度（水平軸）作圖。通過點繪制最佳曲線。

3. 從曲線上讀取對照品和每個未知樣品的吸光度。記錄每個對照或未知樣品的值。

Calbiotech-硫酸脫氫表雄酮（DHEA-S）ELISA Kit文獻參考：

1. Tietz, N. W., Textbook of Clinical Chemistry, Saunders, 1968   

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