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【前情回顧】全能核酸酶(Benzonase)——輕松解決核酸殘留問(wèn)題
雙鏈特異性DNA酶(Double-strand specific DNase, dsDNase)是一種獨(dú)特的雙鏈特異性核酸內(nèi)切酶,能夠特異性裂解雙鏈DNA(double-stranded DNA, dsDNA)中的磷酸二酯鍵,而不會(huì)裂解單鏈DNA、引物、探針和RNA。因此dsDNase特別適用于去除RNA樣品中的基因組DNA污染。
作為Biogradetech在中國(guó)區(qū)域的獨(dú)家代理,艾美捷科技為您推薦高品質(zhì)dsDNase,助您輕松解決基因組DNA的污染問(wèn)題。Biogradetech的dsDNase 具有熱敏感性,可在 55℃條件下快速失活,且與傳統(tǒng)的使用 DNase I去除基因組DNA污染的方法相比,無(wú)需額外加入 EDTA 失活,可減少對(duì)RNA的損傷,同時(shí)節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間,保證RNA水平定量的準(zhǔn)確性。

貨號(hào) | |
名稱(chēng) | dsDNase, Double-strand specific DNases 雙鏈特異性DNA酶 |
規(guī)格 | 50 rxns |
純度 | ≥90% |
應(yīng)用 | 主要用于反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)前快速去除 RNA 樣本中的基因組DNA污染 |
抑制與失活 | 抑制條件:金屬離子、EDTA、SDS、DTT、β- 巰基乙醇、高鹽離子濃度等會(huì)抑制dsDNase 的活性; 失活條件:55℃溫育5 min。 |
使用方法
1. 于冰上配制如下反應(yīng)體系:
| 試劑 | 使用量 |
| dsDNase | 1 ul |
| 10×dsDNase Buffer | 1 ul |
模板RNA 總RNA mRNA 特異性RNA | X ul 1 pg~5 μg/10 μl 0.1 pg~500 ng/10 μl 0.01 ng~500 ng/10 μl |
| Nuclease-Free Water | 總計(jì) 10ul |
2. 輕輕吹打混勻反應(yīng)體系后,將以上混合液在37℃溫育2~5 min;
3. 65℃熱失活2 min,迅速將獲得的RNA置于冰上,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
*長(zhǎng)期保存請(qǐng)置于-80℃,避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
1. 若 RNA 樣本下游用于RT-PCR,且目的基因長(zhǎng)度 ≥3 kb,失活步驟前需添加終濃度為10 mM的DTT;
2. 為避免RNA降解,可在反應(yīng)體系中加入適量的RNase Inhibitor。
Biogradetech是生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商:Biogradetech成立于2015年,總部位于美國(guó)加利福尼亞州,早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家,逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線,并將其商業(yè)化銷(xiāo)售,包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。
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