在生命科學(xué)的前沿探索中，準(zhǔn)確評估細(xì)胞的缺氧與氧化應(yīng)激狀態(tài)，對于揭示疾病機(jī)理、優(yōu)化治療策略至關(guān)重要。Enzo Life Sciences的ROS-ID Hypoxia/Oxidative Stress Detection Kit（ENZ-51042-0125，ENZ-51042-K500）是一款專為科研人員設(shè)計(jì)，二合一的創(chuàng)新工具，該試劑盒以其獨(dú)特的雙色熒光標(biāo)記技術(shù)，為您帶來前所未有的清晰視野。它不僅能夠直觀區(qū)分缺氧與氧化應(yīng)激狀態(tài)，還能確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，讓您的研究數(shù)據(jù)更加信服有力。

艾美捷ROS-ID缺氧/氧化應(yīng)激檢測試劑盒（#ENZ-51042-0125、ENZ-51042-K500）

替代名稱：ROS / 硝基還原酶

應(yīng)用：流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡、熒光檢測、高通量篩選（HTS）

應(yīng)用說明：此試劑盒設(shè)計(jì)用于熒光顯微鏡和/或流式細(xì)胞術(shù)，適用于貼壁或懸浮細(xì)胞。

質(zhì)量控制：使用流式細(xì)胞術(shù)方法進(jìn)行測試，以評估缺氧細(xì)胞和/或與試劑盒中提供的染料結(jié)合的具有高水平總氧化應(yīng)激的細(xì)胞。還獲得顯微鏡圖像。

數(shù)量：對于-K500規(guī)格：

500次熒光顯微鏡檢測或100次流式細(xì)胞術(shù)檢測。

對于-0125規(guī)格：

125次熒光顯微鏡檢測或25次流式細(xì)胞術(shù)檢測。

使用/穩(wěn)定性：在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下，試劑盒組分的穩(wěn)定性可達(dá)到產(chǎn)品標(biāo)簽上注明的日期。

處理：避免凍融周期。

運(yùn)輸：干冰

儲存：-20°C

內(nèi)容物：缺氧紅色檢測試劑

氧化應(yīng)激檢測試劑（綠色）

ROS誘導(dǎo)劑（吡咯烷菌素）

缺氧誘導(dǎo)劑（DFO）

ROS-ID缺氧/氧化應(yīng)激檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)原理概述：

1、缺氧檢測（紅色）：缺氧檢測試劑（Red Hypoxia Detection Reagent）是一種非熒光或弱熒光的芳香族化合物，含有硝基（NO2）基團(tuán)。在缺氧細(xì)胞中，由于存在硝基還原酶活性，硝基團(tuán)通過一系列化學(xué)反應(yīng)被轉(zhuǎn)化為羥胺（NHOH）和氨基（NH2）基團(tuán)，導(dǎo)致原始分子降解并釋放出熒光探針，從而在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)紅色熒光。

2、氧化應(yīng)激檢測（綠色）：氧化應(yīng)激檢測試劑（Oxidative Stress Detection Reagent）為非熒光、細(xì)胞可滲透的總ROS檢測染料，能直接與多種活性氧物種反應(yīng)，如過氧化氫、過氧亞硝酸鹽和羥基自由基，生成綠色熒光產(chǎn)物，指示不同類型的ROS/RNS產(chǎn)生。此探針對超氧化物、活性氯或溴物種相對不敏感。  

ROS-ID缺氧/氧化應(yīng)激檢測試劑盒亮點(diǎn)：

1、精準(zhǔn)檢測，雙管齊下：該套件同時(shí)提供綠色熒光的氧化應(yīng)激檢測試劑與紅色熒光的缺氧檢測試劑，分別對應(yīng)細(xì)胞內(nèi)ROS水平與缺氧環(huán)境，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)定位與定量。

2、廣泛適用，兼容性強(qiáng)：無論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞，無論是采用熒光顯微鏡還是流式細(xì)胞儀，ROS-ID 套件都能靈活適應(yīng)，滿足您多樣化的實(shí)驗(yàn)需求。兩種規(guī)格（ENZ-51042-K500與ENZ-51042-0125）量身定制，靈活選擇，經(jīng)濟(jì)高效。

3、操作簡便，效率提升：我們對ROS-ID? Hypoxia/Oxidative Stress Detection Mix的準(zhǔn)備過程進(jìn)行了優(yōu)化，確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備簡單快捷，減少實(shí)驗(yàn)誤差，提升整體研究效率。

4、結(jié)果可視化，直觀可信：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包含正負(fù)對照，確保每次實(shí)驗(yàn)都有基準(zhǔn)參考，使您的研究結(jié)論更具說服力。熒光信號直觀顯示，細(xì)胞狀態(tài)一目了然，便于數(shù)據(jù)分析與解讀。  

結(jié)果分享：

圖 . HeLa 細(xì)胞被種在顯微鏡載玻片上，第二天按照手冊描述，用 DFO（低氧的化學(xué)誘導(dǎo)劑）或吡咯烷酮（氧化應(yīng)激誘導(dǎo)劑）處理 4 小時(shí)，溫度為 37°C。處理后，載玻片用 PBS 洗滌，蓋上蓋玻片，并使用 Olympus BX-51 熒光顯微鏡進(jìn)行可視化觀察。

部分發(fā)表文章：

Cupric-ion-promoted fabrication of oxygen-replenishing nanotherapeutics for synergistic chemo and photodynamic therapy against tumor hypoxia: L. He, et al.; Acta Biomater. 162, 57 (2023),

Precise manipulation of circadian clock using MnO2 nanocapsules to amplify photodynamic therapy for osteosarcoma: Y.X. Ge, et al.; Mater. Today Bio 19, 100547 (2023),

The impact of hypoxia and oxidative stress on proteo-metabolomic alterations of 3D cholangiocarcinoma models: P. Phukhum, et al.; Sci. Rep. 13, 3072 (2023),

Dimethyloxalylglycine (DMOG), a Hypoxia Mimetic Agent, Does Not Replicate a Rat Pheochromocytoma (PC12) Cell Biological Response to Reduced Oxygen Culture: R. Chen, et al.; Biomolecules 12, 541 (2022),

Hydrogel microcapsules containing engineered bacteria for sustained production and release of protein drugs: C. Han, et al.; Biomaterials 287, 121619 (2022),

Inhibiting autophagy flux and DNA repair of tumor cells to boost radiotherapy of orthotopic glioblastoma: Q. Xu, et al.; Biomaterials 280, 121287 (2022)