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GeneCopoeia轉(zhuǎn)染試劑,攻堅(jiān)克難:快、準(zhǔn)、狠

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2019-11-26     
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細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA,RNA等導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的一種技術(shù)。根據(jù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)流程,細(xì)胞培養(yǎng)完成后需進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染,根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康目蛇x擇不同的轉(zhuǎn)染方法。目前,常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法主要分為三類(lèi)途徑:物理介導(dǎo)(電穿孔法,基因槍法、顯微注射法)、化學(xué)介導(dǎo)(脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、磷酸鈣共沉淀法、陽(yáng)離子聚合物介導(dǎo)法)、生物介導(dǎo)(病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染、原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染)。

 


 

脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染原理圖

 

細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法

細(xì)胞轉(zhuǎn)染原理

主要特點(diǎn)

適用類(lèi)型

陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法

帶正電荷的脂質(zhì)體靠靜電作用和DNA 結(jié)合形成 DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物,然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞

·操作簡(jiǎn)便
·適用于各種裸露的DNA和RNA片段
·適合轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞
·對(duì)DNA濃度有一定要求
·重復(fù)性好,但轉(zhuǎn)染時(shí)需除血清

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
所有細(xì)胞

DEAE-右旋糖苷法

帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物,復(fù)合物和帶負(fù)電的細(xì)胞膜接觸后而被細(xì)胞膜攝取

·有一定的毒性
·操作簡(jiǎn)單,適用性廣
·重復(fù)性好,但轉(zhuǎn)染時(shí)需除血清

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

磷酸鈣法

磷酸鈣能夠促進(jìn)外源DNA和細(xì)胞的結(jié)合,磷酸鈣-DNA復(fù)合物能夠附著到細(xì)胞表面,并通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞

·操作簡(jiǎn)單
·對(duì)DNA濃度要求高
·適用性有局限(不適用于原代細(xì)胞)

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

電穿孔法

高脈沖的電壓破壞細(xì)胞膜,在細(xì)胞膜表面形成孔道,DNA通過(guò)孔道進(jìn)入細(xì)胞

·適用性廣,適用于質(zhì)粒和幾十kb的基因組片段
·針對(duì)不同細(xì)胞要優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件細(xì)胞
·致死率較高

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
所有細(xì)胞

顯微注射法

利用顯微操作系統(tǒng)和顯微注射技術(shù)將
DNA直接注入到細(xì)胞中

·整合率較高,適用于工程改造和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的建立
·操作復(fù)雜,且需要昂貴精密的設(shè)備
·外源基因的整合位點(diǎn)和拷貝數(shù)無(wú)法控制,會(huì)導(dǎo)致片段缺失、突變

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染

通過(guò)病毒的膜蛋白和細(xì)胞表面的受體相互作用而進(jìn)入細(xì)胞,利用宿主細(xì)胞酶自行轉(zhuǎn)錄復(fù)制合成DNA,并隨機(jī)整合到細(xì)胞基因組中

·轉(zhuǎn)染效率高,適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞轉(zhuǎn)染利用病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染,外源基因整合較穩(wěn)定
·逆轉(zhuǎn)錄病毒只選擇感染分裂細(xì)胞
&middot;容納外源基因長(zhǎng)度<8kb

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
特定細(xì)胞

 

隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細(xì)胞基因功能、實(shí)現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具。理想的基因轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)該具有如下特點(diǎn):高效轉(zhuǎn)染;安全;低細(xì)胞毒性;方法簡(jiǎn)單;省時(shí)、經(jīng)濟(jì)。

 

作為NCBI推薦的基因克隆供應(yīng)商,GeneCopoeia推出5款不同類(lèi)型的轉(zhuǎn)染試劑:

 

※ EndoFectin&trade; Max(基于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染原理的轉(zhuǎn)染試劑)

 

產(chǎn)品特性

  1. 對(duì)比Lipofectamine&reg; 2000,EndoFectin&trade; Max在多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞中具有更優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染操作;

  2. 對(duì)比Lipofectamine&reg; 3000,EndoFectin&trade; Max具有同等或更高的轉(zhuǎn)染效率;

  3. 對(duì)比Lipofectamine&reg; 2000,EndoFectin&trade; Max對(duì)siRNA和質(zhì)粒均有更優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效率;

  4. 細(xì)胞毒性低;

  5. 進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作時(shí),不需提前去除細(xì)胞培養(yǎng)液或血清;

  6. 進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作后,不需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基;

  7. 適用于基因過(guò)表達(dá)、基因敲減、敲除的常規(guī)轉(zhuǎn)染操作,亦適用于微孔板的高通量轉(zhuǎn)染操作。

貨號(hào)

名稱(chēng)

適用性

EF003

EndoFectin&trade; Max轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL)

廣泛適用于多種細(xì)胞

EF004

EndoFectin&trade; Max轉(zhuǎn)染試劑 (3 mL)

 

※ CRISPR-Fectin&trade;(CRISPR-Cas9核蛋白專(zhuān)用的轉(zhuǎn)染試劑)

 

產(chǎn)品特性

  1. 專(zhuān)門(mén)用于Cas9蛋白和合成的sgRNA的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn);

  2. 與其它公司的同類(lèi)型產(chǎn)品相比,具有更高的轉(zhuǎn)染效率;

  3. 轉(zhuǎn)染前無(wú)需提前去除細(xì)胞培養(yǎng)液或血清;

  4. 轉(zhuǎn)染后無(wú)需更換培養(yǎng)基。

貨號(hào)

名稱(chēng)

適用性

EF015

CRISPR-Fectin&trade; 轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL)

優(yōu)化的CRISPR-Cas9核蛋白專(zhuān)用的轉(zhuǎn)染試劑。可與GeneHero&trade; Cas9蛋白配合使用

EF016

CRISPR-Fectin&trade; 轉(zhuǎn)染試劑 (3 mL)

 

※ EndoFectin&trade; Expi293(為Expi293F懸浮細(xì)胞進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì))

 

產(chǎn)品特性

  1. 特別為Expi293F懸浮細(xì)胞進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì),配合Expi293F懸浮細(xì)胞使用,可提高實(shí)驗(yàn)效率;

  2. 與其它公司的同類(lèi)型產(chǎn)品相比,在Expi293F懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率更高;

  3. 進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作時(shí),不需提前去除細(xì)胞培養(yǎng)液或血清;

  4. 進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作后,不需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基;

  5. 適用于基因過(guò)表達(dá)、基因敲減、敲除的常規(guī)轉(zhuǎn)染操作,亦適用于微孔板的高通量轉(zhuǎn)染操作

貨號(hào)

名稱(chēng)

適用性

EF007

EndoFectin&trade; Expi293 轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL)

專(zhuān)注轉(zhuǎn)染懸浮細(xì)胞293F,轉(zhuǎn)染效率極高

EF009

EndoFectin&trade; Expi293 增強(qiáng)轉(zhuǎn)染試劑盒 (1L 轉(zhuǎn)染用量)

EF010

EndoFectin&trade; Expi293 增強(qiáng)轉(zhuǎn)染試劑盒 (10L 轉(zhuǎn)染用量)

 

※ EndoFectin&trade; HepG2特別為常用細(xì)胞系HepG2進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)

 

產(chǎn)品特性

  1. 特別為常用細(xì)胞系HepG2進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì),HepG2是一種通常情況下較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞;

  2. 與Lipofectamine&reg; 2000、Lipofectamine&reg; 3000相比,對(duì)HepG2細(xì)胞有更高的轉(zhuǎn)染效率;

  3. 在HepG2細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效果可與電轉(zhuǎn)染方法媲美,方便您以更簡(jiǎn)便快捷的方式獲得高轉(zhuǎn)染效率;

  4. 對(duì)比Lipofectamine&reg; 2000,對(duì)siRNA和質(zhì)粒都有更高的轉(zhuǎn)染效率;

  5. 進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作時(shí),不需提前去除細(xì)胞培養(yǎng)液或血清;

  6. 進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作后,不需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基。

 

貨號(hào)

名稱(chēng)

適用性

EF005

EndoFectin&trade; HepG2 轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL)

為常用細(xì)胞系HepG2進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)

EF006

EndoFectin&trade; HepG2 轉(zhuǎn)染試劑 (3 mL)

 

※ EndoFectin&trade; Lenti(一種基于陽(yáng)離子轉(zhuǎn)染原理的、高效的轉(zhuǎn)染試劑)

 

產(chǎn)品特性

  1. 轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,可收獲更高滴度的慢病毒

  2. 對(duì)比市場(chǎng)其它同類(lèi)型產(chǎn)品,EndoFectin&trade; Lenti可為慢病毒包裝操作帶來(lái)更高的轉(zhuǎn)染效率和更高的產(chǎn)物滴度(如下圖)

 

EndoFectin&trade; Lenti

 

貨號(hào)

名稱(chēng)

適用性

EF001

EndoFectin&trade; Lenti轉(zhuǎn)染試劑 (1 ml)

轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,可收獲更高滴度的慢病毒

EF002

EndoFectin&trade; Lenti轉(zhuǎn)染試劑 (3 ml))

GeneCopoeia致力于為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)工作者提供一流的產(chǎn)品和及時(shí)周到的服務(wù),通過(guò)豐富的基因、蛋白、抗體、分析試劑盒等產(chǎn)品線,加速您的研究進(jìn)程。作為GeneCopoeia在中國(guó)的區(qū)域一級(jí)代理,艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶(hù)提供最全面的GeneCopoeia產(chǎn)品以及客戶(hù)訂制化服務(wù)。

 

作為GeneCopoeia在中國(guó)的區(qū)域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶(hù)提供最全面的GeneCopoeia公司產(chǎn)品以及客戶(hù)訂制化服務(wù)。

 

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