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基質(zhì)膠凝膠制備方法及相關(guān)FAQ

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2023-08-15     
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類器官(organoids)是指一種利用干細(xì)胞、祖細(xì)胞等在體外培養(yǎng)出的3D細(xì)胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結(jié)構(gòu)組織類似物。2021年,類器官技術(shù)被列為“十四五”國家重點研發(fā)專項,作為疾病模型,相比于傳統(tǒng)2D疾病模型,類器官在闡明疾病的發(fā)展、穩(wěn)態(tài)性和發(fā)病機理等與體內(nèi)環(huán)境更加接近,在多領(lǐng)域?qū)l(fā)揮重要,諸如細(xì)胞治療、藥物研發(fā)、基因工程、免疫研究、組織再生等領(lǐng)域。基質(zhì)膠作為類器官和3D培養(yǎng)的重要載體,在其中發(fā)揮著舉足輕重的作用。

 

基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長因子。在室溫條件下,基質(zhì)膠聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì),能模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能,有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化。

 

凝膠制備方法

1)基質(zhì)膠融化后,用預(yù)冷的槍頭混勻基質(zhì)膠。

2)將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,然后將培養(yǎng)的細(xì)胞與基質(zhì)膠混合,用遇冷的槍頭使細(xì)胞懸浮均勻。按照150-200 μL/cm2生長面積的濃度加入基質(zhì)膠制備3D培養(yǎng)使用的凝膠,詳見下圖。

3)在37℃放置30min,此時即可加入細(xì)胞培養(yǎng)液。

 

3D細(xì)胞及類器官培養(yǎng)過程:

低生長因子,基質(zhì)膠

 

艾美捷Biogradetech 低生長因子,基質(zhì)膠(類器官,3D培養(yǎng))詳情:

中文名稱:低生長因子,基質(zhì)膠(類器官,3D培養(yǎng))

英文名字:Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced (For Organoid/3D cell culturing)

貨號:A-MGL01-10mL

規(guī)格:10mL

形式:標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠4℃溶解后,呈透明流動液態(tài)狀態(tài);高濃度基質(zhì)膠0℃溶解后,呈透明流動液態(tài)狀態(tài),4℃久置呈半凝膠狀

保存建議:≤-20°C

 

基質(zhì)膠FAQ:

1、拿到的基質(zhì)有色差的變化(淡黃色到深紅色)是什么原因?

對于含酚紅的基質(zhì)膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使基質(zhì)膠分散均勻。

 

2、基質(zhì)膠的操作要注意哪些事項?

所有操作需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,應(yīng)使用預(yù)冷的器材以保證基質(zhì)膠正常操作。

 

3、基質(zhì)膠的如何分裝凍存使用?

可將凍融后的基質(zhì)膠分裝在多個凍存管,凍存管需預(yù)冷,分裝后迅速冷凍并保存,避免多次凍融。



Biogradetech研究領(lǐng)域:蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。


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