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Biogradetech貨號A-MGL26:高濃度,無酚紅,基質(zhì)膠(體內(nèi)實驗,PDX/CDX 異種移植)

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2023-09-28     
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基質(zhì)膠作為一種重要的細胞外基質(zhì),具有廣泛的應用價值。它可以用于各種研究領(lǐng)域,如細胞生物學、組織工程、腫瘤研究等。基質(zhì)膠的特殊成分和結(jié)構(gòu)為細胞提供了理想的生長環(huán)境,促進細胞的黏附、遷移和增殖。同時,基質(zhì)膠還可以模擬人體組織的結(jié)構(gòu)和功能,為研究人員提供了重要的工具。

高濃度無酚紅的基底膜基質(zhì)膠在細胞培養(yǎng)和研究中有廣泛的應用。它為各種實驗提供了理想的基質(zhì)環(huán)境,如體內(nèi)實驗,PDX/CDX 異種移植和腫瘤成瘤模型的實驗等。通過使用高濃度無酚紅的基底膜基質(zhì)膠,研究人員可以更好地模擬體內(nèi)細胞與基質(zhì)之間的相互作用,進一步了解細胞行為和組織發(fā)育的機制。

高濃度無酚紅的基底膜基質(zhì)膠的應用非常靈活。可以使用厚層凝膠法或薄層包被法將基質(zhì)膠涂覆在培養(yǎng)表面上,具體操作可根據(jù)實驗需求進行選擇。該產(chǎn)品經(jīng)過嚴格的質(zhì)量認證,確保無病原體污染,并通過多種實驗驗證其生物功能。

無論您是進行細胞培養(yǎng)、組織工程研究還是腫瘤研究,Biogradetech基質(zhì)膠都是您的理想選擇。它為您的實驗提供了可靠的3D培養(yǎng)基質(zhì)支持,幫助您更好地理解細胞行為和組織發(fā)育的奧秘。立即嘗試高濃度無酚紅的基質(zhì)膠,開啟您的細胞研究新篇章!   


作為Biogradetech在中國區(qū)域的獨家代理,艾美捷科技將為中國客戶提供全面的Biogradetech產(chǎn)品以及客戶訂制化服務。歡迎大家隨時聯(lián)系我們。

產(chǎn)品貨號英文名稱中文名稱應用類型
A-MGL26

HC Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free (For in vivo experiments, PDX and CDX)

高濃度,無酚紅,基質(zhì)膠(體內(nèi)實驗,PDX/CDX 異種移植

藍海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細胞培養(yǎng)

產(chǎn)品英文名稱:HC Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free (For in vivo experiments, PDX and CDX)

產(chǎn)品中文名稱:高濃度,無酚紅,基質(zhì)膠(體內(nèi)實驗,PDX/CDX 異種移植)

貨號:A-MGL26

規(guī)格:5mL、10mL

儲存條件:≤-20°C


產(chǎn)品描述:

Biogradetech貨號A-MGL26高濃度無酚紅的基質(zhì)膠是一種連續(xù)的特殊細胞外基質(zhì)薄膜,形成了內(nèi)皮細胞、上皮細胞、肌肉細胞或神經(jīng)細胞與其相鄰基質(zhì)之間的界面。基質(zhì)膠在發(fā)育和傷口愈合過程中會被降解和再生。它不僅支持細胞和細胞層,還對組織結(jié)構(gòu)起著重要作用,影響細胞的粘附、遷移、增殖和分化。基質(zhì)膠能夠成為轉(zhuǎn)移性腫瘤細胞侵襲的主要屏障。

Biogradetech貨號A-MGL26高濃度無酚紅的基質(zhì)膠是從Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)腫瘤中純化得到的可溶性基質(zhì)膠。此高濃度的基質(zhì)膠在37°C下形成重組基底膜基質(zhì)膠。高濃度的基質(zhì)膠的主要成分包括層粘連蛋白、IV型膠原、粘連素和肝素硫酸酯蛋白聚糖。


適用范圍:

該系列分為標準型高濃度和低生長因子高濃度,其濃度和粘度均高于普通濃度的基質(zhì)膠,更適合于體內(nèi)實驗(動物模型),如PDX、CDX、體內(nèi)血管生成測定等。  


產(chǎn)品參數(shù):

來源:小鼠腫瘤;

1.顏色:含酚紅的基質(zhì)膠呈黃粉色,無酚紅的基質(zhì)膠呈半透明淡黃色;

2.形態(tài):標準型基質(zhì)膠在4°C下溶解為透明液體;高濃度基質(zhì)膠在0°C下溶解后為透明液體,長時間放置于4°C后會半凝膠化。

3.濃度:蛋白質(zhì)濃度范圍為8至26 mg/mL。

4.內(nèi)毒素:≤ 4.5 EU/mL

5.凝膠時間:室溫下5-30分鐘凝膠,當溫度從22°C升至37°C時,凝膠形成速度加快。


包被涂層方法:

打造成功的細胞培養(yǎng)環(huán)境,關(guān)鍵在于選擇合適的基質(zhì)膠。其中,基質(zhì)膠的包被涂層方法對于不同的應用需求有所不同。下面,我們將介紹基質(zhì)膠的包被涂層步驟,幫助您輕松應對各種細胞培養(yǎng)挑戰(zhàn)。

首先,讓我們來了解一下基質(zhì)膠的解凍過程。Biogradetech貨號A-MGL26高濃度無酚紅的基質(zhì)膠在2-8°C的冰箱中過夜解凍。由于冰箱溫度可能有所不同,因此建議在解凍過程中將基質(zhì)膠放在冰上保持低溫,以防止過早凝膠化。解凍后的基質(zhì)膠在15°C以上的溫度下會迅速凝固,因此在使用時要保持冰上狀態(tài),以避免不必要的凝膠形成。

Biogradetech貨號A-MGL26高濃度無酚紅的基質(zhì)膠有許多應用場景,需要不同的厚度和濃度。例如,用于內(nèi)皮細胞形成類似毛細血管的結(jié)構(gòu)(管狀結(jié)構(gòu)形成實驗)、大鼠主動脈組織分化為類似毛細血管的結(jié)構(gòu)(主動脈環(huán)形成實驗)、上皮器官樣結(jié)構(gòu)形成或腫瘤器官樣結(jié)構(gòu)形成,需要較厚的凝膠,也就是厚層凝膠法。而一些應用,如原代細胞的傳代培養(yǎng),需要薄層涂層而不是厚凝膠,因此應采用薄層凝膠法。


厚層凝膠法:

1.按上述方法解凍基質(zhì)膠;

2.緩慢上下移液將基質(zhì)膠混勻,注意不要引入空氣泡;

3.向細胞培養(yǎng)板表面加入200-300μL/cm2基質(zhì)膠,平鋪均勻,注意避免產(chǎn)生氣泡;

4.將培養(yǎng)板放置在 37 ℃,等待 30 min 形成凝膠即可使用。


薄層包被法:

1.按上述方法解凍基質(zhì)膠;

2.緩慢上下移液將基質(zhì)膠混勻,注意不要引入空氣泡;

3.根據(jù)實驗需求使用預冷的培養(yǎng)基稀釋。建議將基質(zhì)膠稀釋為1:100以用于原代細胞的擴增。對于您的應用,可能需要經(jīng)驗性地確定最佳涂層濃度;

4.加入適量體積的該溶液覆蓋整個細胞培養(yǎng)板表面。建議加入300μL/cm2的溶液;

5.將培養(yǎng)板放置在室溫,孵育至少1h;

6.吸去上清即可使用。不要讓涂層表面干燥。


通過以上步驟,您可以根據(jù)不同的細胞培養(yǎng)需求,靈活選擇適合的基質(zhì)膠涂層方法。無論是厚凝膠還是薄層涂層,都能為您的細胞研究提供穩(wěn)定的3D培養(yǎng)支持,助您取得優(yōu)異的實驗結(jié)果。趕快嘗試基質(zhì)膠涂層方法,提升您的細胞培養(yǎng)實驗效果吧!  


實驗操作示例:小鼠皮下腫瘤形成

1. 設備、試劑和耗材

1.1 設備:生物安全柜,細胞培養(yǎng)箱,低溫臥式離心機,倒置顯微鏡;

1.2 試劑:基質(zhì)膠(貨號: A-MGL21 / A-MGL23 / A-MGL24 / A-MGL26 ),基礎培養(yǎng)基,含有10%胎牛血清的培養(yǎng)基,1×PBS,胰蛋白酶溶液;

1.3 耗材:無菌移液器槍頭、10cm細胞培養(yǎng)皿、無菌EP管、一次性注射器和其它耗材(或根據(jù)實驗設計進行調(diào)整)。

 

2. 實驗內(nèi)容和方法

2.1. 將Biogradetech貨號A-MGL24高濃度的基質(zhì)膠放入冰盒中,在4°C的冰箱中慢慢解凍過夜;

2.2. 選擇生長狀況良好且呈對數(shù)生長的細胞,棄去上清液,加入2 mL 1×PBS溶液輕輕洗滌,棄去液體;

2.3. 在培養(yǎng)皿中加入1 mL 0.25%胰蛋白酶細胞消化液,靜置10秒鐘,棄去胰蛋白酶,用殘留的胰蛋白酶在室溫下繼續(xù)消化1~3分鐘;

2.4. 當細胞變圓(請記住,不能消化到細胞邊緣清晰時),加入1 mL含有10%胎牛血清的培養(yǎng)基終止消化。小心地吹散細胞,將細胞懸浮液收集到15 mL塑料離心管中;

2.5. 以1000 rpm離心3分鐘,棄去上清液。用PBS洗滌細胞一次后,通過加入無血清基礎培養(yǎng)基重新懸浮細胞,并取10 ?L細胞懸液進行細胞計數(shù);

2.6.

HepG2細胞:每只小鼠接種500萬個細胞。根據(jù)細胞密度,將所需的細胞懸液放入無菌的1.5 mL塑料離心管中,以1000 rpm離心3分鐘。棄去上清液,加入無血清培養(yǎng)基或PBS,直到總體積為300 μL;

HCT-116細胞:每只小鼠接種100萬個細胞。根據(jù)細胞密度,將所需的細胞懸液放入無菌的1.5 mL塑料離心管中,以1000 rpm離心3分鐘。棄去上清液,加入無血清培養(yǎng)基或PBS,直到總體積為300 μL;

MIA-PaC-2細胞:每只小鼠接種1000萬個細胞。根據(jù)細胞密度,將所需的細胞懸液放入無菌的1.5 mL塑料離心管中,以1000 rpm離心3分鐘。棄去上清液,加入無血清培養(yǎng)基或PBS,直到總體積為500 μL;

2.7. 基質(zhì)膠的混合:將細胞懸液與基質(zhì)膠以1:1的比例在4°C下混合;

2.8. 皮下注射:左手將裸鼠固定住,右手將細胞懸液皮下注射到裸鼠的右背部。在接種過程中,將針頭稍微插入皮下,約深1cm,以減少注射后細胞懸液從注射點溢出,注射體積為100 μL。MIA-PaC-2細胞注射200 μL/個;

2.9. 數(shù)據(jù)記錄:將裸鼠放回籠子繼續(xù)飼養(yǎng),根據(jù)實驗要求定期測量腫瘤體積,記錄數(shù)據(jù)并繪制曲線,在腫瘤體積小于2000 mm3之前,安樂死裸鼠,取出腫瘤并拍照記錄。


Biogradetech是生命科學和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應商。他們提供廣泛的產(chǎn)品組合,包括細胞生物學、蛋白質(zhì)組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經(jīng)科學、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域的試劑。Biogradetech的產(chǎn)品受到全球生物研究機構(gòu)和生物制藥公司的高度追捧,他們以高質(zhì)量、可靠性和服務而聞名。 

Biogradetech成立于2015年,總部位于美國加利福尼亞州,早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務起家,逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線,并將其商業(yè)化銷售,包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。其產(chǎn)品均在嚴格的全球標準下生產(chǎn),Biogradetech還提供專業(yè)的技術(shù)支持,幫助客戶選擇正確的產(chǎn)品,并正確使用產(chǎn)品。Biogradetech致力于為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品和服務,是那些尋求高質(zhì)量試劑和可靠結(jié)果的人值得信賴的合作伙伴。 為了更好地滿足亞太地區(qū)客戶的需求并提升交付速度,Biogradetech在香港設立現(xiàn)貨中心,將能更迅速地滿足客戶的需求,確保訂單的高效處理,并加速產(chǎn)品的交付和配送,從而提供更快速、可靠的服務。 

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