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先天免疫系統(tǒng)在抵御微生物入侵以及啟動炎癥反應(yīng)方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。抗菌肽(antimicrobial peptides, AMP)是真核生物抵御細(xì)菌和真菌入侵的一種重要的進(jìn)化上保守的防御機(jī)制。盡管存在多個類別的抗菌肽,LL-37是人類防御素家族中唯一的成員。LL-37除了具有抗菌特性外,還具有多種調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的特性,這些特性可能會促進(jìn)自身免疫疾病的發(fā)生。
LL-37是一種由37個氨基酸組成的陽離子肽,由絲氨酸蛋白酶以及中性粒細(xì)胞中的蛋白酶3(PR3)對18 kDa的人陽離子抗菌蛋白(hCAP18)C末端進(jìn)行細(xì)胞外切割而生成。LL-37能夠在溶液和脂質(zhì)雙層中形成聚集物,因此與其他抗菌肽不同,它能夠免受蛋白水解降解。其正電荷使其能夠優(yōu)先與帶負(fù)電的磷脂膜結(jié)合。此外,在膜相互作用過程中,LL-37主要呈現(xiàn)α-螺旋結(jié)構(gòu),從而使其疏水殘基單向分離,這使得LL-37能夠穿透膜,形成跨膜孔隙并導(dǎo)致細(xì)菌溶解。與膽固醇相關(guān)的細(xì)胞膜(例如哺乳動物中的細(xì)胞膜)能夠免受LL-37的孔隙形成效應(yīng)的影響;然而,這種效應(yīng)可以通過更高濃度的肽來克服。此外,LL-37還作為趨化因子,對中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和T細(xì)胞具有趨化作用。LL-37對蛋白水解降解具有顯著的抵抗力,并且在一定程度上對哺乳動物細(xì)胞具有細(xì)胞毒性。研究表明,LL-37在血漿中的水平為25 – 250 ng/ml,并且在感染性疾病中會升高。

Hycult的人LL-37酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)是一種基于夾心ELISA的檢測原理,體外定量檢測血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的LL-37。樣本和標(biāo)準(zhǔn)品被固定在包被有特異性抗體的孔底。生物素標(biāo)記的檢測抗體將與捕獲的人LL-37結(jié)合。鏈霉親和素-過氧化物酶結(jié)合物將與生物素標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合。鏈霉親和素-過氧化物酶結(jié)合物將與底物四甲基聯(lián)苯胺(TMB)發(fā)生反應(yīng)。通過加入草酸終止酶反應(yīng)。使用分光光度計測量450 nm處的吸光度。通過繪制吸光度與人LL-37標(biāo)準(zhǔn)品濃度的關(guān)系,獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線。與標(biāo)準(zhǔn)品同時運行的樣本中的人LL-37濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定。

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名稱 | LL-37, Human, ELISA kit 人抗菌肽LL-37 ELISA定量檢測試劑盒 |
目的 | 體外定量檢測血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的LL-37 |
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