人FXN（Frataxin）ELISA試劑盒專為精確測(cè)量人樣本（包括血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液）中的Frataxin水平而設(shè)計(jì)。該試劑盒具有卓越的靈敏度和特異性，能夠?yàn)楦鞣N研究應(yīng)用提供準(zhǔn)確且一致的結(jié)果。

Frataxin是一種關(guān)鍵蛋白，參與調(diào)節(jié)鐵代謝和線粒體功能，對(duì)細(xì)胞整體健康至關(guān)重要。Frataxin水平失調(diào)與多種疾病相關(guān)，包括弗里德賴希共濟(jì)失調(diào)癥（一種以進(jìn)行性肌肉無力和協(xié)調(diào)障礙為特征的神經(jīng)退行性疾病）。

通過準(zhǔn)確定量Frataxin水平，研究人員可以獲得這些疾病病理生理學(xué)的寶貴見解，并可能識(shí)別新的治療靶點(diǎn)。人FXN ELISA試劑盒是研究與Frataxin相關(guān)疾病并推動(dòng)這些疾病治療開發(fā)的寶貴工具。

作為Assay Genie全國(guó)總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Assay Genie熱銷產(chǎn)品人FXN（Frataxin）ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

人FXN（Frataxin）ELISA試劑盒：

檢測(cè)類型：夾心法

規(guī)格：96次檢測(cè)

檢測(cè)時(shí)間：4.5小時(shí)

反應(yīng)性：人

檢測(cè)方法：比色法

檢測(cè)范圍：23.44 - 1500 pg/mL

靈敏度：14.06 pg/mL

每孔所需樣本體積：100uL

樣本類型：血清、血漿及其他生物液體

特異性：該試劑盒可識(shí)別樣本中的人FXN。未觀察到人FXN與其類似物之間存在顯著的交叉反應(yīng)或干擾。

試劑盒原理

該ELISA試劑盒采用夾心ELISA方法。試劑盒中提供的微孔ELISA板已預(yù)先涂有一抗人FXN特異性的抗體。將標(biāo)準(zhǔn)品或樣本加入適當(dāng)?shù)奈⒖譋LISA板孔中，與特異性抗體結(jié)合。隨后依次向每個(gè)微孔板中加入針對(duì)人FXN的生物素標(biāo)記檢測(cè)抗體和鏈霉親和素-辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合物，并進(jìn)行孵育。洗去未結(jié)合的成分后，向每個(gè)孔中加入底物溶液。只有含有人FXN、生物素標(biāo)記檢測(cè)抗體和鏈霉親和素-HRP結(jié)合物的孔才會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。通過加入終止液終止酶-底物反應(yīng)，顏色變?yōu)辄S色。在450 nm ± 2 nm波長(zhǎng)處通過分光光度法測(cè)量吸光度（OD值）。OD值與人FXN的濃度成正比。通過將樣本的OD值與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，可以計(jì)算出樣本中人FXN的濃度。

精密度

批內(nèi)精密度（同一檢測(cè)內(nèi)的精密度）：分別在一塊板上對(duì)低、中、高三個(gè)水平的人FXN樣本進(jìn)行20次檢測(cè)。

批間精密度（不同檢測(cè)間的精密度）：分別在三塊不同的板上對(duì)低、中、高三個(gè)水平的人FXN樣本進(jìn)行檢測(cè)，每塊板20次重復(fù)。

操作步驟

在預(yù)包被的微孔板上設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品、測(cè)試樣本和對(duì)照（零）孔，并記錄它們的位置。建議每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣本均進(jìn)行雙份測(cè)量。注意：將所有溶液加入孔底，避免與孔壁接觸。加入孔中時(shí)確保溶液不起泡。

向標(biāo)準(zhǔn)孔中加入100uL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

向?qū)φ眨悖┛字屑尤?00uL的樣本/標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液。

向測(cè)試樣本孔中加入100uL適當(dāng)稀釋的樣本（血清、血漿、組織勻漿及其他生物液體）。

用試劑盒提供的封板膜覆蓋微孔板，并在37°C孵育90分鐘。

吸去每個(gè)孔中的液體，不要洗滌。立即向每個(gè)孔中加入100?L生物素標(biāo)記檢測(cè)抗體工作液。用封板膜覆蓋微孔板并輕輕混合。在37°C孵育1小時(shí)。

吸去或傾倒微孔板中的溶液，向每個(gè)孔中加入350?L洗滌緩沖液，并在室溫下孵育1-2分鐘。吸去每個(gè)孔中的溶液，并將微孔板在吸水濾紙上拍干。重復(fù)此過程3次。注意：此步驟及其他洗滌步驟可使用微孔板洗滌儀。

向每個(gè)孔中加入100uL HRP結(jié)合物工作液。用封板膜覆蓋并孵育30分鐘。

吸去或傾倒微孔板中的溶液。重復(fù)步驟7中的洗滌過程5次。

向每個(gè)孔中加入90uL底物試劑。用新的封板膜覆蓋并孵育約15分鐘。避光。注意：根據(jù)實(shí)際顏色變化，反應(yīng)時(shí)間可以縮短或延長(zhǎng)，但不超過30分鐘。

向每個(gè)孔中加入50uL終止液。注意：加入終止液的順序應(yīng)與加入底物溶液的順序相同。

立即使用450 nm波長(zhǎng)的微孔板讀數(shù)儀測(cè)定每個(gè)孔的吸光度（OD值）。

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