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生物素-14-dATP被酶促摻入DNA/cDNA中,作為其天然對應(yīng)物dATP的替代品。隨后使用與辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶(AP)、熒光染料或瓊脂糖/磁珠偶聯(lián)的鏈霉抗生物素蛋白檢測所得生物素標(biāo)記的DNA/cDNA探針。Nick Translation的最佳底物特性是通過連接到腺嘌呤N6位的14原子連接體來確保的。對于PCR摻入實驗,例如使用Taq聚合酶,建議使用生物素-11-dATP(#NU-1175-BIOX),其生物素部分通過11原子接頭連接到腺嘌呤的N7 Deaza位置。
Nick Translation推薦的生物素-14-dATP/dATP比例:50%生物素-14-dATP/50%dATP
請注意:生物素-14-dATP的最佳終濃度可能很大程度上取決于應(yīng)用和檢測條件。為了獲得優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品收率和高摻入率,建議單獨優(yōu)化生物素-14-dATP/dATP/dATPs的比例。

貨號:JBS-NU-835-BIO14-L
運輸:在凝膠包上運輸
儲存條件:在-20°C下儲存
短期暴露(累計長達(dá)1周)于環(huán)境溫度是可能的。
保質(zhì)期:自交付日期起12個月
分子式:C32H54N9O15P3S(游離酸)
分子量:929.81克/摩爾(游離酸)
精確質(zhì)量:929.27克/摩爾(游離酸)
純度:≥95%(HPLC)
形式:10 mM Tris-HCl中的過濾溶液(30 kDa)
顏色:無色至微黃色
濃度:1.0 mM - 1.1 mM
pH值:7.5 ±0.5
光譜特性:λmax 266 nm,ε 16.2 L mmol^-1 cm^-1(Tris-HCl pH 7.5)
一般實驗室用途。
生物素標(biāo)記14-dATP應(yīng)用:
通過以下方式并入DNA/cDNA
△使用DNAse I/DNA聚合酶I的Nick Translation [1] & 內(nèi)部數(shù)據(jù)
△使用Klenow片段的引物延伸 [2]
生物素標(biāo)記14-dATP文獻(xiàn)參考:
[1] Gebeyehu et al. (1987) Novel biotinylated nucleotide-analogs for labeling and colorimetric detection of DNA. Nucleic Acids Res. 15 (21):4513.
[2] Nagano et al. (2015) Single-cell Hi-C for genome-wide detection of chromatin interactions that occur simultaneously in a single cell. Nature Protocols 10 (12):1987.
[3] Mumbach et al. (2016) HiChIP: Efficient and sensitive analysis of protein-directed genome architecture Nature Protocols 13 (11):919.
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