彗星實驗（Comet assay）也被稱為單細胞凝膠電泳實驗（Single cell gel electrophoresis，SCGE），是一種超靈敏的單細胞水平上檢測DNA損傷的技術(shù)， 是由Ostling等研究者于1984年首次提出的一種通過檢測DNA鏈損傷來判別遺傳毒性的技術(shù)。可以檢測到細胞中的DNA斷裂,甚至檢出例如自然光照射體外淋巴細胞1h后引起的DNA損傷。

當(dāng)各種內(nèi)源性和外源性 DNA 損傷因子誘發(fā)細胞 DNA 鏈斷裂時，其超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞，在細胞裂解液作用下，細胞膜、核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞，細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、RNA 以及其他成分均擴散到電解液中，而核DNA由于分子量太大不能進入凝膠而留在原位。電泳過程中，如果DNA沒有損傷，則將停留在原位，染色后呈圓形的熒光團，無拖尾出現(xiàn)。如果DNA受損，斷裂的碎片進入到凝膠中，在電場的作用下，DNA碎片離開原位向陽極遷移，形成拖尾。

實驗步驟

該彗星實驗法檢測低濃度遺傳毒物具有高靈敏性，研究的細胞不需處于有絲分裂期。同時，這種技術(shù)只需要少量細胞。

·制備單細胞懸浮液，在 37℃ 條件下，懸浮液與低熔點瓊脂糖（LM瓊脂糖）混合；

·將瓊脂糖、細胞混合物涂布在預(yù)處理的載玻片上；

·4℃條件下用裂解液處理30-60min或過夜，裂解液由去垢劑及高鹽溶液組成，可去除多余的細胞膜及組蛋白；

·將載玻片浸入電泳溶液中；

·進行凝膠電泳，隨后，中和載玻片，待LM瓊脂糖完全干燥后，用熒光染料染色，并于熒光顯微鏡下觀察DNA損傷程度。

產(chǎn)品優(yōu)勢

試劑整齊安全可靠：提供特色涂層多孔彗星玻片，增加凝膠與載玻片粘附力，有效降低脫膠風(fēng)險。

優(yōu)點：操作簡便：無需用不同熔點瓊脂糖繁瑣鋪膠，可快速、靈敏的檢測細胞 DNA 損傷。

實驗效果展示

Biogradetech 彗星試劑盒檢測Jurkat細胞的DNA 損傷，并和A品牌進行比較。彗星試劑盒檢測不僅步驟更簡便，省時高效，且熒光較亮，樣本不易脫落，可形成穩(wěn)定鮮亮的結(jié)果。

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