Arbor Assays- 皮質(zhì)酮ELISA試劑盒

文獻(xiàn)標(biāo)題：House sparrows do not show a diel rhythm in double-strand DNA damage in erythrocytes

DOI：https://doi.org/10.7717/peerj.18375

研究背景：

DNA損傷可能由多種內(nèi)在和外在因素引起。未受控制的DNA損傷積累可能導(dǎo)致基因表達(dá)變化、細(xì)胞凋亡、癌癥或壽命縮短。最近的一項(xiàng)研究表明，自由生活的家麻雀（Passer domesticus）在夏季比冬季在五個(gè)不同的組織中具有更高的DNA損傷。這一結(jié)果在將家麻雀帶入圈養(yǎng)環(huán)境并暴露于相似的光周期下時(shí)仍然一致，且在所有其他變量保持不變的情況下。基于上述結(jié)果，研究者提出了兩個(gè)假設(shè)：(1) DNA損傷的季節(jié)性變化與晝夜節(jié)律調(diào)節(jié)有關(guān)；(2) DNA損傷的季節(jié)性變化與活躍小時(shí)數(shù)的總數(shù)有關(guān)。盡管尚未研究DNA損傷的晝夜節(jié)律，但許多能改變DNA損傷水平的因素確實(shí)表現(xiàn)出節(jié)律性。例如，基線皮質(zhì)酮（可以增加DNA損傷）和褪黑激素（具有抗氧化特性，可能保護(hù)DNA免受損傷）在黑暗期或scotophase達(dá)到高峰。

研究方法：

1、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)-晝夜節(jié)律（Diel rhythms）：研究者捕獲了自由生活的家麻雀，并在圈養(yǎng)條件下對(duì)其進(jìn)行了12小時(shí)光照：12小時(shí)黑暗（12L:12D）的光周期實(shí)驗(yàn)。通過(guò)在一天中的六個(gè)時(shí)間點(diǎn)（00:00, 04:00, 08:00, 12:00, 16:00, 20:00）收集血液樣本，來(lái)評(píng)估DNA損傷和尿酸水平，以判斷是否存在晝夜節(jié)律。

2、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)-共振光周期（Resonance light cycles）：研究者進(jìn)行了另一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，將鳥類置于非自然的光周期中，比較了6小時(shí)光照：6小時(shí)黑暗（6L:6D）和4.5小時(shí)光照：7.5小時(shí)黑暗（4.5L:7.5D）的光周期對(duì)DNA損傷的影響，并與它們的自然對(duì)應(yīng)物12L:12D和9L:15D進(jìn)行比較。實(shí)驗(yàn)中還評(píng)估了皮質(zhì)酮水平和DNA損傷，以及腹部脂肪、海馬體、下丘腦和肝臟中的DNA損傷。

3、彗星實(shí)驗(yàn)（Comet assay）：使用中性彗星實(shí)驗(yàn)來(lái)量化雙鏈DNA損傷。對(duì)全血、腹部脂肪、海馬體、下丘腦和肝臟樣本進(jìn)行處理，并使用彗星滑梯進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，最后使用SYBR? Gold染色并通過(guò)熒光顯微鏡進(jìn)行成像，以量化DNA損傷。

4、皮質(zhì)酮量化：通過(guò)離心分離全血和血漿，使用酶免疫分析法對(duì)皮質(zhì)酮進(jìn)行量化。

研究?jī)?nèi)容：

研究主要探討了家麻雀紅細(xì)胞中雙鏈DNA損傷的晝夜節(jié)律，并進(jìn)一步研究了非自然光周期對(duì)DNA損傷的影響。此外，研究還評(píng)估了光周期對(duì)皮質(zhì)酮水平和組織中DNA損傷的影響，以及腹部脂肪、海馬體、下丘腦和肝臟中的DNA損傷情況。

研究結(jié)果

晝夜節(jié)律實(shí)驗(yàn)結(jié)果：研究發(fā)現(xiàn)，家麻雀的DNA損傷在一天中并沒(méi)有顯示出晝夜節(jié)律，而尿酸水平則表現(xiàn)出晝夜節(jié)律，即在光照期間達(dá)到高峰，在黑暗期間降低。

共振光周期實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在12小時(shí)總光照的鳥類中，6L:6D光周期的鳥類在血液中、腹部脂肪和海馬體中的DNA損傷低于12L:12D光周期的鳥類。而在9小時(shí)總光照的鳥類中，4.5L:7.5D光周期的鳥類在下丘腦和肝臟中的DNA損傷低于9L:15D光周期的鳥類。

 生理反應(yīng)：經(jīng)過(guò)共振光周期處理后，鳥類的基礎(chǔ)皮質(zhì)酮水平增加，表明可能受到光周期的影響而準(zhǔn)備繁殖。同時(shí)，DNA損傷在血液中降低，表明DNA損傷與皮質(zhì)酮水平之間可能不存在直接的驅(qū)動(dòng)關(guān)系。

組織特異性的DNA損傷變化：在6:6共振光周期組中，血液、腹部脂肪和海馬體的DNA損傷顯著低于12:12組，但在下丘腦和肝臟中沒(méi)有差異。而在4.5:7.5共振光周期組中，下丘腦和肝臟的DNA損傷低于9:15組。

Arbor Assays生產(chǎn)的皮質(zhì)酮ELISA試劑盒Corticosterone ELISA Kit, (5 Whole Plate)（貨號(hào)K014-H5W）

這個(gè)試劑盒在文獻(xiàn)中的主要作用是量化血漿中的皮質(zhì)酮（corticosterone）水平。具體來(lái)說(shuō)，研究者使用這個(gè)試劑盒來(lái)測(cè)量：

皮質(zhì)酮水平：通過(guò)酶免疫分析法，研究者能夠定量分析家麻雀血漿中的皮質(zhì)酮濃度，這是評(píng)估它們應(yīng)激反應(yīng)的一個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)。

光周期影響：通過(guò)比較不同光周期處理下家麻雀的皮質(zhì)酮水平，研究者探討了非自然光周期（共振光周期）對(duì)鳥類生理應(yīng)激反應(yīng)的影響。

生理和行為響應(yīng)：皮質(zhì)酮水平的變化與鳥類的繁殖生理和行為響應(yīng)有關(guān)，因此，這個(gè)試劑盒幫助研究者理解光周期變化如何影響鳥類的繁殖準(zhǔn)備和應(yīng)激狀態(tài)。

綜上所述，K014H5W試劑盒在文獻(xiàn)中用于測(cè)量皮質(zhì)酮水平，為研究光周期對(duì)家麻雀DNA損傷和應(yīng)激反應(yīng)影響提供了重要數(shù)據(jù)。