大鼠IP-10，即10 kDa干擾素-γ誘導(dǎo)蛋白，也稱為C-X-C基序趨化因子10，是一種由位于14號染色體14p22位點(diǎn)的Cxcl10基因編碼的98個氨基酸的細(xì)胞因子蛋白。在初始合成后，21個氨基酸的信號序列從N端區(qū)域被移除，使得77個氨基酸的IP-10蛋白能夠正確折疊并成熟。IP-10是一種促炎細(xì)胞因子，能夠誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞中的DNA合成、細(xì)胞增殖和細(xì)胞遷移。除了作為促炎細(xì)胞因子的作用外，IP-10可能還通過癌基因Ras和血清生長因子的誘導(dǎo)參與T細(xì)胞效應(yīng)功能，甚至可能參與T細(xì)胞的發(fā)育；癌基因誘導(dǎo)是持續(xù)性的，而血清誘導(dǎo)則是短暫的。  

作為Abnova全國總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Abnova熱銷產(chǎn)品Cxcl10（大鼠）ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Cxcl10（大鼠）ELISA試劑盒檢測原理：

Cxcl10（大鼠）ELISA試劑盒包含用于定量檢測自然或重組大鼠IP-10濃度的必要組分，適用于包括上清液、血清和血漿在內(nèi)的任何實(shí)驗(yàn)樣本。這種特定的免疫分析采用“夾心”酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的定量技術(shù)，其中目標(biāo)蛋白（抗原）以“夾心”形式被預(yù)先包被在每個孔底的初級捕獲抗體和隨后由研究者添加的次級檢測抗體所結(jié)合。

每個孔底包被的捕獲抗體針對大鼠IP-10上的特定表位，而用戶添加的檢測抗體則結(jié)合到被捕獲目標(biāo)蛋白上的表位。在操作的每一步驟中，都需要進(jìn)行一系列洗滌步驟，以確保消除蛋白質(zhì)之間或蛋白質(zhì)與固相之間的非特異性結(jié)合。

在目標(biāo)抗原孵育和“夾心”形成后，辣根過氧化物酶通過與次級抗體的恒定重鏈結(jié)合（無論是通過共價鍵還是通過生物素-鏈霉親和素相互作用），在加入底物后可以引發(fā)比色反應(yīng)。當(dāng)加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺）時，由過氧化物酶催化的反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色，代表抗原濃度。

在顏色充分發(fā)展后，可以通過加入終止液（2 N硫酸）來終止反應(yīng)，溶液顏色將變?yōu)辄S色。然后可以通過分光光度計讀取每個孔的吸光度，從而生成標(biāo)準(zhǔn)曲線并隨后確定蛋白濃度。

標(biāo)準(zhǔn)曲線：

注意：標(biāo)準(zhǔn)曲線僅用于說明目的，不應(yīng)用于計算未知樣本濃度。每次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時都應(yīng)生成新的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

結(jié)果計算：

計算每個標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和樣本的重復(fù)或三重復(fù)讀數(shù)的平均值，并減去零標(biāo)準(zhǔn)的平均吸光度值。使用Microsoft Excel或其他能夠建立四參數(shù)邏輯（4-PL）曲線擬合的計算機(jī)軟件生成標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果使用Excel或其他繪圖工具，將平均吸光度值（以吸光度單位表示，y軸）與已知標(biāo)準(zhǔn)品濃度（以pg/ml表示，x軸）進(jìn)行繪制。僅使用能夠建立明顯梯度的值。之后，通過回歸分析在繪制的點(diǎn)之間生成最佳擬合曲線或“趨勢線”。

Abnova生產(chǎn)的所有產(chǎn)品，包括重組蛋白和抗體均采用目前國際上最先進(jìn)的生產(chǎn)和SPF級動物設(shè)施。Abnova引進(jìn)CFS先進(jìn)的麥胚無細(xì)胞蛋白合成系統(tǒng)及獨(dú)有的全自動蛋白純化技術(shù)，向全球蛋白質(zhì)學(xué)客戶提供最高品質(zhì)的重組蛋白產(chǎn)品。Abnova通過與歐洲的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室（EMBL，Eurpean Molecular Biology Laboratory）共同開發(fā)的單克隆抗體生產(chǎn)系統(tǒng)，包括高通量的抗原準(zhǔn)備、多位點(diǎn)免疫、自動融合與篩選分析。其中MaxPab技術(shù)是Abnova專利的能雙重識別平面線性蛋白及三維空間結(jié)構(gòu)上接近的蛋白的抗體技術(shù)，非常適合用于免疫學(xué)檢測，MaxPab抗體以真核表達(dá)的全長蛋白作為免疫原，制備純化而來，具有非常高的免疫識別功能，同時后繼的純化技術(shù)也保證了極高的特異性，非常適合免疫學(xué)檢測。