J2已被用于闡明抗病毒反應(yīng)是如何啟動(dòng)的，病毒采取了哪些反策略來(lái)避免它們，并通過(guò)對(duì)病毒核酸復(fù)制位點(diǎn)進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)定位研究來(lái)探索病毒生命（Welsch等人，2009&Knoops等人，2011）。J2也被推薦作為診斷工具，以檢測(cè)未確定的病原體本質(zhì)上是細(xì)菌還是病毒（Richardson等人，2010）。最近，J2也被用于監(jiān)測(cè)體外合成的mRNA制劑中dsRNA的去除，這些制劑可能在基因治療中具有潛在的用途（Kariko等人，2011）。J2已成功用于各種免疫捕獲方法，例如ELISA中。

艾美捷基于J2的雙鏈RNA ELISA試劑盒 #KBBA56：

校準(zhǔn)器范圍：0 納克/毫升 - 200 納克/毫升

敏感性：~1.5 納克/毫升

樣品類(lèi)型：細(xì)胞培養(yǎng)上清液和生物制劑

運(yùn)輸條件：2 - 8 攝氏度

檢測(cè)方法：450 nm 比色法

用法：僅供研究使用

基于J2的雙鏈RNA ELISA試劑盒檢測(cè)原理：

KRIBIOLISA 雙鏈 RNA （dsRNA） ELISA 采用定量夾心酶免疫測(cè)定技術(shù)。它基于使用兩種雙鏈RNA（dsRNA）特異性單克隆抗體，可以靈敏和選擇性地檢測(cè)dsRNA分子（>=40 bp），而不受其核苷酸組成和序列的影響。dsRNA （J2） 抗體預(yù)包被到微孔上。將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品移液到微孔中，并由捕獲抗體結(jié)合。然后，將HRP（辣根過(guò)氧化物酶）偶聯(lián)的抗dsRNA （K1）移液并孵育。洗滌微孔以去除任何非特異性結(jié)合后，將即用型底物溶液（TMB）添加到微孔中，顏色與樣品中dsRNA的量成比例發(fā)展。然后通過(guò)添加終止溶液停止顯色。在450nm處測(cè)量吸光度。

基于J2的雙鏈RNA ELISA試劑盒檢測(cè)程序：

使用前將所有試劑置于室溫。強(qiáng)烈建議所有控件和示例應(yīng)重復(fù)或一式三份運(yùn)行。

在各自的孔中加入100ul制備的陽(yáng)性對(duì)照/標(biāo)準(zhǔn)品和樣品。

密封板并在 37*C 下孵育 120 分鐘。

吸出并用洗滌緩沖液（4X）洗滌板1次，并通過(guò)在吸收紙上用力倒置板來(lái)吸干殘留緩沖液。擦拭微量滴定孔外底部的任何液體，因?yàn)槿魏螝埩粑锒紩?huì)干擾讀數(shù)步驟。

向所有孔中加入100ul的dsRNA特異性K1檢測(cè)：HRP偶聯(lián)物。

密封板并在 37*C 下孵育 60 分鐘。

重復(fù)洗滌步驟（4）。

在每個(gè)孔中加入100ul的TMB底物。

將微孔板在室溫下在黑暗中孵育30分鐘。請(qǐng)勿搖晃，否則可能會(huì)導(dǎo)致更高的背景和更差的精度。陽(yáng)性孔應(yīng)變成藍(lán)色。

移出 100 ul 的停止溶液。井的顏色應(yīng)該從藍(lán)色變成黃色。11.用酶標(biāo)儀讀取450nm處的吸光度。