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Biosensis公司的MAP1LC3 A/B抗體是研究自噬的寶貴工具,自噬是一種負(fù)責(zé)降解和回收受損細(xì)胞器和蛋白質(zhì)的基本細(xì)胞過程。自噬功能障礙與神經(jīng)退行性疾病(包括阿爾茨海默病、帕金森病和亨廷頓病)的發(fā)病機(jī)制相關(guān)性日益增加,使MAP1LC3蛋白成為疾病研究和治療開發(fā)的關(guān)鍵靶點(diǎn)。這些抗體已經(jīng)過多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)的驗(yàn)證,包括共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)和Western blotting法。
在通過細(xì)胞離心法制備的人類白細(xì)胞中,MAP1LC3A(R-146-100)和MAP1LC3C(R-140-100)通過免疫熒光染色顯示出明顯的細(xì)胞質(zhì)定位。在SH-SY5Y神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中,MAP1LC3A(M-1725-100)顯示出廣泛的細(xì)胞質(zhì)分布,通過流式細(xì)胞分析和西方印跡檢測(cè)到約14 kDa的蛋白帶得到確認(rèn)。此外,通過R-155-100抗體檢測(cè)到,在暴露于ESE-16的HeLa細(xì)胞中,LC3B表達(dá)水平升高,突顯了其在監(jiān)測(cè)自噬活性方面的實(shí)用性。憑借已證明的特異性和性能,Biosensis的MAP1LC3抗體為關(guān)注細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和疾病機(jī)制的研究提供了可靠的支撐。

為何選擇Biosensis的MAP1LC3抗體?
·自噬相關(guān)靶向:識(shí)別微管相關(guān)蛋白1輕鏈3,這是自噬體形成和成熟的關(guān)鍵成分
·經(jīng)過驗(yàn)證的應(yīng)用:免疫組織化學(xué)(IHC)、免疫熒光(IF)、Western blot (WB)、流式細(xì)胞術(shù)(部分抗體)
·多物種反應(yīng)性:人、小鼠和大鼠
·驗(yàn)證:使用相關(guān)陰陽性對(duì)照組織進(jìn)行質(zhì)量控制測(cè)試
·文獻(xiàn)支持:被領(lǐng)先的自噬和神經(jīng)科學(xué)出版物引用
MAP1LC3A,兔多克隆抗體(R-146-100)
MAP1LC3A, Rabbit polyclonal Antibody (R-146-100)

使用兔抗MAP1LC3A的全血清(R-146-100)在室溫下以1:200稀釋,孵育1小時(shí),通過共聚焦顯微鏡進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)人白細(xì)胞中的MAP1LC3A。細(xì)胞用Hoechst染料(藍(lán)色)進(jìn)行復(fù)染。
MAP1LC3A,兔多克隆抗體(R-140-100)
MAP1LC3A, Rabbit polyclonal Antibody (R-140-100)

使用兔抗MAP1LC3C的全血清(R-140-100)在室溫下以1:200稀釋,孵育1小時(shí),通過共聚焦顯微鏡進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)人白細(xì)胞中的MAP1LC3C。細(xì)胞用Hoechst染料(藍(lán)色)進(jìn)行復(fù)染。
MAP1LC3A,鼠單克隆抗體(M-1725-100)
MAP1LC3A, Mouse Monoclonal Antibody (M-1725-100)

通過免疫熒光分析人SH-SY5Y細(xì)胞中MAP1LC3A的表達(dá)。用驢抗鼠CF488A二抗(4 ?g/mL,孵育1小時(shí))可視化一抗結(jié)合。細(xì)胞核用Hoechst染料(藍(lán)色)染色。觀察到MAP1LC3A-IR(M-1725-100,綠色)遍布細(xì)胞質(zhì)。

左圖:使用Orflo Moxiflow儀器和協(xié)議,通過流式細(xì)胞術(shù)分析人SHSY-5Y細(xì)胞的MAP1LC3A(M-1725-100)。
右圖:通過西方印跡法檢測(cè)人SHSY-5Y細(xì)胞裂解物(20 ?g/道)中的MAP1LC3A。在西方印跡上看到的寬條帶表明Cat # M-1725-100結(jié)合到分子量約為14 kDa的寬蛋白帶。
MAP1LC3B,兔多克隆抗體(R-155-100)
MAP1LC3B, Rabbit Polyclonal Antibody (R-155-100)

通過流式細(xì)胞術(shù)使用R-155-100評(píng)估暴露于ESE-16的HeLa細(xì)胞中與自噬相關(guān)的蛋白LC3B。疊加直方圖顯示了經(jīng)DMSO載體對(duì)照(橙色)、他莫昔芬(綠色)和ESE-16(灰色/黑色)處理的HeLa細(xì)胞中LC3B的表達(dá),表明處理樣本向右移動(dòng)。(b)圖示顯示了在DMSO載體對(duì)照和暴露于ESE-16的HeLa細(xì)胞之間LC3B熒光的增強(qiáng)(* P?<?0.05,標(biāo)準(zhǔn)差由T形條表示)。圖修改自Theron AE,(2013)。
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