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Cell Biolabs 鳥苷檢測(cè)試劑盒--用于測(cè)量生物樣本中的總鳥苷含量

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2025-02-21     
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鳥苷是一種嘌呤核苷,由鳥嘌呤基團(tuán)通過β-N9-糖苷鍵連接到核糖環(huán)上組成。

鳥苷可以通過磷酸化過程轉(zhuǎn)化為鳥苷酸單磷酸(GMP)、環(huán)鳥苷酸單磷酸(cGMP)、鳥苷酸二磷酸(GDP)和鳥苷酸三磷酸(GTP)。這些磷酸化的鳥苷形式在核酸和蛋白質(zhì)合成、光合作用、肌肉收縮以及細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(特別是與cGMP相關(guān))等過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。

鳥苷在mRNA中是RNA剪接反應(yīng)所必需的。

當(dāng)一個(gè)“自剪接”內(nèi)含子從mRNA信息中切除自身時(shí)(需要一個(gè)5'鳥苷),它會(huì)在兩端切割、重新連接,并僅留下兩側(cè)的外顯子以翻譯成功能性蛋白。抗病毒藥物阿昔洛韋(用于治療皰疹)和抗HIV藥物阿巴卡韋都與鳥苷在結(jié)構(gòu)上相似。鳥苷還被用于合成雷加諾生,這是一種A2A腺苷受體激動(dòng)劑,作為冠狀動(dòng)脈舒張劑,常用于藥物負(fù)荷試驗(yàn)。鳥苷在預(yù)防由犬尿氨酸(QA)誘導(dǎo)的癲癇發(fā)作方面與NMDA受體拮抗劑MK-801的效果相當(dāng)。除了作為NMDA受體激動(dòng)劑外,QA還會(huì)減少谷氨酸的運(yùn)輸/攝取。研究表明,鳥苷可以抵消QA誘導(dǎo)的谷氨酸攝取減少,并增加突觸中谷氨酸的釋放。

Cell Biolabs的鳥苷檢測(cè)試劑盒是一種簡(jiǎn)單的熒光法測(cè)定方法,可在96孔微孔板格式中測(cè)量生物樣本中的總鳥苷含量。

每套試劑盒提供的試劑足以進(jìn)行多達(dá)100次測(cè)定,包括空白、鳥苷標(biāo)準(zhǔn)品和未知樣本。樣本中的鳥苷濃度通過與已知濃度的鳥苷標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較來確定。試劑盒的檢測(cè)靈敏度限為1.6 ?M鳥苷。

*注意:每個(gè)樣本重復(fù)需要2次測(cè)定,一次加入嘌呤核苷磷酸化酶(+PNP),一次不加(-PNP)。鳥苷的含量通過兩個(gè)孔的相對(duì)熒光單位(RFU)讀數(shù)差異計(jì)算得出。


作為Cell Biolabs全國(guó)總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品鳥苷檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱貨號(hào)詳情
鳥苷檢測(cè)試劑盒MET-5149查看


鳥苷檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理:

Cell Biolabs的鳥苷檢測(cè)試劑盒用于測(cè)量生物樣本中的總鳥苷含量。鳥苷在嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)的作用下轉(zhuǎn)化為鳥嘌呤,隨后鳥嘌呤在鳥嘌呤脫氨酶的作用下轉(zhuǎn)化為黃嘌呤,黃嘌呤在黃嘌呤氧化酶的作用下轉(zhuǎn)化為尿酸和過氧化氫。生成的過氧化氫通過一種高特異性的熒光探針進(jìn)行檢測(cè)。辣根過氧化物酶催化探針與過氧化氫之間的反應(yīng),兩者以1:1的比例結(jié)合。樣本與已知濃度的鳥苷標(biāo)準(zhǔn)品在96孔微孔板格式中進(jìn)行比較。樣本和標(biāo)準(zhǔn)品在孵育15分鐘后,使用標(biāo)準(zhǔn)96孔熒光板讀取器進(jìn)行讀取(見圖1)。

MET-5149.png

圖1. 鳥苷檢測(cè)原理。


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MET-5148:鳥嘌呤檢測(cè)試劑盒(熒光法)

MET-5090:腺苷檢測(cè)試劑盒

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試劑盒組成(藍(lán)冰運(yùn)輸)

鳥苷標(biāo)準(zhǔn)品(部件號(hào)51491C):一支50 ?L的100 mM溶液。

10X測(cè)定緩沖液(部件號(hào)268002):一瓶25 mL的500 mM磷酸鈉緩沖液,pH 7.4。

熒光探針(部件號(hào)50231C):一支50 ?L的DMSO溶液。

辣根過氧化物酶(HRP,部件號(hào)234402-T):一支10 ?L的100 U/mL溶液,溶于甘油中。

50X鳥嘌呤脫氨酶(部件號(hào)51472D):一支100 ?L管。

嘌呤核苷磷酸化酶(部件號(hào)50903D):一支500 ?L的18.9 U/mL溶液。

*注:酶的單位定義為在pH 7.4、25℃條件下,每分鐘使1.0 ?mol肌苷發(fā)生磷酸解離生成次黃嘌呤和核糖1-磷酸的酶量。

黃嘌呤氧化酶(部件號(hào)50904D):一支100 ?L的2.5 U/mL溶液。

*注:酶的單位定義為在pH 7.5、25℃條件下,每分鐘將1.0 ?mol黃嘌呤轉(zhuǎn)化為尿酸的酶量。使用次黃嘌呤作為底物時(shí),可獲得約50%的活性。


未提供材料

磷酸鹽緩沖液(PBS)

標(biāo)準(zhǔn)96孔黑色熒光微孔板和/或黑色細(xì)胞培養(yǎng)微孔板


儲(chǔ)存

收到試劑盒后,將10X測(cè)定緩沖液置于室溫保存,其余組分保存于-20℃。熒光探針對(duì)光敏感,需妥善保存。避免多次凍融循環(huán)。

*注:首次解凍50X鳥嘌呤脫氨酶、嘌呤核苷磷酸化酶或黃嘌呤氧化酶后,建議分裝成小份量并保存于-20℃。


Cell Biolabs公司位于美國(guó)加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈(San Diego),是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌,作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商,為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的高端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。  

    

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