產(chǎn)品編號(hào)：

小鼠 TNF α 酶聯(lián)免疫聯(lián)盟試劑盒

大小：

96 種檢測(cè)

別名：

TNFα， 腫瘤壞死因子α， TNF-α， DIF， TNF-α， TNFA， TNFSF2

檢測(cè)方法：

三明治酶聯(lián)免疫吸附法

應(yīng)用：

該免疫檢測(cè)試劑盒允許體外定量測(cè)定血清血漿和其他生物體液中的小鼠TNF-α濃度。

敏感性：

18.75皮克/毫升

范圍：

31.25-2000pg/ml

存儲(chǔ)：

4°C 6個(gè)月

注意：

僅供研究使用

酶聯(lián)免疫吸附法微孔板（可拆卸）

8x12 條

4°C 6個(gè)月

凍干標(biāo)準(zhǔn)品

2

4°C/ -20°C

樣品/標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液

20毫升

4°C

生物素標(biāo)記抗體（濃縮）

120ul

4°C（避光）

抗體稀釋緩沖液

10毫升

4°C

HRP-鏈霉親和素偶聯(lián)物 （SABC）

120ul

4°C（避光）

SABC 稀釋緩沖液

10毫升

4°C

TMB 基板

10毫升

4°C（避光）

停止解決方案

10毫升

4°C

洗滌緩沖液 （25X）

30毫升

4°C

封板機(jī)

5

-

血清

如果使用血清分離管，讓樣品在室溫下凝結(jié) 30 分鐘。以 10，1x g 離心 000 分鐘。收集血清級(jí)分并立即或等分試樣并將樣品儲(chǔ)存在-80°C。 避免多次凍融循環(huán)。

如果未使用血清分離管，則讓樣品在 2-8°C 下凝結(jié)過(guò)夜。 以 10，1x g 離心 000 分鐘。立即取出血清并測(cè)定或等分試樣，并將樣品儲(chǔ)存在-80°C。 避免多次凍融循環(huán)。

血漿

使用EDTA或肝素作為抗凝劑收集血漿。在收集后 4 分鐘內(nèi)以 15 × g 在 1000°C 下離心樣品 30 分鐘。收集血漿級(jí)分并立即或等分測(cè)定并將樣品儲(chǔ)存在-80°C。 避免多次凍融循環(huán)。 注意：過(guò)度溶血的樣本不適合與本試劑盒一起使用。

尿液和腦脊液

將尿液（中流）收集在無(wú)菌容器中，以20-2000rpm離心3000分鐘。取出上清液并立即測(cè)定。如果檢測(cè)到任何沉淀，請(qǐng)重復(fù)離心步驟。類似的方案可用于腦脊液。

細(xì)胞培養(yǎng)上清液

通過(guò)移液管收集細(xì)胞培養(yǎng)基，然后在 4°C 下以 20 rpm 離心 1500 分鐘。收集澄清的上清液并立即測(cè)定。

細(xì)胞裂解物

在裂解緩沖液中溶解細(xì)胞，并在冰上靜置30分鐘。以 14，000 x g 離心管 5 分鐘以去除不溶性物質(zhì)。將上清液分裝到新管中，并丟棄剩余的全細(xì)胞提取物。使用總蛋白質(zhì)測(cè)定法定量總蛋白質(zhì)濃度。立即測(cè)定或等分試樣并儲(chǔ)存在≤-20°C。

組織勻漿

組織勻漿的制備將因組織類型而異。用1X PBS沖洗組織以去除多余的血液并在20ml 1X PBS（包括蛋白酶抑制劑）中勻漿，并在≤-20°C下儲(chǔ)存過(guò)夜。 需要兩個(gè)凍融循環(huán)來(lái)破壞細(xì)胞膜。為了進(jìn)一步破壞細(xì)胞膜，您可以對(duì)樣品進(jìn)行超聲處理。在5xg下離心勻漿5000分鐘。取出上清液并立即或等分試樣測(cè)定，并儲(chǔ)存在-20°C或-80°C。

組織裂解物

用PBS沖洗組織，切成1-2毫米的碎片，并用PBS中的組織均質(zhì)器勻漿。加入等體積的含有蛋白酶抑制劑的RIPA緩沖液，并在室溫下輕輕攪拌裂解組織30分鐘。離心機(jī)清除碎屑。使用總蛋白質(zhì)測(cè)定法定量總蛋白質(zhì)濃度。立即測(cè)定或等分試樣并儲(chǔ)存在≤-20°C

母乳

收集牛奶樣品并在 10°C 下以 000，60 x g 離心 4 分鐘。 等分上清液并測(cè)定。長(zhǎng)期使用時(shí)，請(qǐng)將樣品儲(chǔ)存在-80°C。 盡量減少凍融循環(huán)。