文獻(xiàn)標(biāo)題：Anti-central fatigue effects of myelophil in 5-HTergic hyperactivity mice model

DOI：https://doi.org/10.1186/s12906-025-04882-2

研究背景

疲勞是一種常見的癥狀，可分為急性、長期和慢性疲勞。慢性疲勞對生活質(zhì)量有顯著影響，尤其是在癌癥患者和患有肌痛性腦脊髓炎/慢性疲勞綜合征（ME/CFS）的人群中。中樞疲勞與神經(jīng)肌肉功能障礙相關(guān)，主要由大腦的生化變化引起。其主要機(jī)制被認(rèn)為是大腦中5-HT和多巴胺（DA）的失衡。5-HT在大腦的多種生理和心理功能中起關(guān)鍵作用，其水平異常升高可能導(dǎo)致中樞疲勞。Myelophil是一種基于韓國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)經(jīng)驗(yàn)開發(fā)的補(bǔ)充劑，用于治療疲勞相關(guān)疾病。先前的研究已證實(shí)其在抗肌肉疲勞、抗神經(jīng)炎癥和抗氧化等方面的作用，但其對中樞疲勞的具體機(jī)制尚不清楚。

研究目的

本研究旨在通過氟西汀（一種選擇性5-HT再攝取抑制劑，SSRI）誘導(dǎo)的5-HT過度活躍小鼠模型，探討Myelophil的抗中樞疲勞效應(yīng)及其潛在機(jī)制。

研究方法

1. Myelophil的制備和標(biāo)準(zhǔn)化：通過30%乙醇提取黃芪根和丹參根，按照韓國食品藥品管理局（KFDA）的良好生產(chǎn)規(guī)范（GMP）指南生產(chǎn)Myelophil，并通過超高效液相色譜（UHPLC）和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC/MS）進(jìn)行分子指紋分析。

2. 動物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：使用9周大的雄性C57BL/6J小鼠，隨機(jī)分為5組，每組8只。分別為生理鹽水組、氟西汀組、Myelophil 100 mg/kg組、Myelophil 50 mg/kg組和陽性對照組（維生素C 100 mg/kg）。氟西汀通過腹腔注射給藥4周，同時(shí)各組分別給予相應(yīng)的口服處理。

3. 行為測試：通過巢筑測試、輪跑測試、旋轉(zhuǎn)桿測試、足底測試和曠場測試評估小鼠的疲勞相關(guān)行為、運(yùn)動能力、焦慮和疼痛敏感性。

4. 血清皮質(zhì)酮水平測定：通過ELISA試劑盒測定血清中皮質(zhì)酮水平。

5. 免疫熒光染色和西方印跡分析：用于檢測大腦中5-HT水平及相關(guān)蛋白（如5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)體、單胺氧化酶A等）的表達(dá)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1．Myelophil對疲勞相關(guān)行為的影響：氟西汀處理的小鼠表現(xiàn)出疲勞相關(guān)行為，如巢筑評分降低、輪跑測試中運(yùn)動距離和潛伏時(shí)間減少。Myelophil（100 mg/kg）顯著改善了這些疲勞相關(guān)行為，但50 mg/kg劑量的Myelophil和陽性對照組（維生素C）未觀察到顯著效果。

2．Myelophil對焦慮和疼痛敏感性的影響：氟西汀處理增加了小鼠的疼痛敏感性和焦慮行為，而Myelophil（100 mg/kg）顯著減輕了疼痛敏感性，但對焦慮行為無顯著影響。

3．Myelophil對血清皮質(zhì)酮水平的影響：氟西汀處理降低了血清皮質(zhì)酮水平，而Myelophil處理有恢復(fù)的趨勢，但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。

4．Myelophil對5-HT過度活躍的影響：免疫熒光染色顯示，氟西汀處理使小鼠腦中5-HT水平升高約1.4倍，而Myelophil（100 mg/kg）顯著降低了這種升高。此外，Myelophil還顯著調(diào)節(jié)了5-HT合成/釋放相關(guān)蛋白（如TPH2、5-HT1AR、VMAT2和MAO-A）的表達(dá)，并增加了5-HT再攝取相關(guān)蛋白（5-HTT）的表達(dá)。

5．Myelophil對BDNF活性的影響：氟西汀處理抑制了BDNF蛋白表達(dá)，而Myelophil（100 mg/kg）顯著逆轉(zhuǎn)了這種抑制，并通過調(diào)節(jié)相關(guān)分子（如TrkB、p-CREB和c-Fos）發(fā)揮作用。

在文獻(xiàn)《Anti-central fatigue effects of myelophil in 5-HTergic hyperactivity mice model》中，Corticosterone Multi-Format ELISA Kit 的主要應(yīng)用是用于測定小鼠血清中皮質(zhì)酮（Corticosterone）的水平。具體應(yīng)用如下：

評估氟西汀（Fluoxetine）處理對小鼠血清皮質(zhì)酮水平的影響，以及Myelophil干預(yù)是否能夠調(diào)節(jié)這種變化。皮質(zhì)酮是一種重要的應(yīng)激激素，其水平的變化可以反映機(jī)體的應(yīng)激狀態(tài)。

使用 Corticosterone Multi-Format ELISA Kit（貨號K014-H，Arbor Assays），通過酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術(shù)定量檢測小鼠血清中的皮質(zhì)酮水平。該試劑盒采用競爭性ELISA方法，通過特異性抗體與皮質(zhì)酮結(jié)合，利用酶促反應(yīng)產(chǎn)生的顏色變化來定量檢測皮質(zhì)酮。經(jīng)過4周的氟西汀處理，小鼠血清中皮質(zhì)酮水平顯著降低，約為正常水平的0.6倍。Myelophil（100 mg/kg）處理有恢復(fù)血清皮質(zhì)酮水平的趨勢，但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。該結(jié)果表明，氟西汀誘導(dǎo)的中樞疲勞模型中，小鼠的應(yīng)激反應(yīng)受到抑制，表現(xiàn)為血清皮質(zhì)酮水平下降。

Myelophil雖然未能顯著恢復(fù)皮質(zhì)酮水平，但其對其他疲勞相關(guān)行為和神經(jīng)生物學(xué)指標(biāo)的改善作用提示其可能通過其他機(jī)制發(fā)揮抗疲勞效應(yīng)。

試劑盒特點(diǎn)

高靈敏度：能夠檢測低至20.9 pg/mL的皮質(zhì)酮。

多格式：適用于不同樣本量的檢測，提供50 ?L和100 ?L兩種檢測格式。

適用范圍廣：可用于檢測血清、血漿、尿液、呼吸蒸汽、組織培養(yǎng)基等多種樣本類型。