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組蛋白是染色質(zhì)的核心成分,通過與DNA纏繞形成核小體結(jié)構(gòu),調(diào)控基因表達(dá)、DNA修復(fù)及染色體凝聚等關(guān)鍵生物學(xué)過程。核心組蛋白(H2A、H2B、H3、H4)的尾部可發(fā)生多種翻譯后修飾(如甲基化、乙酰化、磷酸化等),這些修飾共同構(gòu)成了“組蛋白密碼”(histone code),在表觀遺傳調(diào)控、疾病機制解析等領(lǐng)域具有深遠(yuǎn)影響。然而,傳統(tǒng)組蛋白提取方法存在操作繁瑣、耗時長、修飾狀態(tài)易破壞等問題,限制了其在復(fù)雜研究中的應(yīng)用。
組蛋白研究需兼顧高純度、完整修飾狀態(tài)及操作便捷性。傳統(tǒng)方法依賴多步離心、裂解與純化步驟,耗時長達(dá)數(shù)小時,且對細(xì)胞或組織量要求高,難以滿足大規(guī)模實驗需求。此外,修飾狀態(tài)的破壞會直接影響后續(xù)功能分析(如甲基化、乙酰化檢測)。因此,開發(fā)一種快速、高效、兼容下游應(yīng)用的組蛋白提取試劑盒成為研究熱點。

Epigentek的OP-0006,EpiQuik Total Histone Extraction Kit通過優(yōu)化緩沖液體系,實現(xiàn)60分鐘內(nèi)從哺乳動物細(xì)胞或組織中高效提取總核心組蛋白,同時保留其翻譯后修飾狀態(tài)。其核心優(yōu)勢包括:
1.操作簡便:僅需預(yù)裂解、裂解與平衡緩沖液,無需復(fù)雜純化步驟。
2.高通量適用:單次實驗可處理10?個細(xì)胞或100 mg組織,滿足大規(guī)模研究需求。
3.修飾兼容性:提取的組蛋白可直接用于Epigentek的組蛋白修飾檢測試劑盒,或用于甲基化、乙酰化、磷酸化等下游分析。
Epigentek 的OP-0006組蛋白提取試劑盒,憑借其高效、兼容與高通量特性,成為組蛋白研究領(lǐng)域的理想工具。無論是基礎(chǔ)研究還是臨床轉(zhuǎn)化,該試劑盒均能助力科學(xué)家更精準(zhǔn)地解析組蛋白修飾的生物學(xué)意義,推動表觀遺傳學(xué)研究的深入發(fā)展。
文獻(xiàn)案例:OP-0006在組蛋白修飾研究中的應(yīng)用

以2023年發(fā)表于《Asymmetric and symmetric protein arginine methylation in methionine-addicted human cancer cells》的研究為例, 該研究利用EpiQuik Total Histone Extraction Kit(貨號OP-0006)從H460和HCT116細(xì)胞中提取組蛋白,用于分析組蛋白修飾與細(xì)胞增殖的關(guān)系。實驗步驟包括:
1. 細(xì)胞裂解:250,000細(xì)胞懸液加入預(yù)裂解緩沖液,離心后重懸于裂解緩沖液中。
2. 組蛋白提取:30分鐘裂解后,離心收集上清液,沉淀物用于非組蛋白蛋白分析。
3. 電泳驗證:通過SDS-PAGE檢測組蛋白純度,結(jié)合NanoDrop 2000c測定蛋白濃度,確保實驗數(shù)據(jù)可靠性
該研究結(jié)果表明,Epigentek的組蛋白提取試劑盒(貨號OP-0006)在癌癥細(xì)胞中提取的組蛋白具有高純度,為后續(xù)組蛋白修飾分析提供了可靠基礎(chǔ)。
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