MeDIP 是一種全基因組范圍的、大規(guī)模的技術(shù)，通過使用 5 - 甲基胞嘧啶抗體分離甲基化 DNA 片段來富集甲基化 DNA。這項技術(shù)在幫助識別癌癥等疾病中異常甲基化的基因方面發(fā)揮了重要作用。借助 MeDIP，可以通過 PCR 確定免疫沉淀的甲基化 DNA 片段，以評估特定區(qū)域的甲基化狀態(tài)。此外，純化的片段可以用于高通量 DNA 檢測方法，如 DNA 微陣列（MeDIP - chip）和下一代測序（MeDIP - seq），成為一種用于甲基化組水平分析以及在全基因組范圍內(nèi)開發(fā) DNA 甲基化全面分析的有用方法。

Methylamp 甲基化 DNA 捕獲（MeDIP）試劑盒是一套經(jīng)過優(yōu)化的試劑，用于在便捷的微孔板格式中富集和捕獲甲基化 DNA 片段。該方法，即甲基化 DNA 免疫沉淀（MeDIP），使用特異性針對 5 - 甲基胞嘧啶的單克隆抗體免疫沉淀甲基化基因組 DNA。富集的甲基化片段隨后可用于全基因組范圍的基因特異性 DNA 甲基化分析。Methylamp 甲基化 DNA 捕獲試劑盒適用于將富集的甲基化 DNA 的特異性與定性和定量 PCR、傳統(tǒng)測序和下一代測序、DNA 微陣列以及 Southern 印跡相結(jié)合。

艾美捷甲基化DNA捕獲（MeDIP）試劑盒（#P-1015-24）優(yōu)勢與特點：

1、高效富集甲基化DNA：> 98%。

2、極快的操作流程，可在 3 小時內(nèi)完成。

3、條帶式微孔板格式使檢測靈活：手動或高通量。

4、包含用于 DNA 純化的柱子，節(jié)省時間并減少勞動強度。

5、與所有基于 DNA 擴增的方法兼容。

6、簡單、可靠且一致的檢測條件。

原理與操作流程：

MeDIP 最常見且關(guān)鍵的實驗因素，可能會影響其準確性，涉及在程序中使用的 5 - 甲基胞嘧啶抗體的質(zhì)量和交叉反應(yīng)性。Epigentek 通過廣泛的研究和開發(fā)克服了這一限制，通過應(yīng)用一種非交叉反應(yīng)性的 5mC 抗體，創(chuàng)建了一種高效的 MeDIP 試劑盒。在試劑盒的檢測中，DNA 被剪切，然后加入到微孔板的一個孔或多個孔中（高通量格式）。然后使用一種特異性針對甲基胞嘧啶的高質(zhì)量 ChIP/MeDIP 級抗體在孔中捕獲甲基化 DNA。抗體捕獲的甲基化 DNA 被釋放，并最終通過包含的離心柱進行純化。洗脫的甲基化 DNA 現(xiàn)在可用于各種下游應(yīng)用。

圖：使用 MCF - 7 細胞的基因組 DNA（0.5 ?g）作為起始材料，在微孔中富集甲基化 DNA。甲基化 DNA 被固定在微孔中的 5mC 抗體捕獲。

文獻引用：

Kowluru RA et. al. (April 2025). DNA methylation of long noncoding RNA cytochrome B in diabetic retinopathy. Noncoding RNA Res. 11:141-149.

Dhar S et. al. (March 2025). FOXP3 Transcriptionally Activates Fatty Acid Scavenger Receptor CD36 in Tumour-Induced Treg Cells. Immunology. 174(3):296-309.

Yang C et. al. (February 2025). The Diminution of R-Loops Generated by LncRNA DSP-AS1 Inhibits DSP Gene Transcription to Impede the Re-Epithelialization During Diabetic Wound Healing. Adv Sci (Weinh). :e2406021.