甲基基團的添加是由一類酶，即 DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶（DNMTs 或 DNA MTases）完成的。基因啟動子附近的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)也會影響 DNA 甲基化和轉(zhuǎn)錄活性。DNMT1、DNMT3A 和 DNMT3B 是建立和維持 DNA 甲基化模式所必需的。另外兩種酶，DNMT2/TRDMT1 和 DNMT3L，可能具有更專門但相關(guān)的功能。DNMT1 似乎負(fù)責(zé)維持已建立的 DNA 甲基化模式，而 DNMT3A 和 3B 似乎介導(dǎo)新或從頭開始的 DNA 甲基化模式的建立。研究表明，DNMT2/TRDMT1 可在 C38 處甲基化 tRNAAsp，而 DNMT3L 是一種催化失活的 DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶調(diào)節(jié)因子，對 DNMT3A 和 DNMT3B 的功能至關(guān)重要。癌細(xì)胞等病變細(xì)胞可能有所不同，因為單獨的 DNMT1 并非維持異常基因高甲基化所必需的，DNMT1 和 DNMT3B 可能共同承擔(dān)這一功能。

EpiQuik? DNMT（DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶）活性/抑制超敏檢測試劑盒是一套完整的經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液和試劑，使實驗者能夠在 96 孔條板上通過比色法以極快速度測量 DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶活性或抑制。該試劑盒即用型，提供了進行成功的 DNMT 活性/抑制實驗所需的所有基本成分，無需放射性或任何特殊設(shè)備。EpiQuik DNMT 活性/抑制超敏檢測試劑盒是其廣受歡迎的前代試劑盒的進一步改進，通過增強樣本信號和顯著降低背景信號，靈敏度提高了五倍。

艾美捷EpiQuik DNMT活性/抑制測定超試劑盒（比色法）（#P-3009-48）優(yōu)勢與特點：

1、比色法檢測，操作步驟簡便，方便快捷。整個操作流程可在 3 小時 45 分鐘內(nèi)完成。

2、安全創(chuàng)新的比色法檢測，無需放射性、萃取和色譜法。

3、超靈敏檢測限可低至 0.5 ?g 核提取物或 0.5 ng 純化酶，比前代試劑盒提高了五倍。

4、優(yōu)化的抗體和增強溶液對 5 - mC 具有高特異性，對未甲基化的胞嘧啶無交叉反應(yīng)。

5、條帶式微孔板格式適用于低通量或高通量分析。

6、EpiQuik 核提取試劑盒也已針對該試劑盒進行了優(yōu)化。

EpiQuik DNMT 活性與抑制比色法檢測：

(a) 使用重組 DNMT1 與 EpiQuik DNMT 活性/抑制超敏檢測試劑盒（比色法）實現(xiàn)高靈敏度和特異性。

(b) 使用核提取物與 EpiQuik DNMT 活性/抑制超敏檢測試劑盒（比色法）實現(xiàn)高靈敏度和特異性。核提取物是使用 EpiQuik 核提取試劑盒（產(chǎn)品編號 OP-0002）從 MCF-7 細(xì)胞中制備的。

文獻引用：

Rahman MM et. al. (December 2024). Combinatorial phenethyl isothiocyanate and withaferin A targets multiple epigenetics pathways to inhibit MCF-7 and MDA-MB-231 human breast cancer cells. Cancer Cell Int. 24(1):422.

Yung WS et. al. (November 2024). DNA Hypomethylation Is One of the Epigenetic Mechanisms Involved in Salt-Stress Priming in Soybean Seedlings. Plant Cell Environ.

Negi CK et. al. (September 2024). Triphenyl Phosphate Alters Methyltransferase Expression and Induces Genome-Wide Aberrant DNA Methylation in Zebrafish Larvae. Chem Res Toxicol. 37(9):1549-1561.