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組蛋白修飾也被定義為表觀遺傳修飾因子。組蛋白的翻譯后修飾包括:組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HATs)對(duì)特定賴氨酸殘基的乙酰化、組蛋白去乙酰化酶(HDACs)介導(dǎo)的去乙酰化、組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMTs)對(duì)賴氨酸和精氨酸殘基的甲基化、組蛋白去甲基化酶(HDMTs)對(duì)賴氨酸殘基的去甲基化以及組蛋白激酶(HKs)對(duì)特定絲氨酸殘基的磷酸化。除了 DNA 甲基化外,組蛋白乙酰化和組蛋白甲基化是最為人們熟知的表觀遺傳標(biāo)記。一般來說,組蛋白 H3 上的 H3-K4、H3-K36 或 H3-K79 位點(diǎn)的三甲基化會(huì)導(dǎo)致染色質(zhì)結(jié)構(gòu)處于開放狀態(tài),因此是常染色質(zhì)的特征。常染色質(zhì)還以高水平的組蛋白乙酰化為特征,這一過程由組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)。相反,組蛋白去乙酰化酶能夠去除這一表觀遺傳標(biāo)記,從而導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄抑制。賴氨酸殘基可以發(fā)生單甲基化、雙甲基化或三甲基化,每種修飾都能以不同的方式調(diào)節(jié)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和轉(zhuǎn)錄。除了其他組蛋白修飾(如磷酸化)外,這種巨大的變異導(dǎo)致了不同修飾之間存在無數(shù)種可能的組合。這或許構(gòu)成了一個(gè)“組蛋白密碼”,不同的細(xì)胞因子可以對(duì)其進(jìn)行解讀和詮釋。
Pre-Sure? 組蛋白 H3 肽陣列 ELISA 試劑盒(比色法) 是一套經(jīng)過優(yōu)化的試劑組合,專門用于快速檢測(cè)針對(duì) 46 種不同組蛋白修飾的抗體的特異性和選擇性。該試劑盒采用標(biāo)準(zhǔn)微孔板讀取器,以簡(jiǎn)單的 ELISA 格式進(jìn)行操作。它還適用于鑒定組蛋白修飾酶的底物以及分析組蛋白結(jié)合蛋白的特異性。
艾美捷預(yù)包被組蛋白H3肽陣列ELISA試劑盒(比色法)(#P-3104-96)優(yōu)勢(shì)與特點(diǎn):
快速高效:整個(gè)過程僅需 1 小時(shí) 45 分鐘。
高質(zhì)量肽段:肽段純度超過 95%,經(jīng) HPLC 純化并經(jīng)質(zhì)譜驗(yàn)證,然后以兩種濃度(2 ng 和 20 ng)包被,可同時(shí)篩選強(qiáng)反應(yīng)和弱反應(yīng)的抗體、酶和組蛋白結(jié)合蛋白。
最全面的組蛋白 H3 修飾種類:包含 46 種單一修飾,涵蓋最重要的甲基化(36 種)、乙酰化(8 種)和磷酸化(2 種)修飾。
以 ELISA 格式進(jìn)行檢測(cè),使檢測(cè)過程簡(jiǎn)便易行。
簡(jiǎn)單、可靠且一致的檢測(cè)條件。

圖:組蛋白 H3 抗體的代表性特異性鑒定。組蛋白 H3 陣列用 H3K9me1 多克隆抗體(產(chǎn)品編號(hào):A-4034;1 ?g/mL)進(jìn)行探針檢測(cè)。肽段和對(duì)照用山羊抗兔 IgG-HRP 和顯色系統(tǒng)進(jìn)行可視化。A:原始圖像;B:H3K9me1 抗體特異性和結(jié)合強(qiáng)度的圖形分析。
原理與流程:
在該試劑盒的檢測(cè)中,通過生物素 鏈霉親和素結(jié)合緊密排列在孔中的特定位點(diǎn)修飾的組蛋白 H3 蛋白與抗體、蛋白或酶等輸入材料共同孵育。孵育后,通過 ELISA 反應(yīng)系統(tǒng)(抗體 信號(hào)顯色試劑)檢測(cè)特異性結(jié)合的輸入材料。輸入材料的結(jié)合強(qiáng)度與吸光度強(qiáng)度成正比。
起始材料:
對(duì)于抗體篩選,輸入材料為各種感興趣的 IgG 抗體。對(duì)于組蛋白修飾酶 / 蛋白篩選,應(yīng)使用純化的酶 / 蛋白。輸入材料的用量或濃度取決于檢測(cè)類型,可由用戶自行確定。
文獻(xiàn)引用:
Tomooka F et. al. (February 2023). Sulforaphane Potentiates Gemcitabine-Mediated Anti-Cancer Effects against Intrahepatic Cholangiocarcinoma by Inhibiting HDAC Activity. Cells. 12(5)
Mathison A et. al. (February 2020). Discovery, expression, cellular localization, and molecular properties of a novel, alternative spliced HP1γ isoform, lacking the chromoshadow domain. PLoS One. 15(2):e0217452.
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