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基因的表觀遺傳激活或失活在許多重要的人類(lèi)疾病中,尤其是在癌癥中,扮演著關(guān)鍵角色。
表觀遺傳基因失活的主要機(jī)制是由于 DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶引起的基因組 DNA 中 CpG 島的甲基化。組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMTs)通過(guò)染色質(zhì)依賴(lài)的轉(zhuǎn)錄抑制或激活來(lái)控制或調(diào)節(jié) DNA 甲基化。HMTs 將 1-3 個(gè)甲基基團(tuán)從 S-腺苷 - L - 甲硫氨酸轉(zhuǎn)移到組蛋白的賴(lài)氨酸和精氨酸殘基上。EZH1 和 G9a 是主要的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶,它們催化哺乳動(dòng)物細(xì)胞中組蛋白 H3 在賴(lài)氨酸 27(H3K27)處的單甲基化。JHDM1D 是主要的組蛋白去甲基化酶,負(fù)責(zé)去甲基化 H3K27me1。單甲基 H3K27(H3K27me1)一直被視為轉(zhuǎn)錄激活基因的標(biāo)志性標(biāo)記,它僅位于啟動(dòng)子下游的 5' 區(qū)域。H3K27me1 也可以通過(guò)抑制或激活 HMTs 來(lái)改變。在血漿或血清中觀察到并被證實(shí)為許多不同疾病或病理變化(如癌癥進(jìn)展)的標(biāo)記物的循環(huán)組蛋白 H3K27me1。因此,檢測(cè)循環(huán) H3K27me1 將為更好地理解基因激活和沉默的表觀遺傳調(diào)控、與組蛋白修飾相關(guān)的病理過(guò)程、疾病相關(guān)生物標(biāo)志物的篩選以及開(kāi)發(fā)針對(duì)組蛋白修飾的藥物提供有用的信息。
EpiQuik? 循環(huán)單甲基組蛋白 H3K27 ELISA 試劑盒(比色法)是一套便捷的工具包,允許實(shí)驗(yàn)者從人類(lèi)、小鼠或大鼠的生物液體樣本(如血漿和血清)中特異性地測(cè)量循環(huán)單甲基組蛋白 H3K27(H3K27me1)。
艾美捷EpiQuik循環(huán)單甲基組蛋白H3K27 ELISA試劑盒(比色法)(#P-3120-48)優(yōu)勢(shì)與特點(diǎn):
快速高效的實(shí)驗(yàn)流程,可在 2.5 小時(shí)內(nèi)完成。
高靈敏度和特異性。檢測(cè)限低至 0.5 ng/孔,血漿/血清在指定量范圍內(nèi)(1-20 ng/孔)的動(dòng)態(tài)范圍。僅識(shí)別 H3K27me1,與未修飾的 H3 或同一賴(lài)氨酸位點(diǎn)的其他修飾無(wú)交叉反應(yīng)。
方便地包含對(duì)照,用于 H3K27me1 的定量。
條帶微孔板格式使實(shí)驗(yàn)具有靈活性:可手動(dòng)或高通量操作。
簡(jiǎn)單、可靠且一致的實(shí)驗(yàn)條件。

圖:使用 EpiQuik? 總組蛋白提取試劑盒(Cat. #OP0006)從 HL-60 細(xì)胞中提取組蛋白,并將其以不同濃度摻入牛血漿中。使用 EpiQuik? 循環(huán)單甲基組蛋白 H3K27 ELISA 試劑盒(比色法)測(cè)定 H3K27me1 的含量。
原理與實(shí)驗(yàn)流程:
該試劑盒用于測(cè)量血漿或血清中的總 H3K27me1。使用該試劑盒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),血漿/血清樣本中 K27 位點(diǎn)單甲基化的組蛋白 H3 蛋白被固定在涂有抗 H3K27me1 抗體的條帶孔中。捕獲的 H3K27me1 蛋白隨后可被檢測(cè)抗體識(shí)別,再通過(guò)顯色試劑進(jìn)行顯色。H3K27me1 的比例與吸光度強(qiáng)度成正比。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照比較,可以定量測(cè)定 H3K27me1 的絕對(duì)量。
起始材料:
起始材料應(yīng)為血漿或血清。每次實(shí)驗(yàn)的血漿或血清用量為 10 至 40 ?L,最佳用量為 30 ?L。
使用 EpiQuik? 總組蛋白提取試劑盒(Cat. #OP0006)從 HL-60 細(xì)胞中提取組蛋白,并將其以不同濃度摻入牛血漿中。使用 EpiQuik? 循環(huán)單甲基組蛋白 H3K27 ELISA 試劑盒(比色法)測(cè)定 H3K27me1 的含量。
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