Epigenase? APOBEC3A活性/抑制檢測(cè)試劑盒是一種完整的優(yōu)化緩沖液和試劑套裝，用于測(cè)量人類及其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞提取物或純化的APOBEC3A酶的活性/抑制。該試劑盒可用于多種形式的樣本，包括但不限于培養(yǎng)細(xì)胞、新鮮和冷凍組織。

艾美捷Epigentek-表觀基因酶APOBEC 3A活性/抑制測(cè)定試劑盒（#P-3142-48）具有以下優(yōu)勢(shì)：

比色法檢測(cè)，操作步驟簡(jiǎn)單，可在5小時(shí)內(nèi)完成。

創(chuàng)新的試劑盒組成使得背景信號(hào)極低，使得檢測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、可靠且一致。

可使用細(xì)胞/組織提取物以及純化的APOBEC3A酶來(lái)檢測(cè)體內(nèi)和體外的APOBEC3A抑制劑效果。

新穎的檢測(cè)原理實(shí)現(xiàn)了高靈敏度，純化APOBEC3A酶的檢測(cè)下限低至10納克。

試劑盒包含檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品，用于定量APOBEC3A的特異性活性。

采用條帶式微孔板格式，適用于手動(dòng)或高通量分析。

原理與操作：

該試劑盒專為檢測(cè)APOBEC3A活性/抑制而設(shè)計(jì)。在使用該試劑盒的檢測(cè)中，獨(dú)特的5mC（5-甲基胞嘧啶）底物被穩(wěn)定地包被在條帶孔中。活性的APOBEC3A能夠結(jié)合并催化底物中的5mC轉(zhuǎn)化為T（胸腺嘧啶）。未轉(zhuǎn)化的5mC可以通過(guò)高親和力的5mC抗體識(shí)別，并通過(guò)增強(qiáng)液增強(qiáng)免疫信號(hào)。未轉(zhuǎn)化的5mC的比例或量與酶活性成反比，可通過(guò)類似ELISA的比色反應(yīng)進(jìn)行定量。

左圖：使用Epigenase? APOBEC3A活性/抑制檢測(cè)試劑盒檢測(cè)重組APOBEC3A的活性。不同濃度的重組人APOBEC3A酶被加入檢測(cè)體系中。吸光度（OD）與APOBEC3A酶活性成反比。右圖：將圖4中顯示的原始OD數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后的結(jié)果。

起始材料 ：

輸入材料可以是細(xì)胞提取物或純化的APOBEC3A酶。每次檢測(cè)所需的細(xì)胞提取物量為2微克至30微克，最佳范圍為15-20微克。純化酶的用量為10納克至1微克，最佳范圍為50納克至200納克，具體取決于酶的類型、純度和催化活性。

運(yùn)輸與儲(chǔ)存：

該試劑盒分兩部分運(yùn)輸：第一部分在常溫下運(yùn)輸，第二部分在4℃下使用冷凍冰袋運(yùn)輸。收到試劑盒后：（1）將A3AS、AAS、DA和ES置于-20℃避光保存；（2）將WB、A3AB、CA、DS和8孔檢測(cè)條置于4℃避光保存；（3）將剩余組分（BS和SS）在室溫下避光保存。  

注意：使用前檢查10倍洗滌緩沖液（WB）是否含有鹽沉淀。如有沉淀，可在室溫或37℃下加熱并搖晃緩沖液，直至鹽重新溶解。  

如果儲(chǔ)存得當(dāng)，試劑盒的所有組分自發(fā)貨之日起有效期為6個(gè)月。