N6-甲基腺苷（m6A）是真核生物中存在的RNA分子中非常常見和豐富的修飾。m6A修飾由甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物METTL3催化，并被最近發(fā)現(xiàn)的m6A RNA去甲基化酶FTO和ALKBH5去除，后者以α-酮戊二酸（α-KG）和Fe6+依賴性方式催化m2A去甲基化。結(jié)果表明，METTL3，F(xiàn)TO和ALKBH5在許多生物過程中起重要作用，從發(fā)育和代謝到生育。m6A占所有RNA堿基甲基化的80%以上，存在于各種物種中。m6A主要分布在mRNA中，也存在于tRNA、rRNA和snRNA等非編碼RNA中。mRNA轉(zhuǎn)錄本中m6A的相對豐度已被證明會影響RNA代謝過程，如剪接，核輸出，翻譯能力和穩(wěn)定性以及RNA轉(zhuǎn)錄。由m6A RNA甲基化酶和去甲基化酶缺陷引起的異常m6A甲基化水平可能導(dǎo)致RNA功能障礙和疾病。例如，由于FTO突變患者的FTO活性增加，通過尚未確定的途徑，靶mRNA中m6A水平異常低，導(dǎo)致肥胖和相關(guān)疾病的發(fā)作。RNA中動態(tài)和可逆的化學(xué)m6A修飾也可能作為一種具有深遠(yuǎn)生物學(xué)意義的新型表觀遺傳標(biāo)記。因此，更多有用的信息可以更好地了解m6A RNA甲基化水平和RNA轉(zhuǎn)錄本上的分布，可能有益于疾病的診斷和治療。

Epigentek EpiQuik m6A RNA甲基化定量試劑盒（比色法）艾美捷代理是一種先進(jìn)的m6A ELISA解決方案，提供一套全面的優(yōu)化緩沖液和試劑，用于比色定量RNA中的N6-甲基腺苷（m6A或6mA）。它適用于使用從任何物種（如哺乳動物、植物、真菌、細(xì)菌和病毒）分離的總 RNA 直接檢測 m6A RNA 甲基化狀態(tài)。

將m6A標(biāo)準(zhǔn)對照品以不同濃度加入測定孔中，然后使用EpiQuik m?A RNA甲基化定量試劑盒(比色法)(#P-9005-48)測量。

Epigentek為表觀遺傳學(xué)方面的研究和新藥研發(fā)提供全面系統(tǒng)的解決方案。2019年，Epigentek榮獲“Bioz Rising Star TM ”,被評為2019表觀遺傳學(xué)領(lǐng)域的新星公司。

Epigentek EpiQuik m6A RNA甲基化定量試劑盒（比色法）七大特點：

使用 m6A 抗體的比色 ELISA 樣測定，步驟易于遵循，方便快捷。整個過程可以在3小時45分鐘內(nèi)完成。

靈敏度高，其中檢測限可低至10 pg的m6A。

獨特的結(jié)合溶液允許RNA >70 nts與孔緊密結(jié)合，從而能夠定量來自mRNA和ncRNA（如tRNA，rRNA和snRNA）的m6A。

優(yōu)化的抗體和增強(qiáng)劑溶液可對m6A具有高特異性，在樣品RNA的指定濃度范圍內(nèi)與未甲基化腺苷無交叉反應(yīng)性。

包括通用陽性和陰性對照，適用于定量任何物種的m6A。

條孔微孔板形式使該分析靈活，可用于手動或高通量分析。

簡單、可靠且一致的檢測條件。

原則與程序：

在該測定中，總RNA與使用RNA高結(jié)合溶液剝離孔結(jié)合。N6-甲基腺苷（m6A）使用特異性捕獲N6-甲基腺苷抗體和檢測抗體進(jìn)行檢測。檢測的信號得到增強(qiáng)，然后通過在微孔板分光光度計中讀取波長為450nm的吸光度來比色定量。m6A的量與測量的OD強(qiáng)度成正比。該試劑盒中提供陰性和陽性RNA對照。可以執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)曲線（范圍：0.02至1 ng的m6A）或可以使用單個量的m6A作為陽性對照。由于m6A含量可能因組織而異，也因正常和患病狀態(tài)而異，或者在治療和未處理的條件下會有所不同，因此建議運行重復(fù)樣品以確保生成的信號得到驗證。該試劑盒將允許用戶量化m6A的絕對量，并確定兩種不同RNA樣品的相對m6A RNA甲基化狀態(tài)。

Epigentek EpiQuik m6A RNA甲基化定量試劑盒（比色法）部分文獻(xiàn)：

Yao F et. al. (March 2024). The m(6)A regulator KIAA1429 stabilizes RAB27B mRNA and promotes the progression of chronic myeloid leukemia and resistance to targeted therapy. Genes Dis. 11(2):993-1008.

Huang L et. al. (December 2023). WTAP regulates autophagy in colon cancer cells by inhibiting FLNA through N6-methyladenosine. Cell Adh Migr. 17(1):1-13.

Huang T et. al. (December 2023). Comprehensive analysis of m(6)A methylomes in idiopathic pulmonary arterial hypertension. Epigenetics. 18(1):2242225.

艾美捷科技是Epigentek的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。