在表觀遺傳學(xué)快速發(fā)展的今天，RNA修飾研究正成為新的前沿領(lǐng)域。其中，N6-甲基腺嘌呤（m6A）作為真核生物中最普遍存在的RNA修飾形式，其精準(zhǔn)檢測(cè)和定位對(duì)理解基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制具有重要意義。EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集（MeRIP）試劑盒貨號(hào)：P-9018在這一背景下應(yīng)運(yùn)而生，以其創(chuàng)新的技術(shù)設(shè)計(jì)和優(yōu)越的性能表現(xiàn)，為研究人員提供了高效可靠的m6A研究解決方案。

Epigentek集團(tuán)公司是創(chuàng)新技術(shù)和表觀遺傳學(xué)相關(guān)研究產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)商和供應(yīng)商。公司開(kāi)發(fā)了包括400多個(gè)專利產(chǎn)品的全面的產(chǎn)品組合，為表觀遺傳學(xué)方面的研究和新藥研發(fā)提供全面系統(tǒng)的解決方案。各界備受推崇的學(xué)者、制藥企業(yè)以及先進(jìn)的生物技術(shù)公司都在使用Epigentek產(chǎn)品。相比普通方法的產(chǎn)品而言，這些獨(dú)特的產(chǎn)品在科研分析過(guò)程中更簡(jiǎn)單、更快捷、更方便、更有效。

技術(shù)原理與創(chuàng)新特點(diǎn)

該試劑盒采用創(chuàng)新的比色法檢測(cè)原理，基于ELISA-like的實(shí)驗(yàn)方案，通過(guò)特異性m6A抗體實(shí)現(xiàn)對(duì)RNA中m6A修飾的精準(zhǔn)定量。其技術(shù)流程包括：首先利用特殊的高結(jié)合性結(jié)合溶液將大于70個(gè)核苷酸的RNA片段牢固地結(jié)合在微孔板上；隨后使用特異性m6A捕獲抗體和檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別反應(yīng)；最后通過(guò)信號(hào)增強(qiáng)系統(tǒng)，在450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行吸光度檢測(cè)。整個(gè)檢測(cè)過(guò)程僅需3小時(shí)45分鐘即可完成，大大提高了實(shí)驗(yàn)效率。

N6-甲基腺苷（m6A）多克隆抗體Epigenase m6A去甲基化酶活性/抑制檢測(cè)試劑盒（比色法）甲基閃尿液N6-甲基腺苷（m6A）定量試劑盒（比色法）Epigenase m6A甲基轉(zhuǎn)移酶活性/抑制檢測(cè)試劑盒（比色法）

技術(shù)原理的革命性突破

該試劑盒基于CUT&RUN（Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease）技術(shù)原理，這一方法相較于傳統(tǒng)的ChIP技術(shù)具有顯著優(yōu)勢(shì)。其核心創(chuàng)新在于利用RNA切割酶混合物同時(shí)實(shí)現(xiàn)RNA片段化和去除目標(biāo)m6A序列兩端的非特異性RNA序列，而不影響抗體結(jié)合的RNA區(qū)域。這種獨(dú)特的工作機(jī)制確保了只有與抗m6A抗體結(jié)合的短RNA片段被保留，從而大幅降低了非特異性背景。

實(shí)驗(yàn)流程經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化：首先通過(guò)磁珠結(jié)合的m6A捕獲抗體對(duì)目標(biāo)m6A片段進(jìn)行下拉富集，隨后釋放并純化富集的RNA。整個(gè)過(guò)程在同一試管中完成，最大限度地保護(hù)了目標(biāo)m6A區(qū)域并減少了樣品損失。從RNA到富集m6A RNA的整個(gè)流程僅需約2.5小時(shí)，其中手動(dòng)操作時(shí)間不足30分鐘，極大地提高了實(shí)驗(yàn)效率。

優(yōu)質(zhì)的性能特點(diǎn)

該試劑盒展現(xiàn)出多項(xiàng)突破性的技術(shù)優(yōu)勢(shì)：

高富集效率：通過(guò)特異性切割非目標(biāo)區(qū)域，試劑盒能夠?qū)崿F(xiàn)真正的m6A富集區(qū)域識(shí)別，獲得高分辨率定位結(jié)果。這種精準(zhǔn)的富集能力使得在測(cè)序分析時(shí)僅需少于1000萬(wàn)讀長(zhǎng)即可獲得可靠數(shù)據(jù)，顯著降低了測(cè)序成本和分析負(fù)擔(dān)。

低起始量要求：優(yōu)化的單管操作流程使RNA起始量可低至500ng，這為臨床樣本和珍貴樣品的研究提供了可能。建議的最佳使用量為10μg總RNA，但即使在低至1μg的輸入量下仍能獲得可靠結(jié)果。

優(yōu)質(zhì)的適用性：試劑盒適用于各種來(lái)源的RNA樣品，包括從培養(yǎng)細(xì)胞、新鮮或冷凍組織、石蠟包埋組織、血液和體液樣本等分離的RNA。這種廣泛的適用性使其成為多學(xué)科研究的理想工具。

便捷的操作體驗(yàn)：試劑盒包含m6A序列捕獲各步驟所需的所有組分，非免疫IgG對(duì)照和m6A陽(yáng)性對(duì)照的配置，方便用戶驗(yàn)證試劑盒效能和實(shí)驗(yàn)性能。

m6A的生物學(xué)意義與研究?jī)r(jià)值

m6A修飾占所有RNA堿基甲基化的80%以上，主要分布在mRNA中，同時(shí)也存在于tRNA、rRNA和snRNA等非編碼RNA中。這種動(dòng)態(tài)可逆的修飾由甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物METTL3催化形成，并可由去甲基化酶FTO和ALKBH5以α-酮戊二酸和Fe2+依賴的方式去除。

研究表明，m6A修飾通過(guò)影響RNA的剪接、核輸出、翻譯能力和穩(wěn)定性等多個(gè)代謝過(guò)程，在發(fā)育、代謝、生殖等生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。異常的m6A甲基化水平與多種疾病密切相關(guān)，例如FTO突變導(dǎo)致的m6A水平異常降低與肥胖及相關(guān)疾病的發(fā)生有關(guān)。因此，對(duì)m6A水平和分布的深入研究將為疾病診斷和治療提供重要線索。

技術(shù)應(yīng)用與發(fā)展前景

該試劑盒富集的RNA特別適用于構(gòu)建非條形碼（單重）和條形碼（多重）文庫(kù)，能夠以較小的偏差和高分辨率繪制m6A區(qū)域。這一特性使其在以下研究領(lǐng)域具有廣闊應(yīng)用前景：

基礎(chǔ)機(jī)制研究：通過(guò)Illumina平臺(tái)或其他方法的下一代測(cè)序，研究人員能夠在全轉(zhuǎn)錄組范圍內(nèi)繪制m6A修飾圖譜，深入探索m6A在特定生物學(xué)過(guò)程中的調(diào)控機(jī)制。

疾病標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)：m6A作為一種新型表觀遺傳標(biāo)記，其異常修飾與多種疾病狀態(tài)相關(guān)。該技術(shù)為發(fā)現(xiàn)新的疾病診斷標(biāo)志物提供了有力工具。

藥物研發(fā)：通過(guò)研究藥物處理前后m6A修飾的變化，可以評(píng)估藥物對(duì)表觀轉(zhuǎn)錄組的調(diào)控作用，為新藥開(kāi)發(fā)提供重要依據(jù)。

臨床轉(zhuǎn)化研究：低起始量的特點(diǎn)使其能夠應(yīng)用于臨床樣本分析，為精準(zhǔn)醫(yī)療提供技術(shù)支持。

操作流程的優(yōu)化創(chuàng)新

試劑盒的操作流程經(jīng)過(guò)精心設(shè)計(jì)和優(yōu)化。獨(dú)特的RNA切割步驟確保只有抗體保護(hù)的m6A區(qū)域得以保留，這種靶向富集策略顯著提高了檢測(cè)的特異性和靈敏度。磁珠分離技術(shù)的應(yīng)用使得操作更加簡(jiǎn)便可靠，同時(shí)減少了交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。

試劑盒提供的質(zhì)控系統(tǒng)包括非免疫IgG對(duì)照和m6A陽(yáng)性對(duì)照，這些對(duì)照的設(shè)置確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性。用戶可以在富集RNA定量或生物分析儀檢測(cè)步驟中驗(yàn)證試劑盒的性能表現(xiàn)。

技術(shù)優(yōu)勢(shì)與市場(chǎng)定位

相比于傳統(tǒng)的MeRIP方法，EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集試劑盒在多個(gè)方面展現(xiàn)出明顯優(yōu)勢(shì)。其更高的富集效率、更低的起始量要求、更短的實(shí)驗(yàn)時(shí)間和更簡(jiǎn)便的操作流程，使其成為當(dāng)前m6A研究領(lǐng)域的前沿工具。

該試劑盒的成功開(kāi)發(fā)標(biāo)志著m6A研究進(jìn)入了新的階段。其技術(shù)創(chuàng)新不僅解決了傳統(tǒng)方法存在的背景高、分辨率低、所需樣本量大等問(wèn)題，更重要的是為表觀轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究提供了更加可靠和高效的技術(shù)平臺(tái)。

隨著單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)和空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)的發(fā)展，對(duì)低起始量樣品中m6A修飾的研究需求日益增長(zhǎng)。EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集試劑盒的技術(shù)特點(diǎn)正好滿足這一發(fā)展趨勢(shì)，有望在未來(lái)幾年內(nèi)成為表觀轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究的標(biāo)準(zhǔn)方法之一。

相關(guān)產(chǎn)品
RNA甲基化定量分析

P-9003 Methylamp RNA重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化試劑盒

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DNA分離與純化

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PCR分析

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DNA文庫(kù)制備

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P-1053 EpiNext超靈敏DNA文庫(kù)制備試劑盒（Illumina平臺(tái)）

NGS條形碼

P-1060 EpiNext NGS條形碼（索引）套裝-12

作為Epigentek 的獨(dú)家代理，艾美捷科技為中國(guó)客戶提供包括DNA甲基化研究工具、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析、組蛋白甲基化研究、乙酰化與去乙酰化分析、DNA損傷與修補(bǔ)、組蛋白磷酸化、蛋白泛素化等系列研究試劑盒和抗體產(chǎn)品等全系列解決方案。