在生命科學(xué)領(lǐng)域，病毒載體技術(shù)是基因治療、功能研究和細(xì)胞轉(zhuǎn)染的重要工具。然而，病毒的高效濃縮、穩(wěn)定凍存以及在多次凍融循環(huán)中的活性保持，一直是研究人員面臨的挑戰(zhàn)。System Biosciences（SBI）推出的 PEG-it? 技術(shù)，正是為了解決這些問題而設(shè)計(jì)的創(chuàng)新解決方案。

產(chǎn)品概述

PEG-it 是一種革命性的病毒濃縮與凍存技術(shù)，專為慢病毒的高效處理而設(shè)計(jì)。它不僅能夠?qū)⒉《緷饪s 100 倍，還能在濃縮過程中起到保護(hù)作用，使病毒在長期儲存和多次凍融循環(huán)中保持高活性。該技術(shù)無需超速離心，操作簡便、成本低，且對細(xì)胞無毒性，不會干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品優(yōu)勢

1. 高效濃縮：PEG-it 能夠?qū)⒉《緷饪s 100 倍，顯著提高轉(zhuǎn)染效率，減少實(shí)驗(yàn)所需病毒量，從而節(jié)省時間和成本。

圖1：PEG-it能將病毒顆粒濃縮10到100倍。使用PEG-it，病毒顆粒可以濃縮到100倍，導(dǎo)致每毫升感染單位高得多。

2. 無細(xì)胞毒性：PEG-it 對細(xì)胞無毒性，不會影響細(xì)胞功能或后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，適用于多種細(xì)胞類型。

圖2：PEG-it是無毒的，對干細(xì)胞有效。PEG -it處理的病毒對干細(xì)胞無毒，并導(dǎo)致高效的轉(zhuǎn)導(dǎo)。方法：用含有CMV、mOCT4或mNANOG特異性啟動子的pGreenZeo報告細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)H9 hES細(xì)胞。細(xì)胞在含有1ug/mL Zeocin的MEF條件培養(yǎng)基上，在matrigel包被板上培養(yǎng)8周。圖中所示的細(xì)胞被分裂并在MEF飼養(yǎng)層上生長4天。數(shù)據(jù)由Timothy Kamp博士和Chad H. Koonce博士提供，威斯康星大學(xué)麥迪遜分校，干細(xì)胞和再生醫(yī)學(xué)中心。

3. 穩(wěn)定凍存：PEG-it 在濃縮過程中同時起到凍存保護(hù)作用，使病毒在冷凍條件下長期保存，且在多次凍融循環(huán)中仍能保持高活性。

圖3：PEG-it保護(hù)分離的病毒顆粒免受反復(fù)凍融的影響。用PEG-it濃縮的慢病毒即使經(jīng)過四次凍融循環(huán)也能保持高滴度。HepG2細(xì)胞（左表組）和HT1080細(xì)胞（右表組）經(jīng)1 ~ 4個凍融循環(huán)后用LV605VA-1轉(zhuǎn)導(dǎo)。即使在第四次解凍后，LV605VA-1病毒顆粒也顯示出強(qiáng)大的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。

圖4：病毒滴度的定量測量支持從成像數(shù)據(jù)得出的結(jié)論，即PEG-it具有低溫保護(hù)作用。使用Global UltraRapid 慢病毒滴度試劑盒(貨號 LV961A-1)，裂解圖3中的細(xì)胞。使用PEG-it濃縮的病毒顆粒未發(fā)現(xiàn)因反復(fù)凍融而導(dǎo)致IFUs（病毒顆粒）的顯著損失。

4. 無需超速離心：與傳統(tǒng)方法相比，PEG-it 簡化了操作流程，避免了超速離心的復(fù)雜性和時間消耗。

5. 兼容性強(qiáng)：PEG-it 與 SBI 的 TransDux 轉(zhuǎn)染試劑配合使用，進(jìn)一步提升轉(zhuǎn)染效率，減少對細(xì)胞的毒性影響。

6. 廣泛文獻(xiàn)支持：PEG-it 已被數(shù)百篇高影響力論文引用，SBI 的慢病毒技術(shù)在行業(yè)內(nèi)享有極高的聲譽(yù)。

Cordes KR, Sheehy NT, White MP, Berry EC, Morton SU, Muth AN, Lee TH, Miano JM, Ivey KN, Srivastava D. miR-145 and miR-143 regulate smooth muscle cell fate and plasticity. Nature.

Katey J. Rayner, Yajaira Suárez, Alberto Dávalos, Saj Parathath, Michael L. Fitzgerald, Norimasa Tamehiro, Edward A. Fisher, Kathryn J. Moore, Carlos Fernández-Hernando. miR-33 Contributes to the Regulation of Cholesterol Homeostasis. Science. 2010 Jun 18;328(5985):1570-3.

Verma R, Su S, McCrann DJ, Green JM, Leu K, Young PR, Schatz PJ, Silva JC, Stokes MP, Wojchowski DM. RHEX, a novel regulator of human erythroid progenitor cell expansion and erythroblast

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產(chǎn)品用途

1. 基因功能研究  

PEG-it 適用于多種細(xì)胞系的基因敲除、過表達(dá)或報告基因檢測，如 astrocytes、neuroprogenitor cells、hepatocytes 等。例如，研究人員可以使用 PEG-it 濃縮病毒，并將其用于 GFP 或 RFP 報告基因的表達(dá)研究。

2. 病毒載體生產(chǎn)與包裝  

SBI 提供定制化的慢病毒包裝服務(wù)，支持多種表達(dá)載體（如 MSCV、T2A 等）的構(gòu)建與應(yīng)用。PEG-it 與 TransDux 結(jié)合使用，可實(shí)現(xiàn)病毒的高效濃縮與穩(wěn)定凍存。

3. 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇  

在細(xì)胞凍存與復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)中，PEG-it 保護(hù)病毒免受凍融損傷，確保病毒在多次凍融后仍能保持高感染性。例如，HT1080 或 HepG2 細(xì)胞在多次凍融后仍能高效表達(dá) GFP 和 RFP 報告基因。

4. 高通量實(shí)驗(yàn)與大規(guī)模生產(chǎn)  

PEG-it 的高效性使其適用于大規(guī)模實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)，減少病毒制備時間，提高實(shí)驗(yàn)重復(fù)性與一致性。

應(yīng)用場景案例

-神經(jīng)科學(xué)：用于研究神經(jīng)前體細(xì)胞的分化與功能，如 astrocyte 分化、神經(jīng)元自更新等。

-心血管研究：用于動脈壁細(xì)胞的基因調(diào)控研究，如 miR-33 對膽固醇穩(wěn)態(tài)的影響。

-腫瘤研究：用于肝癌細(xì)胞（HepG2）或成纖維細(xì)胞（HT1080）的基因功能研究。

-干細(xì)胞研究：用于 CNS 干細(xì)胞的分化與命運(yùn)決定研究。

技術(shù)優(yōu)勢總結(jié)

在生命科學(xué)研究中，高效、穩(wěn)定、低成本的病毒處理技術(shù)是推動科研進(jìn)步的關(guān)鍵。SBI 的 PEG-it 技術(shù)不僅解決了病毒濃縮與凍存的難題，還為研究人員提供了更高效、更可靠的實(shí)驗(yàn)工具。無論您是從事基因功能研究、病毒載體開發(fā)，還是細(xì)胞凍存與復(fù)蘇，PEG-it 都是您不可或缺的科研伙伴。