PKH26是一種膜標(biāo)記探針，結(jié)構(gòu)上帶有一長(zhǎng)脂肪族尾巴，能穩(wěn)定插入細(xì)胞膜脂質(zhì)區(qū)域。PKH26最大激發(fā)波長(zhǎng)為551nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)是567nm，與羅丹明或PE檢測(cè)系統(tǒng)兼容。也可能用標(biāo)準(zhǔn)熒光素（Fluorescein）激發(fā)濾片，但熒光強(qiáng)度可能會(huì)有些降低。PKH26具最長(zhǎng)的體內(nèi)半衰期，超過100天，非常適用于體內(nèi)細(xì)胞示蹤、細(xì)胞增殖研究和其他長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)。

艾美捷獨(dú)家代理的Biogradetech的PKH26細(xì)胞連接試劑盒（用于常規(guī)細(xì)胞膜標(biāo)記）（PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling， Cat：B-CHK104）是一款基于熒光探針PKH26，用于常規(guī)細(xì)胞膜標(biāo)記的檢測(cè)試劑盒，適用于體外細(xì)胞標(biāo)記，體外細(xì)胞增殖以及長(zhǎng)期的體內(nèi)細(xì)胞跟蹤研究等。

試劑盒中包含一管PKH26染料以及一管稀釋液C（Diluent C），稀釋液C是本試劑盒配套提供的一種水溶性溶液，特別設(shè)計(jì)的一種標(biāo)記媒介能維持細(xì)胞活力，同時(shí)大化染料溶解性和標(biāo)記過程中的染色效率。Diluent C對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞來說是等滲的，不含去污劑或有機(jī)溶劑，也不含生理鹽和緩沖劑。根據(jù)細(xì)胞類型，染料標(biāo)記后膜的內(nèi)在化程度，標(biāo)記細(xì)胞可能呈現(xiàn)不同的狀態(tài)，從明亮，到均勻點(diǎn)狀或斑駁狀。然而，PKH26熒光在生理范圍內(nèi)不依賴于pH，且每個(gè)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度通常不受染料位置的影響。

PKH26主要應(yīng)用類型包括：

1. 細(xì)胞增殖分析

通過測(cè)量細(xì)胞的熒光強(qiáng)度和分布，可以估算細(xì)胞的增殖代次、增殖速率、增殖周期等參數(shù)。這種方法可以用于檢測(cè)不同條件下細(xì)胞的增殖能力，如抗原刺激、藥物干預(yù)、基因修飾等。也可以用于識(shí)別不同增殖能力的細(xì)胞亞群，如干細(xì)胞、祖細(xì)胞、癌細(xì)胞等。

2. 細(xì)胞遷移分化跟蹤

通過將標(biāo)記的細(xì)胞移植到體內(nèi)或體外的目標(biāo)組織中，可以觀察細(xì)胞在活體組織中的遷移軌跡和分化狀態(tài)。這種方法可以用于研究干細(xì)胞治療、組織再生、腫瘤轉(zhuǎn)移等過程。

3. 細(xì)胞間相互作用檢測(cè)

通過觀察不同熒光標(biāo)記的細(xì)胞之間的接觸、融合、轉(zhuǎn)移等現(xiàn)象，可以研究細(xì)胞間的信號(hào)傳遞、功能協(xié)調(diào)、物質(zhì)交換等機(jī)制。這種方法可以用于研究免疫反應(yīng)、血小板功能、病毒感染、納米顆粒攝取等過程。

【染色流程】：

【注意事項(xiàng)】：

1）通過分配脂質(zhì)染料進(jìn)入細(xì)胞膜來進(jìn)行標(biāo)記。標(biāo)記強(qiáng)度是染料濃度和細(xì)胞濃度共同作用的一種功能，且不會(huì)飽和。因此，用來標(biāo)記的染料濃度需要有限，過度標(biāo)記細(xì)胞會(huì)引起細(xì)胞膜完整性喪失和降低的細(xì)胞復(fù)原能力。

2）以下步驟適用于體外或離體標(biāo)記干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單個(gè)核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)元或任何需要將染料插入細(xì)胞膜脂質(zhì)區(qū)的其他細(xì)胞類型。而體內(nèi)標(biāo)記、血小板標(biāo)記，或在含非吞噬細(xì)胞的群體內(nèi)選擇性標(biāo)記吞噬細(xì)胞，需對(duì)步驟做適當(dāng)修改。

3）需在單克隆抗體染色前進(jìn)行常規(guī)細(xì)胞膜染色。4℃單克隆抗體染色過程中膜染料仍能維持穩(wěn)定。然而，如果單抗標(biāo)記后再室溫下進(jìn)行常規(guī)細(xì)胞膜染色，極有可能引起單抗的“蓋帽”發(fā)生。

4）以下步驟中用到的細(xì)胞和染料濃度是推薦用的起始濃度，廣譜適用于各種細(xì)胞類型。用戶需根據(jù)自身細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康拇_定加的染料和細(xì)胞濃度，通過對(duì)染色后細(xì)胞活力（比如典化丙啶排斥），熒光強(qiáng)度，染色均勻性和對(duì)待研究細(xì)胞功能無影響等方面來綜合評(píng)估。

5）PKH26染色過程中需避免疊氮化物或代謝毒物的存在。

6）雖然粘附在固相基質(zhì)上的貼壁細(xì)胞可能被標(biāo)記，使用單細(xì)胞懸浮液能得到更勻質(zhì)的染色結(jié)果。染色前使用蛋白消化酶比如胰酶/EDTA處理貼壁或結(jié)合細(xì)胞制備成分散的單細(xì)胞懸液能得到好的染色結(jié)果。

相關(guān)產(chǎn)品推薦：

Biogradetech生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國(guó)加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。