一、背景介紹

蛋白質(zhì)在儲存過程中面臨多種失活風(fēng)險(xiǎn)，包括聚集、降解、構(gòu)象改變以及與容器表面的非特異性吸附。傳統(tǒng)上，研究者常使用甘油作為蛋白穩(wěn)定劑，但甘油存在粘度高、移液困難、可能干擾下游實(shí)驗(yàn)等局限性。由艾美捷代理Cell Biolabs公司推出的專利性10X蛋白穩(wěn)定溶液（貨號：PRB-5210），為蛋白質(zhì)的長期活性保存提供了一種更優(yōu)的替代方案。

該穩(wěn)定溶液以10倍濃縮的緩沖液形式提供，可直接加入目標(biāo)蛋白溶液中（無需預(yù)先稀釋），操作簡便。其設(shè)計(jì)理念是：通過低分子量組分的協(xié)同作用，在不顯著改變?nèi)芤后w系的前提下，為蛋白質(zhì)提供穩(wěn)定的微環(huán)境，從而延長儲存壽命。

二、產(chǎn)品核心特性

1. 優(yōu)異的穩(wěn)定效果

與傳統(tǒng)方法（如添加甘油）相比，該穩(wěn)定溶液能夠有效穩(wěn)定大多數(shù)酶及其他蛋白質(zhì)，防止其在儲存過程中發(fā)生聚集。聚集是蛋白質(zhì)失活的主要機(jī)制之一，該溶液通過優(yōu)化溶劑環(huán)境，減少了蛋白質(zhì)分子間的疏水相互作用，從而維持其單分散狀態(tài)。

2. 抵御惡劣環(huán)境條件

該溶液能夠保護(hù)蛋白質(zhì)免受苛刻環(huán)境條件的沖擊，包括：

高溫波動(dòng)：即使儲存溫度出現(xiàn)短暫升高（如冰箱故障、反復(fù)開門），蛋白質(zhì)活性仍可得到較好維持。

反復(fù)凍融：對于需要多次取用的蛋白樣品，該溶液顯著降低了凍融循環(huán)帶來的活性損失。低分子量組分起到類似冷凍保護(hù)劑的作用，減少冰晶對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的機(jī)械損傷。

3. 易于去除的低分子量組分

與甘油（分子量92 Da）相比，該溶液中的穩(wěn)定成分均為低分子量化合物。如有需要，可在下游實(shí)驗(yàn)前通過透析或凝膠過濾（脫鹽）輕松去除，不會(huì)對后續(xù)檢測（如酶活測定、蛋白互作分析、質(zhì)譜鑒定等）產(chǎn)生干擾。

4. 無毒性與兼容性

該溶液為非毒性配方，使用安全。對于不希望去除穩(wěn)定劑的下游應(yīng)用（如某些粗酶反應(yīng)），可直接使用含穩(wěn)定劑的蛋白溶液，多數(shù)情況下不會(huì)抑制后續(xù)反應(yīng)。

三、儲存條件與有效期

儲存溫度：收到產(chǎn)品后應(yīng)儲存于-80℃。該溫度下穩(wěn)定溶液本身保持液態(tài)或半固態(tài)，長期儲存不易降解。

有效期：在正確儲存條件下（-80℃，避免反復(fù)凍融），自收貨之日起一年內(nèi)有效。建議在瓶身標(biāo)注收貨日期以便追蹤。

分裝建議：為避免多次凍融，建議將穩(wěn)定溶液分裝為單次使用的小份后再凍存。每份取出使用后，剩余部分應(yīng)立即返回-80℃。

四、使用方法

操作步驟（共兩步）

步驟1：添加穩(wěn)定溶液
向目標(biāo)蛋白溶液中加入1/10體積的10X蛋白穩(wěn)定溶液。例如：若蛋白溶液體積為900 ?L，則加入100 ?L的10X穩(wěn)定溶液。輕輕混合，確保充分混勻但避免劇烈振蕩（以免產(chǎn)生氣泡或?qū)е碌鞍准羟校?/p>

重要提示：該穩(wěn)定溶液以10X濃縮液形式提供，請勿預(yù)先稀釋。直接加入蛋白溶液即可達(dá)到1×工作濃度。預(yù)先稀釋會(huì)導(dǎo)致穩(wěn)定劑濃度不足，影響保護(hù)效果。

步驟2：儲存
將混合后的蛋白樣品置于適合該蛋白的儲存溫度下，通常為4℃至-80℃之間。該穩(wěn)定溶液不會(huì)改變目標(biāo)蛋白原有的儲存特性。例如：

某些蛋白質(zhì)在冷凍溫度下本身不穩(wěn)定（如某些膜蛋白、大分子復(fù)合物），應(yīng)繼續(xù)冷藏（4℃）保存，而非冷凍。

對凍融穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，可儲存于-20℃或-80℃。

五、結(jié)果示例

以下圖表展示了典型結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考，不得用于解釋實(shí)際結(jié)果。

左圖：辣根過氧化物酶（HRP）的穩(wěn)定性。將純化的HRP在4°C或98°C下孵育60分鐘，然后在磷酸鹽緩沖液（PBS）、PBS + 50%甘油（PBSG）或PBS + 蛋白質(zhì)穩(wěn)定溶液（PSS）的存在下，通過與ELISA底物溶液反應(yīng)來測試其活性。

右圖：重組Cas9的穩(wěn)定性。純化的重組Cas9在25°C下，于含有5%甘油的20 mM Tris pH 8、300 mM NaCl、10 mM EDTA的溶液中孵育6天（灰色線），分別用20%甘油（橙色線）、RIPA緩沖液（綠色線）或蛋白穩(wěn)定溶液（藍(lán)色線）處理后，使用Cas9 ELISA試劑盒（貨號PRB-5079）進(jìn)行檢測。