PhotoGel 95% DS 甲基丙烯酸酯明膠的準備說明

三維（3D）凝膠使得可以研究細胞外基質（ECM）的力學特性，如密度和剛度，對細胞發育、遷移和形態的影響。與二維系統不同，3D環境允許細胞延伸與所有細胞表面的整合素同時相互作用，導致特定信號通路的激活。凝膠的硬度或剛度也會在3D與2D環境中對細胞遷移產生不同影響。此外，在3D系統中，由于基質纖維與細胞延伸的纏繞，可能會產生整合素無關的機械相互作用，而在細胞附著在平坦表面的2D系統中不會出現。

Advanced BioMatrixPhotoGel 95% DS 甲基丙烯酸酯明膠是一種純化明膠甲基丙烯酸酯套裝，可提供類似天然的3D明膠凝膠，并具有獨特屬性，可在不同濃度下制備，并通過紫外交聯提供不同的凝膠硬度。盡管它是變性膠原蛋白，但明膠保留了許多天然結合基序，如RGD和MMP位點。PhotoGel? UV套裝包括明膠甲基丙烯酸酯和紫外激活的光引發劑。

艾美捷PhotoGel 95% DS 甲基丙烯酸酯明膠，2 x 500 mg，帶 Irgacure 套件（ABM-5215-1KIT）準備說明：

注意：采用無菌操作方式，在整個膠原蛋白和其他溶液的制備和處理過程中保持產品的無菌性。

注意：以下說明適用于10%明膠甲基丙烯酸酯溶液。推薦濃度為5-20%。

1. 將10毫升無菌溫暖的1倍PBS或1倍細胞培養基加熱至>60°C。

2. 將5毫升加熱的溶液加入含有500毫克凍干明膠甲基丙烯酸酯的琥珀色小瓶中。

3. 在搖床或旋轉板上混合，直至完全溶解。如有可能，請保持溫暖（>37°C）（例如將旋轉器放入孵育箱中）以幫助完全溶解。

4. 向含有100毫克Irgacure的小琥珀瓶中加入1毫升純甲醇，并旋轉混合。（注意 - 溶解的Irgacure的保質期為2周。只需在10%溶液中溶解所需量的Irgacure粉末）

5. 通過將所需明膠總體積乘以0.01來計算所需光引發劑的體積。（如果要直接加到5毫升中，您將添加0.05毫升的Irgacure）

6. 將計算出的光引發劑體積加入所需量的明膠溶液中，并徹底混合。

7. 將您的細胞加入明膠/光引發劑溶液中。

8. 將您的明膠/光引發劑/細胞溶液分裝到所需的培養皿中（例如6孔板、48孔板）。

9. 對于紫外線交聯，將印刷結構直接放置在365納米紫外光交聯光源下。更長的暴露時間可以實現更多的交聯，盡管每種細胞類型能承受不同程度的紫外光和自由基（由光引發劑產生）介導的交聯。任何多余的材料都可以冷藏保存。材料會凝膠化。將其加熱至>30°C，使其再次變為液態。

存儲/穩定性：產品在冰袋中運送。收到后，將明膠甲基丙烯酸酯存儲在-20°C。將Irgacure存儲在2至10°C之間。