【前情回顧】：

       【1】如何收集和保存血液樣本中cf-DNA和cf-RNA，點擊了解

       【2】如何從血液中提取DNA，點擊了解

       【3】如何從血清、血漿中提取外泌體，點擊了解

       【4】如何提取血液樣本外泌體中的RNA，點擊了解

       【5】如何分離血漿、血清中的外泌體，并提取外泌體中的RNA，點擊了解

       【6】如何從血漿、血清樣本中分離出游離DNA（cf-DNA），點擊了解

 

 

       血漿/血清游離RNA或外泌體RNA是某些癌癥和疾病的潛在生物標志物。外泌體是40 - 150nm的膜泡，由大多數(shù)細胞類型分泌。外泌體存在于唾液、血液、尿液、羊水和惡性腹水以及其他生物液體中。外泌體可能在介導感染因子和腫瘤的適應性免疫反應、組織修復、神經連接和病原蛋白的轉移方面發(fā)揮功能作用。由于外泌體中包裹的RNA分子受到保護而不被RNA酶降解，因此可以從體液（如血漿或血清）中有效地回收。

 

       如何從收集與保存的血漿和血清樣本中分離出RNA（cf-RNA）呢？艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學領域解決方案供應商，為您推薦Norgen Biotek品牌的血漿/血清RNA提取純化試劑盒。

 

 

 

       血漿/血清RNA提取純化試劑盒的特色與優(yōu)勢：

 

1.        1.分離所有大小的游離和外泌體RNA，包括microRNA；
2.        2.多種血漿和血清輸入量（50µL-5mL）;
3.        3.沒有苯酚提取物；
4.        4.沒有載體RNA；
5.        5.結合并洗脫所有RNA，無論大小或GC含量如何，無偏差
6.        6.將游離的RNA和外泌體RNA濃縮至靈活的洗脫體積；
7.        7.短時間內純化高質量的RNA。
8.        8.純化的血漿/血清RNA可用于很多下游應用，包括PCR，qPCR，甲基化敏感的逆轉錄qPCR，逆轉錄PCR，RNA印跡，RNA酶保護和引物延伸，表達陣列測定和NGS。

 

 

       血漿/血清NA純化小提試劑盒（貨號55000），廠家測試結果：

 

       從不同體積的血漿中純化cf-RNA。該血漿由EDTA收集的血液中制備而來。然后將3ul純化的RNA用作RT-qPCR反應中的模板，以檢測miR-21（圖A）和5S rRNA轉錄物（圖B）。miR-21和5S rRNA轉錄物的相對含量隨著樣上樣量的增加而線性增加。

 

 

       將純化的cf-RNA洗脫至不同的體積。然后將3ul純化的RNA用作RT-qPCR反應中的模板，以檢測miR-21。隨著洗脫體積的增加，miR-21的相對量增加，表明在非常低的洗脫體積中血漿cf-RNA仍然有比較好的有效濃度。

 

 

 

       【血漿/血清RNA純化小提試劑盒（貨號55000-各品牌橫向對比】

 

       血漿中miRNA有效性和一致性檢測。Norgen試劑盒與競爭對手Q、A、E試劑盒從血漿中分離miRNA。使用miR-21特異的引物進行莖環(huán)RT-qPCR。與其他分離方法相比，Norgen的試劑盒是唯一能夠顯示miR-21轉錄本高一致性和回收率的產品。使用Norgen試劑盒從200μL血漿中回收miRNA高于使用競爭對手A試劑盒從600μL純化的RNA中回收的miRNA。

 

 

 

       血漿/血清RNA純化中提試劑盒（貨號56100），廠家測試結果：

 

       從不同體積的血漿中純化cf-RNA。該血漿由檸檬酸鹽作為抗凝劑收集的血液中制備而來。然后將2ul純化的RNA用作RT-qPCR反應中的模板，以評估5S rRNA轉錄物的擴增。隨著上樣量的增加，5S rRNA轉錄物的平均Ct值線性降低。

 

 

       從不同體積的血漿中純化cf-RNA。該血漿由檸檬酸鹽作為抗凝劑收集的血液中制備而來。然后將2ul純化的RNA用作RT-qPCR反應中的模板，以評估來自不同血漿體積的5S rRNA轉錄物（A）和miR-21（B）的線性關系。Norgen的血漿/血清RNA純化中提試劑盒能夠從0.75 mL血漿中回收97％的5S rRNA轉錄物和miR-21轉錄物。此外，從1.5mL血漿中回收95％的5S rRNA轉錄物和miR-21。

 

 

       檢測人5S rRNA轉錄物時在血漿RNA樣品中存在的抑制劑含量檢測。使用Norgen試劑盒從不同體積血漿中分離cf-RNA。在20μL的逆轉錄qPCR反應中使用不同的洗脫體積，以觀察Ct值的變化。隨著PCR上樣量的增加，Ct值趨于降低，表明使用Norgen試劑盒從血漿中純化的cf-RNA不含血漿中的常見抑制劑。

 

 

 

       血漿/血清RNA純化大提試劑盒（貨號56200），廠家測試結果：

 

       從不同體積的血漿中純化cf-RNA。該血漿由檸檬酸鹽作為抗凝劑收集的血液中制備而來。然后將2ul純化的RNA用作RT-qPCR反應中的模板，以評估來自不同血漿體積的5S rRNA轉錄物（A）和miR-21（B）的線性關系。Norgen的血漿/血清RNA純化大提試劑盒能夠從3mL血漿中回收92％的5S rRNA轉錄物和91％的miR-21。此外，從5mL血漿中回收90％的5S rRNA轉錄物和90％的miR-21。

 

 

       檢測人5S rRNA轉錄物時在血漿RNA樣品中存在的抑制劑含量檢測。使用Norgen試劑盒從不同體積血漿中分離cf-RNA。在20μL的逆轉錄qPCR反應中使用不同的洗脫體積，以觀察Ct值的變化。隨著PCR上樣量的增加，Ct值趨于降低，表明使用Norgen試劑盒從血漿中純化的cf-RNA不含血漿中的常見抑制劑。

 

 

 

       已發(fā)表文章參考：

 

1.        1.MicroRNA molecular profiling from matched tumor and bio-fluids in bladder cancer.Molecular Cancer. 2015.
2.        2.Serum microRNA-34a is potential biomarker for inflammation in nonalcoholic fatty liver disease.Asian Biomedicine. 2016.
3.        3.Circulating MicroRNAs: Association with Lung Function in Asthma.PLOS ONE. 2016.
4.        4.Circulating nucleic acids damage DNA of healthy cells by integrating into their genomes.Journal of Biosciences. 2015.

 

       Norgen Biotek成立于1998年，公司總部位于加拿大，是一家著名全球化生物技術公司，生產基于專利技術的核酸和蛋白質純化及富集產品用于研究和診斷。Norgen Biotek 在2003年獲得加拿大國家研究委員會頒發(fā)的科技創(chuàng)新獎，是一家致力于樣品制備并獲得ISO 9001（產品質量）、ISO 13485（產品可用于商業(yè)化的醫(yī)療設備，包括用于體外診斷領域）和ISO 15189（可用于臨床檢測機分子診斷領域的研發(fā)能力）認證的生物科技公司。目前該公司的產品多達700余種，提供一流的樣品制備試劑盒，應用于基因組和蛋白組等不同的領域。

 

      艾美捷科技與國內外優(yōu)秀的生物試劑供應商保持著密切的合作關系，目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理，主要包括：Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Mabtech、Solis BioDyne等，可以在第一時間為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產品及物流服務。

 

       作為Norgen Biotek在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的Norgen Biotek產品以及訂制服務。