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艾美捷 Advanced BioMatrix RatCol?膠原蛋白溶液是一種高純度的鼠尾膠原蛋白(100毫克),濃度約為4毫克/毫升,pH值為3-4,并經(jīng)過無菌過濾。RatCol?中約有97%的I型膠原蛋白,其余部分由III型膠原蛋白組成。RatCol?膠原蛋白的純度≥99%。SDS-PAGE電泳顯示出典型的α、β和γ帶狀圖案,符合膠原蛋白的特征。產(chǎn)品標(biāo)簽和每個(gè)特定批次的分析證書上打印了實(shí)際的膠原蛋白濃度。膠原蛋白附帶了一瓶預(yù)配的中和溶液,用于制備膠原凝膠。RatCol?膠原蛋白是通過酸提取過程從鼠尾的膠原蛋白中獲得的,得到的是保持無膠原蛋白脫肽的I型膠原蛋白,溶解在0.02M乙酸緩沖液中。膠原鏈的N-和C末端的前膠原肽區(qū)域得以保留。I型膠原蛋白是皮膚、骨骼、肌腱和其他纖維結(jié)締組織的主要結(jié)構(gòu)成分,其與其他膠原蛋白的區(qū)別在于賴氨酸羥化和低碳水化合物含量較低。盡管已經(jīng)鑒定出多種類型的膠原蛋白,但它們都由三肽鏈組成,呈三螺旋構(gòu)象。主要結(jié)構(gòu)(氨基酸序列)的輕微差異確定了不同類型之間的區(qū)別。主要結(jié)構(gòu)的氨基酸序列主要是以甘氨酸為每三個(gè)位置的重復(fù)基序,脯氨酸或4-羥基脯氨酸經(jīng)常位于甘氨酸殘基之前。1,2 I型膠原蛋白是由兩個(gè)α1(I)鏈和一個(gè)α2(I)鏈組成的異源三聚體,在中性pH和37°C下自發(fā)形成三螺旋支架。多細(xì)胞生物中細(xì)胞生長、分化和細(xì)胞凋亡的控制依賴于細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的黏附。

鑒于I型膠原蛋白是ECM的豐富組分,細(xì)胞在三維膠原凝膠中培養(yǎng)比傳統(tǒng)的二維系統(tǒng)更好地模擬體內(nèi)細(xì)胞環(huán)境。這已經(jīng)在多種細(xì)胞類型中得到證實(shí),包括心臟和角膜成纖維細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞(HSCs)和神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞。3-6一些疾病可以影響ECM的力學(xué)特性,而其他疾病狀態(tài)可能是由于ECM的密度或剛度變化引起的。由于I型膠原蛋白是ECM的拉伸特性的關(guān)鍵決定因素,三維膠原凝膠在機(jī)械轉(zhuǎn)導(dǎo)、將機(jī)械信號轉(zhuǎn)化為生化信號的細(xì)胞信號傳導(dǎo)研究中非常有用。6-9 三維凝膠可以研究ECM的力學(xué)特性(如密度和剛度)對細(xì)胞發(fā)育、遷移和形態(tài)的影響。與二維系統(tǒng)不同,三維環(huán)境允許細(xì)胞伸展與所有細(xì)胞表面的整合素同時(shí)相互作用,從而激活特定的信號傳導(dǎo)途徑。凝膠的剛度或剛性在三維與二維環(huán)境中對細(xì)胞遷移產(chǎn)生不同的影響。
此外,3D系統(tǒng)中可能存在與整合素?zé)o關(guān)的機(jī)械相互作用,這是由于細(xì)胞伸展與基質(zhì)纖維的糾纏而產(chǎn)生的,而在細(xì)胞附著于平坦表面的二維系統(tǒng)中則不可能發(fā)生。10-12細(xì)胞表面的一組結(jié)構(gòu)和功能多樣的受體識別膠原三螺旋,從而識別不同的膠原亞型。最知名的膠原受體是整合素α1β1和α2β1。α1β1是平滑肌細(xì)胞上的主要整合素,而α2β1是上皮細(xì)胞和血小板上的主要形式。這兩種形式在許多細(xì)胞類型上表達(dá),包括成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。13-15某些細(xì)胞類型還可能表達(dá)其他膠原受體,如糖蛋白VI(GPVI),它在血小板中介導(dǎo)粘附和信號傳導(dǎo)。16其他膠原受體包括圓盤結(jié)構(gòu)域受體、白細(xì)胞相關(guān)的IG樣受體-1和曼諾糖受體家族成員。17,18本產(chǎn)品是從鼠尾腱提取的膠原蛋白制備而成,含有較高的單體含量。起始材料來自管理的斯普拉格-道利大鼠群體,并使用符合cGMP的制造過程進(jìn)行純化。該過程包含內(nèi)置的、經(jīng)驗(yàn)證的步驟,以確保可能的朊病毒和/或病毒污染物的滅活。該產(chǎn)品非常適用于表面涂層,提供薄層制備用于細(xì)胞培養(yǎng),或作為固態(tài)凝膠使用。
文獻(xiàn)參考:
1. Tanzer, M. L., Cross-linking of collagen. Science,180(86), 561-566 (1973).
2. Bornstein, P., and Sage, H., Structurally distinct collagen types. Ann. Rev. Biochem., 49, 957-1003 (1980).
3. Tomasek, J.J., and Hay, E.D., Analysis of the role of microfilaments in acquisition and bipolarity and elongation of fibroblasts in hydrated collagen gels. J. Cell Biol., 99, 536-549 (1984).
4. Karamichos, D., et al., Regulation of corneal fibroblast morphology and collagen reorganization by extracellular matrix mechanical properties. Invest.Ophthalmol. Vis. Sci., 48, 5030-5037(2007).
5. Sato, M., et al., 3-D Structure of extracellular matrixregulates gene expression in cultured hepaticstellate cells to induce process elongation. CompHepatol., Jan 14;3 Suppl 1:S4 (2004).
6. Li, G.N., et al., Genomic and morphologicalchanges in neuroblastoma cells in response tothree-dimensional matrices. Tissue Eng., 13, 1035-1047 (2007).
7. Roeder, B.A., et al., Tensile mechanical propertiesof three-dimensional type I collagen extracellularmatrices with varied microstructure. J. Biomech.Eng., 124, 214-222 (2002).
8. Wozniak, M.A., and Keely, P.J., Use of three-dimensionalcollagen gels to studymechanotransduction in T47D breast epithelialcells. Biol. Proced. Online, 7,144-161 (2005).
9. Grinnell, F., Fibroblast biology in three-dimensionalcollagen matrices. Trends Cell Biol., 13, 264-269(2003).
10. Beningo, K.A., et al., Responses of fibroblasts toanchorage of dorsal extracellular matrix receptors.Proc. Natl. Acad Sci. USA, 101, 18024-18029(2004).
11. Zaman, M.H., et al., Migration of tumor cells in 3Dmatrices is governed by matrix stiffness along withcell-matrix adhesion and proteolysis. Proc. Natl.Acad. Sci. USA, 103, 10889-10894 (2006).
12. Jiang, H., and Grinnell, F., Cell-matrixentanglement and mechanical anchorage offibroblasts in three-dimensional collagen matrices.Mol. Biol. Cell, 16, 5070-5076 (2005).
13. Heino, J., The collagen receptor integrins havedistinct ligand recognition and signaling functions.Matrix Biol., 19, 319-323 (2000).
14. Heino, J., The collagen family members as celladhesion proteins. BioEssays, 29, 1001-1010(2007).
15. Ivaska, J., et al., Cell adhesion to collagen-is onecollagen receptor different from another? Conn.Tiss., 30, 273-283 (1998).
16. Clemetson, K.J., and Clemetson, J.M., Plateletcollagen receptors. Thromb Haemost., 86, 189-197(2001).
17. Leitinger, B., and Hohenester,E., MammalianCollagen Receptors, Matrix Biol., 26, 146-155(2007).
18. Popova, S.N., et al., Physiology and pathology ofcollagen receptors. Acta Physiol. (Oxf), 190, 179-187 (2007).
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