在生命科學(xué)領(lǐng)域，尤其是發(fā)育生物學(xué)和臨床樣本研究中，研究人員常常面臨一個(gè)重大挑戰(zhàn)：如何從極有限的生物液體樣本中高效提取細(xì)胞外囊泡（EVs）？這類(lèi)樣本通常獲取困難、體積微小，卻又蘊(yùn)藏著極為珍貴的生物學(xué)信息。System Biosciences（SBI）推出的SmartSEC Mini EV Isolation System（貨號(hào)SSEC100A-1），正是為解決這一難題而生——全球首款專(zhuān)為10-100uL微量樣本設(shè)計(jì)的商業(yè)化EV分離試劑盒。

SmartSEC Mini 細(xì)胞外囊泡（EV）分離系統(tǒng)——適用于小體積樣本與發(fā)育生物學(xué)研究

最低樣本需求，最大研究洞察

探索EV生物學(xué)的新前沿

無(wú)論是珍貴的臨床樣本，還是難以收集的發(fā)育生物學(xué)模式生物體液，研究人員日益面臨從小體積樣本中分離細(xì)胞外囊泡（EVs）的挑戰(zhàn)。為支持這類(lèi)研究，SBI將我們強(qiáng)大的SmartSEC技術(shù)優(yōu)化，推出了首款商業(yè)化試劑盒，專(zhuān)門(mén)用于從10–100 uL生物體液中分離EV（見(jiàn)表1）。該SmartSEC Mini EV分離系統(tǒng)已在果蠅、渦蟲(chóng)、擬南芥以及人、小鼠和大鼠樣本中得到驗(yàn)證，助您突破EV生物學(xué)的研究邊界。

表1. SmartSEC Mini推薦上樣體積

SmartSEC Mini是一項(xiàng)基于色譜法的專(zhuān)利EV分離技術(shù)，結(jié)合了尺寸排阻色譜（SEC）的所有優(yōu)點(diǎn)——高純度、高得率、優(yōu)異重現(xiàn)性及EV完整性保持——并通過(guò)污染物捕獲功能克服了傳統(tǒng)SEC的局限性，實(shí)現(xiàn)快速、簡(jiǎn)便、低樣本量的EV分離。

產(chǎn)品亮點(diǎn)：

目前市面上唯一可處理低至10 uL樣本的商業(yè)化EV分離試劑盒。

適用于從多種生物體液中分離EV。

已在下述樣本類(lèi)型中驗(yàn)證通過(guò)：

·黑腹果蠅（Drosophila melanogaster）

·渦蟲(chóng)（Planaria）

·擬南芥（Arabidopsis thaliana）

·小鼠

·大鼠

相較于超速離心法，純度和得率更高。

兼容多數(shù)下游應(yīng)用，如質(zhì)譜分析、Western Blot、納米顆粒追蹤分析（NTA）和透射電子顯微鏡（TEM）。

僅需30分鐘即可完成EV分離

1. 加載生物體液，室溫孵育30分鐘

2. 500 x g離心30秒

3. EV存在于流出液中

4. 可選：添加緩沖液并離心最多2次，以最大化回收率

圖 1.簡(jiǎn)單的 SmartSEC Mini 工作流程。

支持?jǐn)?shù)據(jù)：見(jiàn)證SmartSEC Mini如何高效分離多種物種微量體液中的EVs：

圖2. SmartSEC Mini從10 uL果蠅血淋巴中穩(wěn)健分離EVs，Western Blot分析顯示1 ug等價(jià)蛋白結(jié)果。 常見(jiàn)果蠅外泌體標(biāo)記物顯示于分子量標(biāo)記旁。數(shù)據(jù)由哥廷根大學(xué)Karen Linnemannstr?m博士提供。

SmartSEC Mini還用于從100uL渦蟲(chóng)新成層培養(yǎng)基（圖3）和50uL擬南芥（圖4）中分離EV，如圖所示。

圖3. SmartSEC Mini從100 uL渦蟲(chóng)新胚細(xì)胞培養(yǎng)基中穩(wěn)健分離EVs。 數(shù)據(jù)由斯托瓦斯醫(yī)學(xué)研究所Vidyanand Sasitharan博士提供。

圖4. SmartSEC Mini從50 uL擬南芥質(zhì)外體液中穩(wěn)健分離EVs。 樣本由加州州立大學(xué)東灣分校Claudia Uhde-Stone博士提供。

SmartSEC Mini 能夠?qū)?10 微升小鼠血清（圖 5A、表 2）和 10 微升人類(lèi)血清（圖 5B、表 2）中的細(xì)胞外囊泡進(jìn)行有效隔離，這一點(diǎn)已通過(guò)蛋白質(zhì)印跡數(shù)據(jù)得到證實(shí)。此外，SmartSEC Mini 能夠分離出比競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手基于超濾技術(shù)的細(xì)胞外囊泡分離產(chǎn)品更多的細(xì)胞外囊泡（表 3）。

圖 5.SmartSEC Mini 可將EV與人和小鼠血清進(jìn)行完全隔離。

表2. 通過(guò)NTA評(píng)估，SmartSEC Mini可從10 uL小鼠和10 uL人血清中完全分離EVs。

表3. SmartSEC Mini 能分離的EV數(shù)量多于競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手的產(chǎn)品。

SmartSEC Mini 專(zhuān)門(mén)富集 EV 與脂蛋白顆粒和血液微粒，如質(zhì)譜法所示（圖 6 和表 4）。我們使用快速簡(jiǎn)便的 SmartSEC Mini 工作流程從 20 uL 人血清中分離 EV，并通過(guò)質(zhì)譜分析 EV 相關(guān)蛋白。在我們鑒定的 ~600 種蛋白質(zhì)中，使用 FunRich 工具進(jìn)行的功能富集分析表明，已知超過(guò) 50% 的蛋白質(zhì)與外泌體相關(guān)，而 <30% 與血液微粒相關(guān)，<10% 與脂蛋白顆粒相關(guān)（圖 6）。

圖6. 質(zhì)譜分析表明，SmartSEC Mini 能更有效地分離出細(xì)胞外囊泡。訪問(wèn)systembio.com/SmartSEC-Mini 網(wǎng)站，可查看一些分離出的蛋白質(zhì)的列表。

SBI始終致力于將前沿科技創(chuàng)新轉(zhuǎn)化為簡(jiǎn)單易用的研究工具，幫助全球科學(xué)家推動(dòng)發(fā)現(xiàn)進(jìn)程。除了SmartSEC Mini，SBI還提供全系列外泌體和基因編輯研究工具。了解更多信息，請(qǐng)聯(lián)系SBI中國(guó)區(qū)代理艾美捷科技！

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