氧化應激被定義為由于抗氧化劑和氧化劑之間的失衡，導致活性氧（ROS）產生增加。高級氧化蛋白產物（AOPP）是在氧化應激期間通過氯化氧化劑（如氯胺和次氯酸）與血漿蛋白的反應而產生的尿毒癥毒素。AOPP在結構上與晚期糖基化終末產物（AGE）蛋白相似，并表現(xiàn)出類似的生物活性。AOPP在患有腎臟并發(fā)癥、動脈粥樣硬化、糖尿病、系統(tǒng)性硬化癥以及HIV陽性的患者中水平升高。用次氯酸（HOCl）處理的人血清白蛋白（HSA）和體內產生的AOPP可以分別在中性粒細胞和單核細胞中引發(fā)氧化反應，這表明兩者都可以作為炎癥的真實介質。盡管AOPP的降解和從血液中清除的機制尚未完全闡明，但似乎肝臟和脾臟主要負責它們的分離和清除。

AOPP檢測為許多與尿毒癥相關疾病狀態(tài)中的自由基活性以及許多化合物的抗氧化特性測量提供了相關信息。研究人員已經修改了這種快速且簡單的協(xié)議，用于評估血漿和組織樣本。AOPP-HSA濃度是通過氯胺當量標準確定的。

艾美捷OxiSelect AOPP檢測試劑盒（#STA-318）提供了一種簡單、可重復且一致的系統(tǒng)，用于檢測血漿、裂解液和組織勻漿中的高級氧化蛋白產物。該試劑盒包括一個氯胺標準品和一個AOPP人血清白蛋白（HSA）綴合物，用作陽性對照。每個試劑盒提供足夠的試劑，可進行200次檢測，包括標準曲線和未知樣本。

檢測原理：

高級氧化蛋白產物（AOPP）檢測試劑盒是一種生物檢測工具，用于直接定量測量生物樣本中的AOPP。未知的含AOPP樣本或氯胺標準品首先與檢測反應啟動劑混合，開始顏色發(fā)育過程。經過短暫孵育后，加入終止液，樣本和標準品可以通過標準比色平板讀數(shù)器讀取。通過與預先確定的氯胺標準曲線比較，確定未知樣本中的AOPP含量。

OxiSelect AOPP檢測試劑盒組分：

盒子1（室溫運輸）

1. 氯胺標準品（部件編號231801）：1支20 ?L試管，100 mM氯胺。

2. 氯胺反應啟動劑（部件編號231802）：1瓶1.0 g粉末。

3. 終止液（部件編號231803）：1瓶5 mL。

4. 10X檢測稀釋液（部件編號231804）：1瓶20 mL。

盒子2（藍色冰袋運輸）

1. AOPP-HSA陽性對照（部件編號231805）：1支100 ?L試管，7.5 mg/mL AOPP-人血清白蛋白，蛋白質中AOPP含量為0.14 ?mol/mg。

未提供材料：

1. 蛋白質樣本，如純化蛋白、血漿、血清、細胞裂解液

2. 96孔微量滴定板

3. 1X PBS

儲存：

收到后，將AOPP-HSA陽性對照儲存于-20?C。將所有其他組分儲存于4?C。

結果示例：

以下圖表展示了氯胺標準曲線和AOPP-HSA陽性對照的典型AOPP檢測結果。以下數(shù)據(jù)僅供參考，不應用于解釋實際結果。

圖1. AOPP檢測的氯胺標準曲線。氯胺標準曲線是按照檢測協(xié)議描述創(chuàng)建的。

圖2. AOPP-HSA陽性對照和未處理的HSA均以100 ?M濃度制備，并按照檢測協(xié)議用STA-318進行檢測。

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OxiSelect AOPP檢測試劑盒引用文獻：

1. Deschamps-Latscha B. et al. (2005) Am. J. Kidney Dis. 45(1): 39-47.

2. Servettaz, A. et al. (2007) Ann. Rheum. Dis. 66: 1202-1209.

3. Witko-Sarsat, V. et al. (1996) Kidney International 49: 1304-1313.