DNA雙鏈斷裂（DSBs）可能是細胞內(nèi)發(fā)生的許多不同類型的DNA損傷中最危險的一種。DSBs由外源性因子（如電離輻射）或內(nèi)源性產(chǎn)生的活性氧自由基生成，并在減數(shù)分裂和V(D)J重組過程中作為中間體出現(xiàn)。細胞對DSBs的反應中的一個非常早期的步驟是在DNA損傷位點上對組蛋白H2A變體H2AX進行磷酸化。當DSBs引入哺乳動物細胞時，H2AX會迅速磷酸化（在幾秒鐘內(nèi)），從而在DNA損傷位點形成離散的γ-H2AX（磷酸化的H2AX）聚焦點。H2AX的磷酸化還似乎是細胞對包括淋巴細胞中的V(D)J重組和小鼠中的減數(shù)分裂等DSB中間體的過程的普遍反應。H2A在絲氨酸139位點的磷酸化導致染色質(zhì)解纏，并在招募修復或損傷信號因子到DNA損傷位點中起到關鍵作用。Cell Biolabs的OxiSelect? DNA DSB染色試劑盒基于組蛋白H2A.X在絲氨酸139位點的磷酸化反應，用于對在微孔板中培養(yǎng)的細胞中由DNA損傷劑引起的雙鏈斷裂進行染色。該試劑盒提供足夠的試劑進行100次在96孔板上的染色。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品OxiSelect DNA雙鏈斷裂（DSB）染色試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

試劑盒組成：

1. 抗磷酸化組蛋白H2A.X（絲氨酸139位點）抗體（100倍濃度）（編號232101）：一支裝 - 100 ?L。

2. 二抗，F(xiàn)ITC偶聯(lián)物（100倍濃度）（編號232102）：一支琥珀色管子 - 100 ?L。

3. DNA DSB誘導劑（20 mM）（編號232103）：一支裝 - 50 ?L 20 mM順鉑在DMSO中。

結(jié)果示例：

下圖展示了典型的磷酸組蛋白2A。X染色結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考。這些數(shù)據(jù)不應用于解釋實際結(jié)果。

圖1:A549細胞中DNA DSB的形成。將A549細胞以50K/孔接種過夜，然后用（右）和不用（左）100?M依托泊苷處理1小時。免疫熒光染色按照測定說明書中的說明進行。

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文獻參考：

1. Rogakou, E. P., Pilch, D. R., Orr, A. H., Ivanova, V. S., and Bonner, W. M. (1998) J. Biol. Chem.273, 5858-5868.

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