制備SPHERO?磁性顆粒 通過在單分散（即大小均勻）的聚苯乙烯芯顆粒上涂覆一層磁鐵礦和聚苯乙烯。因此，Spherotech--SPHERO?磁性粒子是球形的，本質(zhì)上是順磁性的。它們的大小也非常均勻。這些磁性顆粒的磁鐵礦含量可以調(diào)節(jié)，但一般來(lái)說，對(duì)于1微米顆粒，磁鐵礦含量約為10%至15%。磁性顆粒可以很容易地從懸浮液中磁性分離出來(lái)。這些顆粒從磁鐵中取出時(shí)變得無(wú)磁性，即使在反復(fù)暴露于強(qiáng)磁場(chǎng)后也不會(huì)保留任何可檢測(cè)的磁性。SPHERO?磁珠可用于細(xì)胞分離、親和純化、DNA探針測(cè)定、磁珠EIA等。

目前，有幾種將生物配體附著在聚苯乙烯顆粒上的方法。這些方法包括吸附到普通聚苯乙烯顆粒上，共價(jià)附著在表面功能化顆粒上，以及將目標(biāo)配體附著在預(yù)先包被結(jié)合蛋白（如鏈霉親和素、蛋白 A 或蛋白 G）的顆粒上。

以下信息解釋了配體與聚苯乙烯顆粒連接的通用方案。這些協(xié)議易于優(yōu)化，可滿足特定應(yīng)用的要求。以下方案由 Spherotech 開發(fā)，以方便 SPHERO? 微粒用戶。它們只能用作初始條件。Spherotech 鼓勵(lì)通過改變緩沖液、pH 值或試劑濃度來(lái)優(yōu)化包被條件。

通常，多克隆抗體通過吸附包被到聚苯乙烯顆粒上，而不使用任何偶聯(lián)劑。多克隆抗體與聚苯乙烯顆粒的結(jié)合力很強(qiáng)。但是，應(yīng)注意不要使抗體超載到顆粒上。如果發(fā)生過載，包被的抗體將在儲(chǔ)存過程中發(fā)生浸出。這是由于與抗體分子與聚苯乙烯顆粒表面的相互作用相比，抗體分子之間的相互作用較弱。如圖1所示，被動(dòng)吸附的合適抗體與顆粒比為62.5μg/mL的0.5%w/v（5.0mg固體/mL）的0.8μm聚苯乙烯顆粒1。

艾美捷Spherotech--Sphero技術(shù)說明：

使用被動(dòng)吸附的顆粒涂層

使用EDC和共價(jià)偶聯(lián)的具有配體或蛋白質(zhì)的氨基顆粒

羧基顆粒與親和素或其他蛋白質(zhì)使用EDC共價(jià)偶聯(lián)

使用兩步EDC偶聯(lián)協(xié)議的共價(jià)偶聯(lián)

使用親和偶聯(lián)的生物素化蛋白的親和素顆粒

使用溴化氰 （CNBr） 將蛋白質(zhì)與羥基顆粒共價(jià)偶聯(lián)

二甲氨基顆粒與DNA使用離子相互作用偶聯(lián)

使用 SPDP 修飾氨基蛋白共價(jià)偶聯(lián)的配體

多糖的高碘酸氧化和與氨基顆粒的偶聯(lián)

具有氨基修飾寡核苷酸的羧基聚苯乙烯顆粒

Spherotech公司是全球知名的微球產(chǎn)品生產(chǎn)商之一。Beckton Dickinson(BD)公司即用Spherotech的Rainbow熒光微球來(lái)對(duì)其流式細(xì)胞儀進(jìn)行靈敏度的校驗(yàn)。Spherotech公司生產(chǎn)的微球廣泛的應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和診斷，包括免疫熒光和免疫酶學(xué)檢測(cè)等。其微球適用于熒光顯微鏡技術(shù)、激光共聚焦(Confocal)技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、影像細(xì)胞術(shù)、磁性細(xì)胞分離技術(shù)、磁珠酶免測(cè)定法(EIA)等多種檢測(cè)方法。Spherotech常規(guī)生產(chǎn)高質(zhì)量的乳膠微球、熒光微球、順磁性微球、鐵磁性微球和多種有色微球，這些微球表面可根據(jù)應(yīng)用的需要添加不同的功能基團(tuán)(如羧基和氨基等)。此外，Spherotech公司還生產(chǎn)各種包被有抗體或配體，如親合素、鏈霉親合素和生物素等的微球，用于免疫學(xué)的研究和臨床。  艾美捷科技是Spherotech的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。