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CellMosaic的Phenyldiazirine oxLink? (T2A10) 是CellMosaic?開發(fā)的一種專有的光交聯(lián)試劑,用于研究生物分子間的相互作用。
這種試劑將高效的卡賓生成基團(tuán)苯基二氮丙啶與方便的肟可逆化學(xué)交聯(lián)以及超親水的AqueaTether? (AqT?) 鏈接器結(jié)合起來。這些結(jié)構(gòu)特點使得與傳光交聯(lián)試劑相比,使用這種試劑具有高度的優(yōu)勢。
三氟甲基苯基二氮丙啶(TFMP)基團(tuán):TFMP在360納米左右光解,此時對生物分子的光損傷最小。生成的卡賓在皮秒內(nèi)在鄰近的生物分子伙伴中插入C-H鍵。由于電子吸引的三氟甲基基團(tuán)使中間的重氮異構(gòu)體穩(wěn)定,因此在正常的標(biāo)記條件下未檢測到任何副產(chǎn)品。
含有酮或醛基團(tuán)的任何生物分子的化學(xué)交聯(lián)的氨基氧基團(tuán)。氨基氧-酮連接在肽化學(xué)中是正交的,并將允許高度選擇性的基于固定相的交聯(lián)產(chǎn)物的分離。特別是,選擇性純化方法將允許在復(fù)雜基質(zhì)中表征蛋白質(zhì)復(fù)合物,如血漿、細(xì)胞膜和細(xì)胞裂解物,這些樣本可能含有自由硫醇,這些硫醇會干擾標(biāo)記和純化過程。圖1顯示了如何使用可逆的oxLink?來交聯(lián)相互作用的生物分子伙伴并鑒定交聯(lián)位點或檢測相互作用伙伴。
親水性AqT?鏈接器:TFMP基團(tuán)高度疏水,使用傳統(tǒng)的乙烯和乙二醇型鏈接器標(biāo)記的生物分子傾向于聚集并破壞標(biāo)記的蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。T2A10 AqT?鏈接器由兩個蘇丁醇連接而成,大大增強(qiáng)了oxLink?的親水性(圖2)并提高了其水溶性(>27 mg/mL)。該分子還具有更少的非特異性疏水相互作用,允許高載荷的苯基二氮丙啶基團(tuán)。
艾美捷CellMosaic-Phenyldiazirine oxLink? (T2A10)化學(xué)信息:
化學(xué)品名稱:Phenyldiazirine sxLink? (T2A14)
化學(xué)式:不適用
分子量:633.66 Da
CAS編號:不適用
規(guī)格:
外觀:1.5毫升離心管中的白色凍干粉末
儲存溫度:-20°C
純度:高效液相色譜法測定,純度≥ 95 %
產(chǎn)品應(yīng)用:
標(biāo)記含有醛或酮基團(tuán)的生物分子
通過光交聯(lián)研究動態(tài)生物分子相互作用(例如,研究生物復(fù)合物和網(wǎng)絡(luò)、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)-DNA相互作用、小配體-蛋白質(zhì)相互作用)
產(chǎn)品關(guān)鍵特性:
高度水溶性(>27 mg/mL)和生物相容性
高載荷量,最小化聚集
包含能夠形成可逆鏈接的正交肽化學(xué)交聯(lián)組
包含高效的卡賓生成光交聯(lián)組

圖1. 使用水溶性Phenyldiazirine oxLink? (T2A10)的oxLink?工作流程
圖2. 4-[3-(三氟甲基)-3H-二氮雜茚-3-基]苯甲酸(TFDB,紅色,在DMSO中)和oxLink?(藍(lán)色,在水中)的C18高效液相色譜分析。
CellMosaic-Phenyldiazirine oxLink? (T2A10)文獻(xiàn)參考:
Protein crosslinking reviews: a) Brunner, J. (1993) Annu. Rev. Biochem. 62, 485?514. b) Freedman, R. B. (1979) Trends Biochem. Sci. 193–197. c) Herrmann, J. M., Westermann, B., Neupert, W. (2001) Methods Cell Biol. 65, 217–230. d) Fancy, D. A. (2000) Curr. Opin. Chem. Biol. 4, 28–32. e) Fasold, H., Klappenberger, J., Meyer, C., Remold, H. (1971) Angew. Chem. Internat. Edit. 10, 795–801. f) Bayley, H. Photogenerated Reagents in Biochemistry and Molecular Biology, Vol. 12. Elsevier, Amsterdam, Neth, 1983.
3-Trifluoromethyl-3-phenyldiazirine reference: Brunner, J., Senn, H. & Richards, F. M. (1980) J. Bio. Chem. 255, 3313?3318.
CellMosaic的生物偶聯(lián)物被用作研究工具、診斷試劑,以及藥物的新型載體,如抗體藥物偶聯(lián)物(ADCs)。艾美捷科技是CellMosaic的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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