T7 RNA聚合酶（T7 RNA Polymerase）是一種 RNA聚合酶，分子量約99kDa。專門催化5'→3'方向的 RNA形成過程。T7RNA聚合酶具有高度啟動(dòng)子專一性，且只會(huì)轉(zhuǎn)錄T7 噬菌體中位于T7啟動(dòng)子下游的的DNA或DNA復(fù)制品。

此酵素在合成RNA的過程中，需要DNA模板與 鎂離子（Mg）作為 輔因子。 牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）及 精胺（spermidine）對(duì)此酵素具促進(jìn)效果。與細(xì)菌的RNA聚合酶的差異之一，在于T7RNA聚合酶不受 抗生素 利福平（rifampicin）抑制。

艾美捷T7 RNA聚合酶（#C-BSM0124）適用范圍:

1. 合成單鏈 RNA，包括 mRNA，siRNA，gRNA 等各類 RNA 的前體。

2. 合成標(biāo)記或未標(biāo)記的高特異性 RNA 探針。

3. 利用帽子類似物合成加帽的 mRNA。

T7 RNA聚合酶可分為：常規(guī)型和耐熱型。常規(guī)型T7 RNA聚合酶可在37℃對(duì)模板進(jìn)行高效體外轉(zhuǎn)錄，而耐熱型T7 RNA聚合酶可在更高的溫度下（37-52℃）進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄。

T7 RNA聚合酶使用方法：

推薦的反應(yīng)條件：

在37°C下培養(yǎng)1小時(shí)。如果轉(zhuǎn)錄物長度小于300nt，反應(yīng)時(shí)間可以延長至2-16小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，在上述20μl反應(yīng)混合物中加入1μl雙脫氧核糖核酸酶，并在37°C下孵育15分鐘以移動(dòng)DNA模板

備注：

1.模板DNA的純度對(duì)于體外轉(zhuǎn)錄至關(guān)重要。在質(zhì)粒DNA提取過程中引入的RNase A殘基會(huì)顯著影響轉(zhuǎn)錄RNA的質(zhì)量。建議使用OD260/280比例為1.8-2.0的高純度RNase游離質(zhì)粒。

2.模板DNA可以通過線性化的環(huán)狀質(zhì)粒或PCR獲得。模板DNA的上游區(qū)域應(yīng)包含T7啟動(dòng)子序列，下游區(qū)域應(yīng)具有鈍端或編碼鏈上的5'突出部分。

3.為了您的安全和健康，請(qǐng)?jiān)谶M(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)穿戴實(shí)驗(yàn)服、一次性手套和口罩。

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