SouthernBiotech支原體檢測(cè)試劑盒專為檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)物中潛在的支原體污染而設(shè)計(jì)。該試劑盒采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增支原體內(nèi)保守的16S核糖體RNA編碼區(qū)基因組，從而提供了一種廣泛、高靈敏度和高效的檢測(cè)方法。精心確定的底漆順序包括支原體的三個(gè)屬（支原體、Acholeplasma和脲原體），使試劑盒能夠檢測(cè)95%以上的潛在細(xì)胞文化感染。支原體檢測(cè)試劑盒中的PCR技術(shù)快速（結(jié)果通常在3小時(shí)內(nèi)獲得）且易于使用。工具包它也是高度敏感的，可以在100?L的測(cè)試樣品上清液中檢測(cè)到少至2-5femtogram的支原體DNA。真核生物試劑盒不擴(kuò)增細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的細(xì)菌DNA。

感染支原體的樣本細(xì)胞系將在瓊脂糖凝膠上產(chǎn)生~448 bp至~611 bp的PCR產(chǎn)物，具體取決于存在的支原體類型。加入陽(yáng)性對(duì)照（M.orale，503 bp）以驗(yàn)證PCR擴(kuò)增過(guò)程具有以及確認(rèn)測(cè)試樣品中獲得的PCR產(chǎn)物的大小。還提供了內(nèi)部控制，以消除與PCR抑制劑相關(guān)的潛在假陰性。

艾美捷SouthernBiotech丨支原體檢測(cè)試劑盒用戶指南：

? 引物組和核苷酸（凍干）- 藍(lán)色瓶蓋

引物/核苷酸混合物（包括dATP、dCTP、dGTP和dUTP的脫氧核苷酸三磷酸）

? 無(wú)菌PCR 10X反應(yīng)緩沖液（500 μL）- 白色瓶蓋

100 mM Tris-HCl，pH 8.5

750 mM KCl

30 mM MgCl2

? 陽(yáng)性對(duì)照DNA（凍干）- 黃色瓶蓋

來(lái)自M. orale的非感染性PCR產(chǎn)物

產(chǎn)生一個(gè)503 bp的條帶

? 內(nèi)部對(duì)照DNA（凍干）- 綠色瓶蓋

包含特定支原體引物序列的非感染性質(zhì)粒DNA

產(chǎn)生一個(gè)270 bp的條帶

SouthernBiotech丨支原體檢測(cè)試劑盒組件：

引物組和核苷酸（凍干）-藍(lán)色帽

無(wú)菌PCR 10X反應(yīng)緩沖液（500μL）-白色蓋子

陽(yáng)性對(duì)照DNA（凍干）-黃色帽

內(nèi)部控制DNA（凍干）-綠帽

Lane 1 E. coli Genomic DNA

Lane 2 Hybridoma Cell DNA

Lane 3 Negative Control (H20)

Lane 4 Positive Control

Lane 5 Inhibited Sample

Lane 7 Weakly Contaminated Sample

Lane 8 100 bp DNA Ladder

Lane 6 Strongly Contaminated Sample

所需材料：

? 熱循環(huán)儀

? Taq DNA聚合酶

以下協(xié)議已針對(duì)熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶進(jìn)行了優(yōu)化

不建議使用其他DNA聚合酶

? DNA梯度

? PCR反應(yīng)管

? 無(wú)DNase水

支原體檢測(cè)試劑盒參考文獻(xiàn)：

1. Lamb SA, Rahman MM, McFadden G. Recombinant myxoma virus lacking all poxvirus ankyrin-repeat proteins stimulates multiple cellular anti-viral pathways and exhibits a severe

decrease in virulence. Virology. 2014;464-5:134-45.

2. Frampton GM, Ali SM, Rosenzweig M, Chmielecki J, Lu X, Bauer TM, et al. Activation of MET via diverse exon 14 splicing alterations occurs in multiple tumor types and confers clinical

sensitivity to MET inhibitors. Cancer Discov. 2015;5:850-9.

3. Modur V, Joshi P, Nie D, Robbins KT, Khan AU, Rao K. CD24 expression may play a role as a predictive indicator and a modulator of cisplatin treatment response in head and neck

squamous cellular carcinoma. PLoS One. 2016;11(6):e0156651.

4. Campos-Gomez J, Ahmad F, Rodriguez E, Saeed MF. A novel cell-based assay to measure activity of Venezuelan equine encephalitis virus nsP2 protease. Virology. 2016;496:77-89.

5. Wang X, Shaw DK, Hammond HL, Sutterwala FS, Rayamajhi M, Shirey KA, et al. The prostaglandin E2-EP3 receptor axis regulates Anaplasma phagocytophilum-mediated NLRC4

inflammasome activation. PLoS Pathog. 2016;12(8):e1005803.

SouthernBiotech 致力于高質(zhì)量、高親和純化的二抗的生產(chǎn)、純化和標(biāo)記。  同時(shí)，SBA還提供各種親和純化的多克隆和單克隆抗體，其中包括：熒光素和酶標(biāo)記物，低內(nèi)毒素/不含疊氮化物（LE/AF）制劑，F(xiàn)(ab)和 F(ab')2片段化抗體，此外還有純化的免疫球蛋白、血清以及細(xì)胞外基質(zhì)蛋白等產(chǎn)品。艾美捷科技是SouthernBiotech的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。