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TrueBlack Plus 是由 Biotium 化學家開發(fā)的下一代脂褐素猝滅劑。TrueBlack Plus 是水溶性的,因此可以在 PBS 而不是乙醇中進行淬火。它極大地減少了脂褐素的自發(fā)熒光,并且具有最小的遠紅背景。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 詳情 |
| TrueBlack Plus脂褐素自體熒光猝滅劑,40 X,DMSO溶液 | BTM-23014 | 查看 |
艾美捷TrueBlack Plus脂褐素自體熒光猝滅劑,40 X,DMSO溶液#BTM-23014具有更低遠紅背景的淬滅脂褐素:
唯1可用于水性緩沖液而不是 70% EtOH 的脂褐素猝滅劑;
在緩沖液中淬火可以延長厚樣品的孵育時間而不會收縮,與疏水性污漬兼容;
無有害溶劑;
減少來自其他來源(如紅細胞和細胞外基質(zhì))的自發(fā)熒光;
在免疫熒光染色之前或之后處理組織。

未經(jīng)淬火處理的甲醇固定人大腦皮層冷凍切片中的脂褐素自發(fā)熒光顯示為在所有通道中發(fā)出熒光的明亮點狀斑點,合并后的圖像呈粉紅色。蘇丹黑 B 的傳統(tǒng)處理會引入高水平的遠紅背景熒光。用原裝 TrueBlack? 處理可消除脂褐素自發(fā)熒光,但仍會引入低水平的紅色/遠紅色熒光。TrueBlack Plus 可在 PBS 中代替 70% 乙醇使用,并以最低水平的遠紅背景淬滅脂褐素自發(fā)熒光。
TrueBlack Plus:獨特的脂褐素猝滅劑
自體熒光是組織切片和一些原代細胞類型中非特異性背景熒光的主要來源。自發(fā)熒光的來源包括醛類固定劑、具有內(nèi)源性熒光的組織成分(包括細胞外基質(zhì)蛋白、紅細胞和巨噬細胞)和脂褐素,它由氧化蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的高度自發(fā)熒光顆粒組成,隨著年齡的增長在細胞的溶酶體中積累. 雖然通常在藍色和綠色波長中最亮,但自發(fā)熒光具有廣譜熒光,除非淬滅或掩蔽,否則幾乎不可能檢測到組織中的特定熒光信號。
據(jù)報道,許多處理方法可以減少自發(fā)熒光,包括用硫酸銨和 Tris 淬滅醛類、用硼氫化鈉漂白以及用藍色或黑色染料淬滅自發(fā)熒光。親脂性染料蘇丹黑 B 能高效地掩蓋脂褐素的自發(fā)熒光,但存在引入紅色熒光背景的缺點。Biotium原創(chuàng)的 TrueBlack? 脂褐素自發(fā)熒光淬滅劑(貨號 23007) 是作為蘇丹黑 B 的替代品開發(fā)的。它可以有效地淬滅脂褐素自發(fā)熒光,背景比蘇丹黑 B 低得多,但仍然引入低水平的遠紅背景。此外,與蘇丹黑 B 一樣,使用原始 TrueBlack? 淬滅劑處理必須在 70% 乙醇中進行,這與某些染色方案和樣本類型不相容。
開發(fā) TrueBlack Plus 可使脂褐素在水性緩沖液中淬滅,背景甚至比原始 TrueBlack 更低。在 PBS 中淬火可以延長厚樣品的孵育時間而不會收縮,并且與疏水性污漬兼容。
注意:為獲得合適的效果,Biotium建議使用EverBrite 封片劑等基于甘油的封片劑封片樣品。
Biotium公司是一家在熒光技術(shù)領域獨樹一幟的生物技術(shù)公司,公司位于美國加利福尼亞的BAY AREA------中外知名首要的生物科技中心。該公司一直致力于開發(fā)和生產(chǎn)用于生物醫(yī)學研究的熒光指示劑及其他特殊生化產(chǎn)品。其產(chǎn)品被廣泛應用于細胞生 物學、蛋白質(zhì)組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經(jīng)科學、血液流動檢測及大規(guī)模藥物篩選等眾多領域。Biotium公司專利產(chǎn)品眾多,包括已經(jīng)被廣泛使用的實時PCR定量熒光染料EvaGreen、具有劃時代意義的凝膠核酸染料Gel Red和GelGreen,以及最新推出的Cheetah Taq熱啟動酶和CF系列蛋白質(zhì)標記染料等。 n目前,Biotium已將其許多專利技術(shù)授權(quán)給一些主要的國際生物技術(shù)公司,包括安捷倫、BD生物科學、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。
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