小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒：適用于多種生物樣本的廣譜檢測

小鼠催乳素（PRL）ELISA試劑盒是一種用于體外定量測量小鼠血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液和其他生物液體中催乳素濃度的ELISA試劑盒。

艾美捷小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒：

貨號：abx570351

靶標：催乳素（PRL）

反應性：小鼠

檢測應用：ELISA

推薦稀釋度：最佳稀釋度/濃度應由最終用戶確定。

儲存：運輸時溫度為4°C。收到后，請按照試劑盒說明書中的儲存說明進行儲存。

有效期：該試劑盒的有效期至少為6個月。根據要求可提供長達12個月的有效期。

穩定性：試劑盒的穩定性由活性損失率決定。在適當的儲存條件下，有效期內的損失率小于5%。為了盡量減少性能波動，操作程序和實驗室條件應嚴格控制。還強烈建議整個檢測過程由同一位用戶完成。

檢測范圍：0.31 ng/ml 20 ng/ml

靈敏度：0.19 ng/ml

標準品形式：凍干

檢測方法：比色法

檢測類型：夾心法

檢測數據：定量

樣本類型：血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液和其他生物液體。

檢測原理：該試劑盒基于夾心酶聯免疫吸附試驗技術。96孔板上預先包被有抗體。將標準品、測試樣本和生物素偶聯試劑加入到孔中并孵育。然后加入HRP偶聯試劑，并將整個板孵育。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結合的偶聯物。使用TMB底物來定量HRP酶促反應。加入TMB底物后，只有含有足夠PRL的孔才會產生藍色產物，加入酸性終止液后變為黃色。黃色的強度與板上結合的PRL量成正比。在微孔板讀數儀中以450 nm波長光譜光度法測量OD，從而可以計算出PRL的濃度。

試劑盒組成：列出的試劑盒組成僅供參考。

預包被的96孔微孔板

標準品

標準品稀釋緩沖液

洗滌緩沖液

檢測試劑A

檢測試劑B

稀釋液A

稀釋液B

TMB底物

終止液

板封膜

所需但未提供的材料：

37°C培養箱

多通道和單通道移液管及無菌移液槍頭

噴霧瓶或自動微孔板洗滌器

1.5 ml管

蒸餾水

吸水濾紙

100 ml和1升量筒

微孔板讀數儀（波長：450 nm）

ELISA振蕩器

試劑準備：此程序僅供參考。

1) 標準品：用推薦體積的標準品稀釋緩沖液制備標準品溶液。然后按照協議中的指示，用標準品稀釋緩沖液對標準品溶液進行系列稀釋。

2) 洗滌緩沖液：按照協議中的指示，用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。

3) 檢測試劑準備：計算所需的工作溶液的總體積。分別用稀釋液A和稀釋液B將檢測試劑A和檢測試劑B稀釋1:100。

檢測程序：此程序僅供參考。產品說明書可能略有不同。產品應按照隨產品一起提供的產品說明書中的說明使用。

1) 設置標準品、測試樣本和對照孔。

2) 將100 ?l稀釋后的標準品加入到標準品孔中。

3) 將100 ?l標準品稀釋緩沖液加入到對照（零）孔中。

4) 將100 ?l稀釋后的樣本加入到樣本孔中。在37°C下孵育90分鐘。

5) 向每個孔中加入100 ?l檢測試劑A。在37°C下孵育1小時。

6) 洗滌3次。

7) 向每個孔中加入100 ?l檢測試劑B。在37°C下孵育30分鐘。

8) 洗滌5次。

9) 向每個孔中加入90 ?l TMB底物。在37°C下孵育10-20分鐘。

10) 加入50 ?l終止液。

11) 在450 nm處測量OD。

協議：此程序僅供參考。

在使用前將試劑盒組分和樣本平衡至室溫（18 25 °C）。建議每次測試繪制標準曲線。

1. 在預包被板上分別設置標準品、測試樣本和對照（零）孔，然后記錄它們的位置。建議每個標準品和樣本至少重復測量兩次。

2. 將100 ?L的每個標準品、對照和樣本加入到相應的孔中。用蓋子封住板，在37°C下孵育1小時。

3. 移除蓋子并丟棄液體。

4. 向每個孔中加入100 ?l檢測試劑A工作溶液。用蓋子封住板，在37°C下孵育1小時。

5. 移除蓋子并丟棄溶液。用1X洗滌緩沖液洗滌板3次。

6. 向每個孔中加入100 ?L檢測試劑B工作溶液，封住并孵育37°C 30分鐘。

7. 丟棄溶液并按照前一步驟用洗滌緩沖液洗滌板5次。

8. 向每個孔中加入90 ?l TMB底物。用蓋子封住板，在37°C下孵育10-20分鐘。避免暴露在光下。孵育時間僅供參考，最佳時間應由最終用戶確定。不要超過30分鐘。

9. 向每個孔中加入50 ?L終止液。立即在450 nm處讀取。

結果計算：計算時，將每個參考標準品和每個樣本的O.D.450重復讀數取平均值，并減去平均對照（零）O.D.450讀數。標準曲線可以繪制為每個參考標準品溶液的相對O.D.450（Y）與各自標準溶液濃度（X）的關系。樣本的PRL濃度可以從標準曲線上插值得出。

檢測精密度：

批內精密度（同一批次內的精密度）：分別在一塊板上測試3個低、中、高濃度水平的催乳素（PRL）樣本，每個樣本測試20次。

批間精密度（不同批次之間的精密度）：在3塊不同的板上測試3個低、中、高濃度水平的催乳素（PRL）樣本，每塊板上測試8個重復樣本。

CV（%）=（標準差/平均值）×100

批內精密度：CV<10%

批間精密度：CV<10%

數據示例：

圖：顯示小鼠催乳素（PRL）標準OD數據的圖表