自噬（Autophagy）是調(diào)節(jié)真核細(xì)胞生長(zhǎng)、死亡和能量代謝的重要生物學(xué)機(jī)制。細(xì)胞自噬行使其生物學(xué)功能的前提是自噬流（Autophagic Flux）的活化。大量證據(jù)表明自噬流受損與多種慢性炎性疾病，特別是腫瘤、神經(jīng)退行性疾病及組織纖維化的發(fā)病密切相關(guān)，目前對(duì)于自噬流的檢測(cè)是自噬與其相關(guān)疾病研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。

什么才是活細(xì)胞自噬分析金標(biāo)準(zhǔn)呢？作為專業(yè)的生命科學(xué)醫(yī)藥原料供應(yīng)商，艾美捷科技為您推薦Enzo Life Sciences（Enzo）榮譽(yù)出品，Nature/Cell海量引用，升級(jí)款- CYTO-ID Autophagy detection kit 2.0

*** 該產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn).

CYTO-ID Autophagy Detection Kit 2.0 使用新型染料檢測(cè)自噬小泡和監(jiān)控活細(xì)胞自噬流，選擇性標(biāo)記積累的自噬小泡。染料已通過(guò)優(yōu)化，不染溶酶體，在自噬前體、自噬體和自噬溶酶體里呈現(xiàn)出明亮的熒光。該試劑盒提供了一種無(wú)需細(xì)胞轉(zhuǎn)染，可以在活細(xì)胞中監(jiān)控細(xì)胞自噬的快速定量方法。

• CYTO-ID自噬檢測(cè)試劑盒2. 0原理：

該產(chǎn)品所用探針是陽(yáng)離子兩親性示蹤劑（CAT）染料，以類似誘導(dǎo)磷脂藥物的方式迅速進(jìn)入到細(xì)胞中。染料的功能基團(tuán)能夠選擇性標(biāo)記與自噬通路相關(guān)的小泡，而不會(huì)在溶酶體中聚集。胞內(nèi)物質(zhì)被擴(kuò)大的膜囊包裹，吞噬泡形成雙層膜囊泡，成為自噬體。自噬體外膜隨后與溶酶體融合，和內(nèi)部物質(zhì)被自噬性溶酶體降解。

• CYTO-ID自噬檢測(cè)試劑盒 2.0優(yōu)勢(shì)：

• 更明亮，更耐光，特異性染色自噬小泡

• 無(wú)需轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染效率驗(yàn)證

• 快速量化原生異質(zhì)性細(xì)胞群中的自噬

• 不染溶酶體，減少其他染料的背景干擾

• 便于高通量篩選自噬激活劑和抑制劑

• CYTO-ID自噬檢測(cè)試劑盒 2.0應(yīng)用：

• CYTO-ID自噬檢測(cè)試劑盒 2.0- 新老替代：

* 用量說(shuō)明：以ENZ-KIT175-0200為例，流式分析（200次）；熒光顯微鏡（250次）；96孔板（3*96well）

• CYTO-ID自噬檢測(cè)試劑盒 2.0，ENZ-KIT175，Nature/Cell文章鑒賞：

①Nature文章：Tian, W., Alsaadi, R., Guo, Z. et al. An antibody for analysis of autophagy induction. Nat Methods 17, 232–239 (2020).

【摘要】自噬是一種維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的降解程序。自噬缺陷在許多疾病中都有描述。然而，由于目前可用的用于測(cè)量自噬誘導(dǎo)的工具的局限性，自噬率的分析可能具有挑戰(zhàn)性，特別是在稀有細(xì)胞群或體內(nèi)。在這里，我們描述了一種通過(guò)測(cè)量蛋白質(zhì) ATG16L1 的磷酸化來(lái)監(jiān)測(cè)自噬的方法。我們開(kāi)發(fā)并表征了一種單克隆抗體，可以檢測(cè)哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的內(nèi)源性磷酸化 ATG16L1。重要的是，磷酸-ATG16L1 僅存在于新形成的自噬體上。因此，其水平不受長(zhǎng)期壓力或晚期自噬阻滯的影響，這可能會(huì)混淆自噬分析。此外，我們表明 ATG16L1 磷酸化是一種保守的信號(hào)通路，由許多自噬誘導(dǎo)應(yīng)激源激活。所述抗體適用于免疫印跡、免疫熒光和免疫組織化學(xué)，測(cè)量的磷酸化 ATG16L1 水平直接對(duì)應(yīng)于自噬率。總之，這種磷酸化抗體代表了研究自噬誘導(dǎo)的令人興奮的工具。

② Cell文章：Zhou, Ben et al. "Mitochondrial Permeability Uncouples Elevated Autophagy and Lifespan Extension". Cell vol. 177,2 (2019):

【摘要】自噬在延長(zhǎng)壽命的不同范例中是必需的，這導(dǎo)致了一種普遍的觀念，即自噬有益于長(zhǎng)壽。然而，為什么自噬在某些情況下是有害的仍然無(wú)法解釋。在這里，我們表明線粒體通透性定義了自噬對(duì)衰老的影響。由于線粒體通透性增加，缺乏血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶-1 (sgk-1) 的秀麗隱桿線蟲的自噬升高出人意料地縮短了壽命。在 sgk-1 突變體中，降低自噬水平或線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔 (mPTP) 開(kāi)口可恢復(fù)正常壽命。值得注意的是，在所有檢查自噬依賴性壽命延長(zhǎng)的范例中都需要低線粒體通透性。遺傳誘導(dǎo)的 mPTP 開(kāi)放阻斷了由熱量限制或生殖系干細(xì)胞丟失導(dǎo)致的自噬依賴性壽命延長(zhǎng)。線粒體通透性同樣將自噬轉(zhuǎn)化為哺乳動(dòng)物的破壞力，因?yàn)楦闻K特異性 Sgk 敲除小鼠表現(xiàn)出肝細(xì)胞自噬、mPTP 開(kāi)放和缺血/再灌注損傷死亡的顯著增強(qiáng)。靶向線粒體通透性可以最大限度地發(fā)揮自噬在衰老中的作用。

已發(fā)表文章（尚有幾百篇未展示）：

• Thongon, Natthakan, et al. "Hematopoiesis under telomere attrition at the single-cell resolution." Nature communications 12.1(2021)

• Cabezudo, Sofía, et al. "Gαq activation modulates autophagy by promoting mTORC1 signaling." Nature communications 12.1(2021): 1-19.

• Tian, W., Alsaadi, R., Guo, Z. et al. An antibody for analysis of autophagy induction. Nat Methods 17, 232–239 (2020)

• Zhou, Ben et al. "Mitochondrial Permeability Uncouples Elevated Autophagy and Lifespan Extension". Cell  vol.177,2 (2019)

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