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熒光染料是細(xì)胞生物學(xué)等科學(xué)研究中不可或缺的重要工具,熒光濾色塊是熒光顯微鏡中至關(guān)重要的一個(gè)部件。我們大家在操作熒光染料亮度的時(shí)候,我們可以按照上面的比較方法去比較熒光染料的亮度,那么一般熒光染料亮度怎么進(jìn)行比較?
熒光染料的亮度可以用來比較不同熒光染料的熒光標(biāo)記效果,通過陰性細(xì)胞群與陽性細(xì)胞群的熒光信號(hào)之間的關(guān)系來表示。但陰性細(xì)胞群的熒光信號(hào)受到信號(hào)強(qiáng)度、自發(fā)熒光、非特異性染色、儀器的電子噪聲等多個(gè)因素相關(guān)。
熒光染料染色指數(shù)是陽性細(xì)胞群的平均熒光強(qiáng)度與陰性細(xì)胞群的平均熒光強(qiáng)度之差與陰性細(xì)胞群熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)差之間比值的一半。熒光染料染色系數(shù)只和抗體克隆與質(zhì)量、熒光團(tuán)純度與質(zhì)量、熒光修飾比、激光線及其功率、長通和帶通濾光片、目的細(xì)胞等因素相關(guān)。
熒光染料的染色指數(shù)與熒光染料的亮度呈正相關(guān),也就是熒光染料亮度越高,染色系數(shù)也就高。
DNA染料:

圖1.用Cell Navigator™脂質(zhì)液滴熒光測定試劑盒(Cat#22735)和Nuclear Green™LCS1(Cat#17540)染色的油酸處理過的HeLa細(xì)胞的熒光圖像。
| 染料名稱 | 標(biāo)記部位 | 激光 | 濾光片組 | 亮度 |
| DAPI(17510) | DNA | 355 nm | DAPI | 6 |
| Nuclear Blue(17548) | DNA | 355 nm | DAPI | 6 |
| Nuclear Green(17540) | DNA | 488 nm | FITC | 6 |
| Nuclear Orange(17541) | DNA | 488 nm | Cy3 | 6 |
| Propidium Iodide(17515) | DNA | 532 nm | Texas Red | 3 |
| Nuclear Red(17542) | DNA | 633 nm | Cy5.5 | 6 |
細(xì)胞增殖染料:

圖2.用CytoTell™Green和CFSE進(jìn)行的細(xì)胞增殖測定。在第0天,用CytoTell™Green或CFSE對Jurkat細(xì)胞(?2×106細(xì)胞/ mL)進(jìn)行染色。在指定的那天,以1:1的比例連續(xù)通過細(xì)胞。在通過當(dāng)天,在FITC通道中用ACEA NovoCyte 3000流式細(xì)胞儀測量熒光強(qiáng)度。連續(xù)幾代人以不同的顏色代表。
| 染料名稱 | 功能 | 激光 | 濾光片 | 亮度 |
| CytoTell Blue(22251) | 增殖 | 405 nm | DAPI | 6 |
| CFSE(22022) | 增殖 | 488 nm | FITC | 7 |
| CytoTell Green(22253) | 增殖 | 488 nm | FITC | 7 |
| CytoTell Orange(22257) | 增殖 | 488 nm | Cy3/TRITC | 7 |
| CytoTell UltraGreen(22240) | 增殖 | 488 nm | FITC | 7 |
| CytoTell Red 590(22261) | 增殖 | 561 nm | Cy3 | 7 |
| CytoTell Red 650(22255) | 增殖 | 633 nm | Cy5 | 7 |
細(xì)胞活力檢測染料

圖3.用CytoCalcein Violet 500(Cat#22013)染色的活HeLa細(xì)胞圖像。細(xì)胞核用Hoechst 33342(Blue,Cat#17535)染色。
| 染料名稱 | 功能 | 激光 | 濾光片 | 亮度 |
| Calcein Blue(22006) | 細(xì)胞活力 | 405 nm | DAPI | 6 |
| Calcein UltraBlue(21908) | 細(xì)胞活力 | 405 nm | DAPI | 6 |
| CytoCalcein Violet 450(22012) | 細(xì)胞活力 | 405 nm | DAPI | 7 |
| CytoCalcein Violet 500(22013) | 細(xì)胞活力 | 405 nm | FITC | 7 |
| Calcein(22001) | 細(xì)胞活力 | 488 nm | FITC | 7 |
| Calcein Orange(22008) | 細(xì)胞活力 | 488 nm | TRITC | 7 |
| Calcein UltraGreen(21905) | 細(xì)胞活力 | 488 nm | FITC | 7 |
| 7-AAD(17501) | 細(xì)胞活力 | 532 nm | Cy5 | 2 |
| Calcein Red(21900) | 細(xì)胞活力 | 561nm | Cy3/TRITC | 7 |
| Calcein Deep Red(21902) | 細(xì)胞活力 | 633 nm | Cy5 | 7 |
熒光標(biāo)記染料
圖4.將 HeLa細(xì)胞與(Tubulin +)或不與(Tubulin-)小鼠抗微管蛋白一起孵育,然后與iFluor™488山羊抗小鼠IgG綴合物(綠色,左)或AlexaFluor®488山羊抗小鼠IgG綴合物(綠色,右)。細(xì)胞核用Hoechst 33342(藍(lán)色)染色。
| 染料名稱 | 功能 | 激光 | 濾光片 | 亮度 |
| Alexa Fluor 350 | 標(biāo)記 | 355 nm | DAPI | 2 |
| iFluor 350(1020) | 標(biāo)記 | 355 nm | DAPI | 6 |
| iFluor 450(1026) | 標(biāo)記 | 405 nm | FITC | 5 |
| Pacific Green | 標(biāo)記 | 405 nm | FITC | 5 |
| Pacific Orange | 標(biāo)記 | 405 nm | TRITC | 2 |
| iFluor 405(1021) | 標(biāo)記 | 405 nm | DAPI | 6 |
| iFluor 430(1052) | 標(biāo)記 | 405 nm | FITC | 6 |
| Pacific Blue(570) | 標(biāo)記 | 405 nm | DAPI | 2 |
| Alexa Fluor 555 | 標(biāo)記 | 488 nm | TRITC | 4 |
| Cy3(141) | 標(biāo)記 | 488 nm | TRITC | 4 |
| Alexa Fluor 488(1812) | 標(biāo)記 | 488 nm | FITC | 5 |
| FITC | 標(biāo)記 | 488 nm | FITC | 7 |
| iFluor 488(1023) | 標(biāo)記 | 488 nm | FITC | 7 |
| Oregon Green | 標(biāo)記 | 488 nm | FITC | 7 |
| TRITC | 標(biāo)記 | 488 nm | TRITC | 7 |
| PE-Alexa Fluor 594 | 標(biāo)記 | 488 nm | Texas Red | 9 |
| PE-Alexa Fluor 750 | 標(biāo)記 | 488 nm | Cy7 | 9 |
| PE-iFluor 594(2584) | 標(biāo)記 | 488 nm | Texas Red | 9 |
| PE-iFluor 750(2578) | 標(biāo)記 | 488 nm | Cy7 | 9 |
| PE(2558) | 標(biāo)記 | 488 nm | TRITC | 10 |
| PE-Alexa Fluor 647 | 標(biāo)記 | 488 nm | Cy5 | 7 |
| PE-Cy5(2610) | 標(biāo)記 | 488 nm | Cy5.5 | 10 |
| PE-Cy5.5(2613) | 標(biāo)記 | 488 nm | Cy5.5 | 7 |
| PE-Cy7(2616) | 標(biāo)記 | 488 nm | Cy7 | 10 |
| PE-iFluor 647(2577) | 標(biāo)記 | 488 nm | Cy5 | 10 |
| PE-Texas Red(2619) | 標(biāo)記 | 488 nm | Texas Red | 10 |
| Alexa Fluor 555(1821) | 標(biāo)記 | 532 nm | TRITC | 5 |
| Alexa Fluor 532(1819) | 標(biāo)記 | 532 nm | TRITC | 7 |
| iFluor 514(1024) | 標(biāo)記 | 532 nm | Cy3/TRITC (590/40) | 7 |
| iFluor 532(1025) | 標(biāo)記 | 532 nm | Cy3/TRITC (590/40) | 7 |
| iFluor 546(1048) | 標(biāo)記 | 532 nm | Cy3/TRITC (590/40) | 7 |
| Alexa Fluor 594(1830) | 標(biāo)記 | 561 nm | Texas Red | 6 |
| iFluor 610(1038) | 標(biāo)記 | 561 nm | Texas Red (610/40) | 6 |
| Texas Red(480) | 標(biāo)記 | 561 nm | Texas Red | 6 |
| iFluor 555(1028) | 標(biāo)記 | 561 nm | Cy3/TRITC (590/40) | 7 |
| iFluor 568(1049) | 標(biāo)記 | 561 nm | Cy3/TRITC (590/40) | 7 |
| iFluor 594(1029) | 標(biāo)記 | 561 nm | Texas Red (610/40) | 7 |
| Alexa Fluor 750(1839) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy7 | 4 |
| iFluor 750(1037) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy7 (780/60) | 4 |
| iFluor 680(1035) | 標(biāo)記 | 633 nm | Custom (712/25) | 5 |
| Alexa Fluor 680(1835) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy5.5 | 6 |
| Alexa Fluor 700(1836) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy7 | 6 |
| Cy7(290) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy7 | 6 |
| iFluor 647(1031) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy5 (660/40) | 6 |
| iFluor 660(1032) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy5 (660/40) | 6 |
| iFluor 700(1036) | 標(biāo)記 | 633 nm | Custom (712/25) | 6 |
| Alexa Fluor 647(1833) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy5 | 7 |
| Cy5(151) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy5 | 7 |
| iFluor 633(1030) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy5 (660/40) | 7 |
| APC-Alexa Fluor 750 | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy7 | 8 |
| APC-Cy5.5(2622) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy5.5 | 8 |
| APC-Cy7(2625) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy7 | 5 |
| APC-iFluor 700(2570) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy7 | 8 |
| APC-iFluor 750(16908) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy7 | 8 |
| APC(2554) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy5 | 9 |
| iFluor 790(1368) | 標(biāo)記 | 633 nm | Cy7 (780/60) | 3 |
| iFluor 800(1379) | 標(biāo)記 | 633 nm | Custom (840/20) | 3 |
| iFluor 810(1389) | 標(biāo)記 | 633 nm | Custom (840/20) | 3 |
| iFluor 820(1399) | 標(biāo)記 | 633 nm | Custom (840/20) | 3 |
| iFluor 860(1409) | 標(biāo)記 | 633 nm | Custom (885/40) | 3 |
艾美捷科技有限公司,通過提供完整的產(chǎn)品和服務(wù)體系、便利的客戶關(guān)系和供應(yīng)鏈管理,為生命科學(xué)研究工作者提供整體打包方案。我們的企業(yè)的核心價(jià)值觀:“激情、敬業(yè)、學(xué)習(xí)、創(chuàng)新、合作、卓越”。激發(fā)我們內(nèi)在的創(chuàng)造力,提供有競爭力的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品和服務(wù),持續(xù)為客戶創(chuàng)造最大價(jià)值是我們的企業(yè)使命。我們的企業(yè)愿景是成為受人尊重、世界一流的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品及服務(wù)供應(yīng)商。
作為一家具有尖端的技術(shù)實(shí)力、一流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè),總部位于武漢光谷國家級(jí)高新技術(shù)開發(fā)區(qū),服務(wù)面向全國。艾美捷科技是集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案,及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶,公司組建了一支經(jīng)驗(yàn)豐富的研發(fā)團(tuán)隊(duì)-艾美捷生物技術(shù)中心,進(jìn)入研發(fā)生產(chǎn)階段,將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們!
艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級(jí)代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在第一時(shí)間為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。
三點(diǎn):
企業(yè)使命:激發(fā)我們內(nèi)在的創(chuàng)造力,提供有競爭力的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品和服務(wù),持續(xù)為客戶創(chuàng)造最大價(jià)值。
企業(yè)愿景:成為受人尊重、世界一流的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品及服務(wù)供應(yīng)商。
艾美捷定位:通過提供完整的產(chǎn)品和服務(wù)體系、便利的客戶關(guān)系和供應(yīng)鏈,為生命科學(xué)研究工作者提供整體打包方案。
六觀:
價(jià)值觀:激情、敬業(yè)、學(xué)習(xí)、創(chuàng)新、合作、卓越。
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